野生型INK4a/ARF基因共转染对A549细胞生物学行为的影响

背景与目的INK4a／ARF基因是重要的细胞周期调控基因，其表达产物p16INK4a和p14ARF蛋白分别在Rb和p53通路中发挥重要调节作用。本研究将野生型INK4a／ARF基因同时转染到该基因位点缺失的人肺腺癌A549细胞中，研究其对该细胞生物学行为的影响。方法利用阳离子脂质体介导的基因转染技术，将含有人全长野生型INK4a／ARF基因的真核表达重组质粒pcDNA3-p16INK4a和pcDNA3-p14ARF同时导入A549细胞系中，确定所编码蛋白p16INK4a和p14ARF稳定表达；在设立空白组和空质粒转染组的情况下，进行了转染前后细胞生长曲线、克隆形成率、周期分布、凋亡指数等指标的检测和分析。结果转染INK4a／ARF基因后的细胞G0／G1期比例为59．9％，与未转染（51．2％）及空质粒转染（50．3％）细胞相比差异显著（P值分别为0．043和0．025），同时S期和G2／M期的比例下降；转染后细胞克隆形成率为63％，未转染细胞和空质粒转染细胞分别为85％和87％（P值均〈0．01），凋亡指数明显增加，转染INK4a／ARF基因后的细胞凋亡率为8．0％，另两种细胞均为2．7％，差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论阳离子脂质体可以有效地将INK4a／ARF基因导入A549细胞，并可以抑制A549细胞的生长，促进凋亡作用的增强，为将来肺癌的基因治疗提供了实验依据。     

103例非小细胞肺癌p16INK4a蛋白表达及其临床意义

目的研究p16INK4a蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学S-P方法检测103例NSCLC癌组织标本中p16INK4a蛋白表达,同时以20例肺部炎症病变组织做对照.结果 103例标本中,p16INK4a阳性表达58例,阴性表达45例,表达阴性率为43.69%,其中鳞癌、腺癌、肺泡癌中p16INK4a表达阴性率分别为58.82% (20/34)、39.39% (13/33)、33.33% (12/36),且鳞癌与肺泡癌之间p16INK4a表达阴性率差异有显著意义(P<0.01).临床Ⅲ Ⅳ期病例p16INK4a蛋白表达阴性率为60.71%,明显高于临床Ⅰ Ⅱ期病例(35.14%),差异有显著性意义(P<0.05).结论 p16INK4a蛋白表达异常在肺鳞癌中常见,提示p16INK4a蛋白表达异常在肺鳞癌的发生、发展中起重要作用,它有可能成为预测肺癌患者病程进展的指标之一.     

聚乙烯醇-卟啉新型纳米颗粒的制备及其光热特性

目的 将一定比例的脱镁叶绿酸引入聚乙烯醇-硫辛酸聚合物中,分析其理化性质及光热特性.方法 采用“一步法”合成聚乙烯醇-硫辛酸-脱镁叶绿酸(PLP)聚合物,激光粒径测定仪测定PLP纳米颗粒(PLPN)的粒径、多分散系数和ζ电位,电镜下观察形态,分光光度法和热成像仪初步探索其体外荧光和光热特性;建立卵巢癌裸鼠模型,行初步的体内实验评价.结果 合成的PLP聚合物在水相中自组装形成规则的球状纳米颗粒,电镜下呈紧密的球状结构,平均粒径、多分散系数和ζ电位分别为(22.92±9.00)nm、0.117±0.056和(-25.43±0.77)mV;PLPN在磷酸盐缓冲液(PBS)中的荧光强度明显低于十二烷基硫酸钠(SDS)溶液(P＜0.05),而近红外光照后温度明显高于SDS溶液(P＜0.05);在荷瘤裸鼠模型中,PLPN可靶向聚集在肿瘤部位,近红外光激发后能明显提高肿瘤部位的温度,并能杀伤肿瘤细胞.结论 PLPN发射红色荧光,能靶向聚集在肿瘤部位并行活体显像,且在体内外均具有显著的光热转换特性,在体内能有效抑制肿瘤的生长.     

细胞周期专职调控基因INK4a-ARF与妇科肿瘤

INK4a-ARF基因是新近发现的抑癌基因，包含两个重叠基因：INK4a和ARF，编码产物p16INK4a和p14ARF蛋白，分别对cyclinD-CDK4-pRb-E2F和MDM2-p53通路具有关键性调控功能，且在大部分恶性肿瘤中缺失表达，其功能失活的机制主要包括该基因的缺失、突变和甲基化。但在妇科肿瘤如宫颈癌及外阴癌中p16INK4a和p14ARF蛋白过表达，提示INK4a-ARF基因在妇科肿瘤发生发展中所起的作用可能与其在其他肿瘤中所起的作用不同，将成为妇科肿瘤检测与预后判断的标志性基因之一。就INK4a-ARF基因与妇科肿瘤关系的研究进展综述。     

个体化延续护理对改善高血压患者生存质量的效果

目的：探究对改善高血压患者进行个体化延续护理生存质量的效果观察。方法：选取自2015年2月至2015年12月在该院治疗的高血压患者58例,分为观察组与对照组,每组29例,对照组对患者进行常规护理,观察组对患者进行个性化延续护理,比较两组患者护理效果。结果：观察组患者在进行个性化延续护理,血压明显低于对照组,观察组患者的并发症发生率显著低于对照组（P ＜0.05）。结论：对高血压患者进行个性化延续护理,能够有效降低患者并发症的发生率,可在临床上进一步推广。     

375例宫颈病变患者高危型人乳头瘤病毒感染的研究

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(high-risk Human papillomavirus,hr-HPV)感染与宫颈病变的关系。方法选择2005年1月~2006年6月间在本科住院患者375例,采用第2代杂交捕获试验(HC-Ⅱ)进行hr-HPV DNA的检测,手术切除或阴道镜下定位活检,以病理学结果为确诊标准。结果hr-HPV检测阳性169例,阳性率45.07%,各种病理类型的宫颈病变中hr-HPV感染率分别为:慢性宫颈炎14.67%(55/229);宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)50.00%(18/36),包括CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ;宫颈癌(uterine cervix cancer,UCC)87.27%(96/110),包括宫颈鳞癌和宫颈腺癌。随着宫颈病变严重程度的增加,hr-HPV的感染率也增高,它们之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论hr-HPV感染与宫颈病变严重程度密切相关;HC-Ⅱ检测hr-HPV有助于UCC及癌前病变的早期筛查和诊断。     

咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的保护

BACKGROUND: Caffeic acid phenethyl ester (CAPE) can inhibit lipid peroxidation after rat brain injury. However, the trend of 5-lipoxygenaseis (5-LOX) and cysteinyl leukotrienes (CysLTs) in model of Parkinson’s disease, and whether CAPE protects against rotenone-induced cellular injuries by inhibiting the levels of 5-LOX and CysLTs still need further research.     

野生型INK4a/ARF基因共转染对A549细胞药物敏感性的影响

目的　研究野生型INK4a/ARF基因共转染对人肺腺癌A5 4 9细胞药物敏感性的影响。方法　利用阳离子脂质体介导的基因转染技术 ,将含有人全长野生型INK4a/ARF基因的真核表达重组质粒pcDNA3 p16 INK4a和pcDNA3 p14 ARF同时导入该基因位点缺失的人肺腺癌A5 4 9细胞系中 ,确定其编码的蛋白p16 INK4a和p14 ARF稳定表达 ;在设立空白组和空质粒转染组的情况下 ,用 5种不同作用机制的常用肺癌化疗药物 (阿霉素、顺铂、拓朴替康、诺维本和紫杉醇 )作用于转染前后的细胞 ,利用MTT法测定各种不同药物的 5 0 %抑制浓度(IC50 ) ,并测定在该浓度作用下转染细胞的凋亡指数。结果　转染INK4a/ARF基因后 ,A5 4 9细胞对阿霉素和顺铂的IC50 值显著降低 (P <0 0 5 ) ,而拓朴替康、诺维本和紫杉醇的IC50 值无明显变化 (P >0 0 5 ) ;阿霉素和顺铂诱导的凋亡指数也明显高于其他 3种药物。结论　恢复p16 INK4a和p14 ARF蛋白的表达可改变A5 4 9细胞对部分化疗药物的敏感性。     

改良一步法制备人外周血白细胞线粒体DNA

目的建立从少量外周血中提取白细胞线粒体DNA(mtDNA)的快速、简便方法.方法 58份抗凝血静置后取白细胞层,采用碱变性法裂解细胞,酚/氯仿/异戊醇抽提,RNA酶消化后再抽提及沉淀,PCR扩增产物电泳鉴定.结果获得的mtDNA样品不存在蛋白质等污染,用特异性mtDNA PCR引物从58例核酸样品中均能扩增出1 528bp的mtDNA基因片段.结论改良一步法是一种省时、经济、实用、重复性好、能满足常规分子生物学和遗传学分析需要的mtDNA制备新方法.     

细胞周期专职调控基因INK4a-ARF与妇科肿瘤

INK4a-ARF基因是新近发现的抑癌基因,包含两个重叠基因:INK4a和ARF,编码产物p16INK4a和p14ARF蛋白,分别对cyclinD-CDK4-pRb-E2F和MDM2-p53通路具有关键性调控功能,且在大部分恶性肿瘤中缺失表达,其功能失活的机制主要包括该基因的缺失、突变和甲基化.但在妇科肿瘤如宫颈癌及外阴癌中p16INK4a和p14ARF蛋白过表达,提示INK4a-ARF基因在妇科肿瘤发生发展中所起的作用可能与其在其他肿瘤中所起的作用不同,将成为妇科肿瘤检测与预后判断的标志性基因之一.就INK4a-ARF基因与妇科肿瘤关系的研究进展综述.