中西医结合外科的临床教学工作体会

中西医结合是我院办院方向，同时也是我院办院特色。中西医结合事业的发展，需要中西医结合方面人才的共同努力，其中很重要的方面是对中西医结合人才的培养。一个好医生，一位名医的成长，在临床实习期间的培养是至关重要的。临床实习相当于孵化器作用，医生的很多品质都是在实习过程中培养出来的，如爱心、责任心、敬业精神、专业兴趣等。因此，作为临床带教老师，不仅要有精湛的技艺，更重要的是高尚的人品，同时，还要有明确的奋斗目标。我们深深体会到临床带教对一位好医生的成长所起的重要作用。下面就中西医结合外科临床教学的工作体会介绍如下。     

去甲斑蝥素对蛋白负荷肾病大鼠干预的研究

目的 观察去甲斑蝥素对蛋白负荷肾病大鼠蛋白尿及肾脏病理的影响。 方法 摘除SD大鼠右肾，腹腔注射牛血清白蛋白，建立蛋白负荷肾病模型后分成模型组和去甲斑蝥素组；对照组仅注射生理盐水。检测各时间点各组大鼠尿蛋白定量（24 h）。第5周末处死大鼠，检测血常规及生化指标；肾组织行光镜、电镜及免疫荧光染色作病理学检查。 结果 与对照组比较，模型组肾重/体重、各时间点尿蛋白定量（24 h）、肾小球硬化指数、小管间质病理损伤积分均显著升高（P均 ＜ 0.01）， 血清白蛋白（Alb）显著降低（P ＜ 0.01)。电镜结果显示模型组小鼠肾小球系膜区有明显电子致密物沉积，足突融合；免疫荧光显示IgG和C3沉积于系膜区（3+～4+）。去甲斑蝥素干预后，肾病大鼠除Alb升高（P ＜ 0.01）外，上述其余指标均显著降低（P ＜ 0.05或0.01)；系膜区有散在电子致密物沉积，足突灶状融合；IgG和C3免疫荧光染色强度减弱。各组间Scr、BUN、ALT及血常规差异均无统计学意义。 结论 去甲斑蝥素能显著降低蛋白负荷肾病大鼠尿蛋白，减轻其肾小管间质病理损伤，且无肝肾毒性及骨髓抑制等严重不良反应。     

转化生长因子β1短发夹RNA对白蛋白刺激人肾近曲小管上皮细胞细胞因子表达的影响

目的 研究pcDU6载体质粒介导的转化生长因子β1（TGF-β1）短发夹RNA（shRNA）对人血清白蛋白（HSA）致人肾近曲小管上皮细胞（HK2细胞）增殖，TGF-β1、结缔组织生长因子（CTGF）和纤连蛋白（FN）表达的影响，并探讨有关机制。方法 构建TGF-β1shRNA的pcDU6载体质粒，体外培养HK2细胞株。采用脂质体转染将表达TGF-β1shRNA的pcDU6质粒载体（pcDU6-A1-A2和peDU6-B1-B2）分别导人实验组细胞。用HSA（5g／L）刺激HK2细胞12h或24h。四甲基偶氮唑盐（MTF）比色法测定细胞增殖水平。RT-PCR半定量分析HK2细胞中TGF-β1、CTGF和FNmRNA的表达水平；双抗夹心酶联免疫吸附法检测HK2细胞培养液中TGF-β1及FN蛋白质水平。结果 HK2细胞在HSA刺激下，其TGF-β1、CTGF及FNmRNA的表达明显上调，培养液中TGF-β1和FN的蛋白质含量亦明显升高（P〈0．05）。与pcDU6空载体组比较，pcDU6载体质粒介导的TGF-β1shRNA干扰组TGF-β1、CTGF及FNmRNA的表达明显下调（P〈0．05）。TGF-β1shRNA转染HK2细胞后12h或24h，细胞培养液中TGF-β1和FN蛋白质含量明显下降，HK2细胞增殖被部分抑制（P〈0．05）。在细胞增殖、TGF-β1、CTGF及FN基因表达方面，TGF-β1shRNA干扰组组间比较，以及pcDU6空载体转染组与HSA刺激组比较，差异均无统计学意义。结论 peDU6载体质粒介导的TGF-β1shRNA能够明显抑制HSA刺激下HK2细胞增殖、TGF-β1、CTGF和FN基因的表达。HSA刺激HK2细胞增殖及CTGF和FN基因的过表达可能通过TGF-β1介导。     

人正、反义转化生长因子beta1基因真核表达载体的构建

目的 :构建人转化生长因子beta 1(TGFβ1)正、反义基因真核表达载体。方法 :从人胎脑的cDNA文库中扩增出TGFβ1共 12 84bp长的DNA片段后 ,与T载体直接进行高效连接 ,并测序证实无突变。接着利用TGFβ1引物两端所设计的酶切位点将目的片段定向亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1( )。构建的正反义表达重组体 (pcDNA3.1 TGFβ1和pcDNA3.1 antiTGFβ1)经限制性内切酶消化证实其中有目的片段完整插入。结果 :本实验成功构建了人正、反义TGFβ1基因真核表达载体。结论 :人正、反义TGFβ1基因真核表达载体的构建 ,为今后研究腹膜纤维化的防治奠定了实验基础。     

高渗与低渗造影剂对原有肾损害大鼠肾毒性的研究

研究高、低渗造影剂对甘油肾损害大鼠肾毒性及氨氯地平的保护作用。结果表明：高渗造影剂组血清尿素氮和血清肌酐、肾组织磷脂酶Ａ２，脂质过氧化物含量，肾小管损害积分均明显高于低渗造影剂组及甘油对照组。氨氯地平预防组肾损害明显轻于高渗造影剂组。提示低渗造影剂肾毒性较小，氨氯地平对泛影葡胺肾毒性有保护作用。     

人腹膜间皮细胞的培养及特征

目的 :建立人腹膜间皮细胞 (HPMC)培养模型 ,检测HPMC细胞外基质蛋白及白细胞介素 (IL - 8)的表达。方法 :采用胰蛋白酶 -EDTA消化法 ,从人的腹膜组织中分离HPMC。采用形态学和链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶连接法 (即SP法 ) ,对培养细胞进行鉴定。采用SP法检测HPMC纤维连接蛋白 (FN)、胶原Ⅲ和胶原V及转化生长因子 (TGF) β1表达。采用逆转录多聚酶链反应 (RT -PCR)检测HPMCIL - 8mRNA和FNmRNA的表达。结果 :光镜示细胞融合后呈多边形 ,超微结构下可见丰富的微绒毛和内质网 ,免疫组化染色结果示HPMC可表达角蛋白 ,波形蛋白 ,胶原Ⅲ ,FN ,TGFβ1蛋白 ,Ⅷ因子、胶原V表达阴性。人腹膜间皮细胞亦表达FNmRNA和IL - 8mRNA。结论 :HPMC培养模型的建立 ,可为进一步研究腹膜纤维化的防治及IL - 8在腹膜透析中的作用提供理论依据。     

腹腔镜下头尾结合入路与完全头侧入路手术治疗右半结肠癌的临床疗效对比

背景与目的：腹腔镜右半结肠癌根治术采用头侧入路和尾侧入路均已得到认可,但两种方法的联合应用还较少。本研究探讨头尾结合入路方式与完全头侧入路治疗右半结肠癌的临床效果及其安全性。 方法：选取我院拟实施腹腔镜结肠癌根治术的患者150例,采用随机数字表分为头尾结合入路组和完全头侧入路组,各组75例。分别采用头尾结合入路方式手术和完全头侧入路方式手术;对比两组的手术过程指标、术后恢复情况、并发症的发生率差异。 结果：头尾结合入路组和完全头侧入路组患者的TNM分期、肿瘤直径、肿瘤部位、肿瘤分化程度、淋巴结转移情况比较,差异无统计学意义（P>0.05）;头尾结合入路组的手术时间、手术出血量、拔除引流管时间均低于完全头侧入路组 [（127.6±27.8）min vs. （148.0±28.5）min;（63.31±17.20）mL vs. （98.44±22.04）mL;（6.12±1.40）d vs.（6.73±1.54）d],组间差异均有统计学意义（P<0.05）;头尾结合入路组患者的清扫淋巴结数目、阳性淋巴结数目、肛门排气时间、首次进食流质饮食时间、住院时间与完全头侧入路组比较,组间差异均无统计学意义[（17.3±2.4）枚vs.（16.8±2.7）枚,（2.8±1.1）枚vs.（3.0±1.0）枚,（2.79±0.73）d vs.（2.90±0.68）d,（5.11±1.32）d vs. （5.30±1.48）d,（13.82±2.20）d vs.（14.51±2.47）d,P>0.05];头尾结合入路组的手术并发症率低于完全头侧入路组（6.67%  vs. 18.67%,P<0.05）。 结论：头尾结合入路方式与完全头侧入路方式治疗右半结肠癌的临床效果相当,前者具有手术创伤更小、术后并发症更少的优势。     

CAPD患者蛋白质丢失与腹透时间、PET与KT／Vurea的关系

对16例新透析患者（透析时间在30d）和透析时间＞1年的19例患者蛋白质丢失与渐近时间、腹膜平衡试验（PET）及尿素清除指数（KT／Vurea ）关系进行了分析。结果发现：两组患者腹膜透液中,蛋白质丢失量比较差异无显著性（P＞0．05）。在PETD／Pcr值≥0．65患者腹透液中,蛋白质丢失量与PET D／Pcr值＜0．65患者比较差异无显著性（P＞0．05）。尿素清除指数（KT／Vurea）≥2．0与KT／Vurea＜2．0患者腹透液中蛋白质丢失量比较亦无无统计学意义（P＞0．05）。提示,常规CAPD无腹膜炎患者腹透液中蛋白质丢失量与透析时间,小分子溶质转运,透析是否充分无相关性;进一步支持大分子蛋白质转运与小分子溶质转运可能为不同途径。     

血栓性浅静脉炎18例治疗体会

血栓性浅静脉炎是临床常见周围血管疾病之一,我院门诊自2001年6月至2002年12月采用中药内服共治疗此类病人18例,均取得良好疗效。现将治疗体会报告如下。1 临床资料1.1一般资料 18例全部为门诊病人。其中:男10例,女8例;年龄最大81岁,最小21岁,平均41.4岁;发病部位以下肢多见共10例,其中单下肢8例,双侧者2例;上肢5例,均为单侧。另3例为腹壁浅静脉炎。18例中伴有下肢浅静脉曲张者8例,有静     

PPAR-γ激动剂Troglitazone对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞mPGEs蛋白表达的影响

目的　研究PPAR -γ激动剂Troglitazone对高浓度葡萄糖作用的大鼠肾小球系膜细胞mPGEs蛋白表达水平的影响。方法　用高浓度葡萄糖和不同浓度Troglitazone作用大鼠肾小球系膜细胞 ,ELISA法检测上清液中mPGEs浓度。结果　 5 %葡萄糖可使体外培养的大鼠系膜细胞mPGEs蛋白表达水平明显增高 ( P <0 0 5 ) ;10～ 2 0nmol/L的Troglitazone可明显抑制 5 %葡萄糖诱导的大鼠系膜细胞mPGEs蛋白表达水平的增高 (P <0 0 5 )。结论　高浓度葡萄糖可诱导体外培养的大鼠系膜细胞mPGEs蛋白表达水平明显增高 ,PPAR -γ激动剂Troglitazone可明显抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞mPGEs蛋白表达水平的增高