念珠菌与滴虫性阴道炎患者五种支原体的合并感染状况研究

白色念珠菌、阴道毛滴虫、支原体均属于性传播疾病 (ＳＴＤ)病原体。它们分别为真菌、原虫和柔体纲微生物 ,因此药敏谱各不相同。支原体是一组新发现的ＳＴＤ病原体。迄今为止 ,解脲脲原体 (Ｕｕ)、人型支原体 (Ｍｈ)、生殖支原体 (Ｍｇ)、肺炎支原体(Ｍｐｎ)和发酵支原体 (Ｍｆ)等五种支原体均被认为可致ＳＴＤ[1 ,2 ] 。念珠菌性阴道炎和滴虫性阴道炎是我国妇女最常见的ＳＴＤ病种 ,而这两种疾病患者的Ｕｕ、Ｍｈ、Ｍｇ、Ｍｐｎ和Ｍｆ等五种支原体的合并感染状况国内外尚无人报道。为此 ,我们应用被认为是目前检测临床标本中各种支原体最…     

实时荧光PCR在乙肝病毒DNA检测中的临床意义

目的用实时荧光定量PCR检测乙型肝炎患者HBV DNA结果进行分析,以探讨其临床诊疗意义。方法对630例血清标本用时间分辨荧光免疫技术定量测定乙肝炎病毒血清学指标,用荧光定量PCR法检测血标本中的HBVDNA,并依据乙肝两对半结果进行归类分组。结果 630份标本中,大三阳206例标本中有173份HBV-DNA为阳性,阳性率为84.0%,其PCR定量拷贝数为(2.13±0.72)×107/ml;小三阳211例中有64份HBV-DNA阳性,阳性率达到30.3%,PCR定量拷贝数为(1.61±0.85)×106/ml;69份HBs Ab(+)、HBe Ab(+)、HBc Ab(+)标本有33份HBV-DNA阳性,阳性率47.8%;27份HBs Ag(+)、HBc Ab(+)标本中有8份HBV-DNA为阳性,阳性率为29.6%;22份HBe Ab(+)、HBc Ab(+)标本有3份PCR HBV-DNA阳性,阳性率13.6%;20份HBs Ag(+)、HBs Ab(+)、HBe Ag(+)、HBc Ab(+)标本中有17份HBV-DNA为阳性,阳性率为85.0%;17份HBs Ab(+)、HBe Ab(+)阳性标本有3份PCR HBV-DNA阳性,阳性率为17.6%;13份HBs Ab(+)、HBc Ab(+)标本有1份HBV-DNA阳性,阳性率7.7%;12份HBc Ab(+)标本有5份PCR HBV-DNA阳性,阳性率为41.7%;2份HBs Ab(+)的标本HBV-DNA均为阴性,PCR定量拷贝数为1.00E×103;1份HBs Ag(+)标本HBV-DNA均为阳性,阳性率为100%;其余30例全阴性结果和各少见模式基本未见有HBV-DNA的检出。结论 PCR定量测定HBV-DNA可以真实反映体内乙肝病毒感染和复制及病毒载量情况,更有利于临床治疗和疗效观察。     

不同组织细胞中端粒酶活性的表达及其意义

端粒酶在人类细胞永生和致癌的过程中起着至关重要的作用。自１９９８年起，我们采用ＴＲＡＰ－酶联法及ＴＲＡＰ－银染法对２５９例不同的临床标本进行了端粒酶活性的定性定量检测，以探讨端粒酶的活性与不同的组织细胞恶性程度的关系及端粒酶能否作为一个肿瘤标志物广泛应用于临床诊断中。１材料与方法１.１标本来源４０例乳腺癌及癌旁组织标本及４５例乳腺纤维腺瘤等良性肿瘤标本取自于１９９８～１９９９年间无锡市级医院行乳房肿瘤手术切除术的患者。１５例正常外周血标本来自无锡市血防所。其余临床标本皆为我院各科室所提供，其中５…     

鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的对在本单位检出的鲍曼不动杆菌的耐药情况进行分析,为指导合理使用抗生素提供依据。方法应用法国梅里埃公司ATB细菌鉴定仪及配套的革兰阴性杆菌鉴定板（ID32GN）对检出疑似菌株进行鉴定,并对分离出的鲍曼不动杆菌作药敏试验分析。结果2005年7月-2007年7月二年间,在分离出的167株不动杆菌中检出鲍曼不动杆菌94株,占56.3％。药敏结果亚胺培南的耐药率最低（3.2％）,其次为头孢哌酮舒巴坦（12.7％）和阿米卡星（13.9％）;头孢噻肟、头孢他啶和头孢吡肟的耐药率分别为38.3％、33.0％和26.6％。结论鲍曼不动杆菌耐药率较高且有多重耐药现象,应引起临床的高度重视。一旦发现感染耐药株,必须迅速采取控制措施,避免引起医院感染的流行。     

SYBRGreenⅠ染料法定量PCR用于人体疟原虫定量检测及虫种鉴别的研究

目的 建立一种可用于疟原虫检测并同时鉴别虫种的荧光定量PCR方法.方法 根据人体疟原虫18SrRNA基因序列特征,在疟原虫种特异性区域两侧的属特异性保守区设计引物,对4种人体疟原虫进行PCR扩增,将得到的扩增产物采用TA克隆法插入pGEM-T载体制备标准质粒,用于制备标准曲线进行定量分析,并进行熔解曲线分析,测定各虫种扩增产物的熔解温度.结果 4种人体疟原虫均能扩增得到特异性片断,荧光定量PCR方法中建立的标准曲线相关关系较好(相关系数r =-1.00),熔解曲线分析结果显示,4种人体疟原虫的熔解温度相差较大,分别为三日疟原虫71.3℃、恶性疟原虫72.8℃、卵形疟原虫74.6℃和间日疟原虫75.8℃.结论 建立的SYBR Green Ⅰ染料法荧光定量PCR技术可同时进行人体疟原虫的定量检测和虫种鉴别.     

液体培养法与套式PCR法检测解脲脲原体比较研究

目的：评价解脲脲原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ,Ｕｕ）液体培养技术的准确性。方法：应用被认为是目前检测临床标本中支原体最为灵敏、特异的套式ＰＣＲ技术,并辅以ＤＮＡ全自动测序技术,对１５４例男性ＳＴＤ者的尿道拭子和８３例女性ＳＴＤ者的阴道拭子配对进行Ｕｕ液体培养法和套式ＰＣＲ法检测。并以套式ＰＣＲ检测为参照系进行统计分析。结果：一、男性ＳＴＤ者Ｕｕ液体培养准确率为６３．０％,假阴性和假阳性率分别为２８．５７％和８．４４％;二、女性ＳＴＤ者Ｕｕ液体培养准确率仅为３８．５５％,假阴性和假阳性率分别４９．４０％和１２．０５％。三、男、女性ＳＴＤ者合并观察Ｕｕ液体培养准确率为５４．４３％,假阴性和假阳性率分别为３５．８６％和９．７％。四、Ｕｕ套式ＰＣＲ产物经ＤＮＡ全自动测序与Ｕｕ标准株（９６０＾Ｔ）完     

性传播疾病患者支原体感染情况的研究

〔目的〕了解无锡口岸出入境人员、口岸服务人员和其他就诊人员中性传播疾病(STD)的解脲脲原体(Uu)、人型支原体(Mh)和生殖支原体(Mg)感染状况。〔方法〕应用套式PCR(nested PCR,nPCR)技术检测了337例男性STD者尿道拭子和189例女性SID者宫颈拭子中的Uu、Mh和Mg。〔结果〕(1)男性STD者Uu、Mh、Mg感染率分别为46.3％、20.5％、5.6％;女性则为60.8％、36.5％、4.2％。男、女感染率均为Uu>Mh>Mg。(2)男、女性STD者的Uu、Mh、Mg 3种支原体最常见的感染模式为单独Uu感染、单独Mh感染和Uu与Mh合并感染,分别占本组526例男、女性STD者的33.7％、11.0％和13.7％。〔结论〕无锡地区口岸相关男、女性STD者中以Uu感染、Mh感染以及Uu、Mh合并感染较为常见。     

HIV检测基因芯片的研制和应用评价

目的研制用于HIV检测的基因芯片,并评价其在临床诊断和出入境检疫中的应用价值。方法针对HIV-1gags基因相对保守区域,设计检测探针,并设计内标和对照探针,制备HIV检测微阵列基因芯片;设计引物,以1:20引物比例不对称扩增HIV基因靶标,Cy3荧光标记扩增产物,作为杂交模板。Cy3荧光标记PCR扩增产物与微阵列探针杂交反应,结果经荧光扫描,并用分型软件分析判断阳性探针和样本HIV阴阳性。采用信号放大、梯度临界值技术,增加了检测的灵敏度和特异性。采用70例临床样本实样检测与DNA测序作对照,评价试剂盒的性能和应用价值。结果70例样本,采用本试剂盒与DNA测序并行检测,两者符合率为98.57%。结论本HIV检测基因芯片试剂盒具有高通量、操作简便、低成本、准确度好等优点,应用研究表明,在临床HIV诊断检测和出入境检测方面具有很高的应用价值。     

寡核苷酸微阵列芯片在人乳头瘤病毒基因分型检测中的应用评估

目的探讨寡核苷酸微阵列芯片技术在人乳头瘤病毒(HPV)检测中的实用价值。方法使用HPV寡核苷酸微阵列芯片试剂盒对227例宫颈拭子样本进行16种高危型(HPV-16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,CP8304)和5种低危型(6,11,42,43和44)检测,所检测的样本为HC2探针捕捉法检测所得到的HPV高危型和低危型样本,用以评估该DNA微阵列试剂的性能。结果190例经HC2法检测为高危型HPV阳性以及30例被HC2法检测为低危型的样品被寡核苷酸微阵列芯片试剂盒检测出具体的高危和低危HPV型别,总共检测出13种高危型和5种低位危型HPV亚型,在高危亚型中,各型检出率分别是16型26.01%、58型20.18%、52型14.71%、68型7.59%、31型7.13%、33型6.37%、66型6.24%、18型4.05%、59型2.18%、39型1.10%、56型1.50%、45型1.40%、51型1.07%;在低危亚型中,各型检出率分别为6型45.43%、11型29.70%、42型14.11%、43型5.89%和44型5.00%。单一HPV亚型感染及2种、3种HPV亚型混合感染分别为60.46%、29.89%、9.65%。7例经HC2检测为高危型,但寡核苷酸微阵列芯片试剂盒未能检测出HPV的具体型别,寡核苷酸微阵列芯片试剂盒与HC2法高危型HPV检测结果的符合率为96.92%(220/227)。结论HPV寡核苷酸微阵列芯片试剂盒与HC2法高危型HPV检测阳性符合率高,并可以明确具体分析21种HPV型别,是一种准确、高效、经济的HPV型别检测方法,可用于HPV的常规基因型分型诊断及人群筛查。     

STD者病灶部肺炎支原体分子检测与培养分离

目的:确认我国STD者病灶部是否存在肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mpn。方法:应用套式PCR和DNA测序等分子检测技术对尿道拭子/阴道拭子标本进行检测,并对部分Mpn套式PCR阳性病例进行了Mpn培养。结果:786例STD者的尿道拭子/阴道拭子标本经Mpn套式PCR检测共有74例呈阳性结果,阳性率为9.4％。其中484名男性阳性率为10.5％,302名女性阳性率为7.6％,两者无明显差异(P>0.05);男女性STD各病种均有Mpn阳性者。12例Mpn套式PCR阳性者拭子标本经Mpn培养4例初代培养呈阳性。其中1例成功传代。本文对1例拭子标本和1例Mpn培养分离之传代标本的Mpn套式PCR产物进行了DNA测序,测得序列与Mpn典型株一致。结论:我国男女性STD者的病灶部存在Mpn。