半枝莲醇提工艺的优化及体外抗氧化活性评价的研究

目的:用正交试验法对半枝莲的乙醇提取工艺进行优化研究,通过体外试验对提取物的抗氧化活性进行评价。方法:以浸膏得率、总黄酮和野黄芩苷从生药中的提取率为评价指标,选择乙醇体积分数(%)、乙醇用量(倍)、提取时间(h)和提取次数(次)为考察因素,利用正交试验L9(34)确定半枝莲的最佳醇提工艺。基于氧化还原反应原理的FRAP法用于总抗氧化能力的评估,DPPH法用于评价自由基清除能力。结果:最佳工艺条件为用药材10倍量的75%乙醇加热回流提取3次,每次1 h。半枝莲提取物以浓度依赖关系发挥着很好的抗氧化作用,对DPPH自由基具有较强的清除和抑制作用。结论:该提取工艺具有较佳的重复性和可行性。半枝莲醇提物显示了较好的抗氧化活性,值得进一步开发研究。     

蟾酥提取工艺优化与提取物体外抗肿瘤活性研究

目的优化蟾酥中脂溶性成分华蟾酥毒基及酯蟾毒配基的提取工艺,并探讨蟾酥提取物对人宫颈癌HeLa细胞和卵巢癌SKOV-3细胞的增殖及细胞周期的影响。方法采用U5（54）均匀设计,考察酒精浓度、酒精用量、提取时间等因素对指标性成分提取的影响;MTT法检测蟾酥提取物对HeLa与SKOV-3细胞增殖的影响;流式细胞技术检测细胞周期变化;倒置显微镜下观察HeLa和SKOV-3细胞形态变化。结果以100倍量95%酒精加热回流提取2次,每次2.5 h,两种指标性成分转移率最大,为（117.20±3.52）%;蟾酥提取物呈时间和剂量依赖性地抑制HeLa和SKOV-3细胞增殖;随着蟾酥提取物剂量的增加,HeLa细胞出现S期和G2/M期阻滞,SKOV-3细胞出现G0/G1期阻滞,两种细胞均出现空泡样变性。结论均匀设计法优选蟾酥有效成分的提取工艺合理可行;蟾酥提取物可显著抑制HeLa和SKOV-3细胞的增殖,使细胞出现空泡样变性,并阻滞细胞周期。     

雷公藤甲素甘油醇质体与凝胶贴膏经皮给药改善大鼠佐剂型关节炎症状的比较研究

  目的：采用大鼠佐剂型关节炎模型,比较载雷公藤甲素甘油醇质体新型经皮给药系统与雷公藤甲素凝胶贴膏剂对大鼠佐剂型关节炎的作用。  方法：采用注入法制备甘油醇质体,测定其粒径分布与包封率;采用聚丙烯酸钠交联法制备雷公藤甲素凝胶贴膏剂;建立大鼠佐剂型关节炎模型,比较雷公藤甲素甘油醇质体与凝胶贴膏对佐剂型关节炎改善作用的优劣。  结果：所制备的雷公藤甲素甘油醇质体平均粒径为(153.10±2.69)nm,电动电位为(－45.73±0.60)mV,包封率为(75.97±0.94)%。透射电镜下观察磷脂囊泡近圆形,表面光滑,分布均匀。局部用药后,与阳性药组(雷公藤多苷口服给药)相比,醇质体组对大鼠的体质量影响较小;醇质体组大鼠的关节炎指数、足跖容积,以及血浆中TNF-α、IL-6与IL-1β的水平均显著低于模型组(P<0.01);与凝胶贴膏组相比,醇质体组经皮给药对TNF-α、IL-6表达的抑制作用更强(P<0.05)。  结论：采用甘油醇质体作为经皮给药载体,可有效改善药物的经皮递送,从而增强雷公藤甲素改善大鼠佐剂型关节炎症状的作用。     

大黄素等中药成分抗肿瘤-血管内皮细胞黏附作用及机制研究

目的：考察活血化瘀中药成分抗肿瘤-血管内皮细胞黏附能力及其机制。方法：运用体外荧光标记肿瘤－内皮细胞黏附模型对中药成分抗肿瘤细胞黏附能力进行考察,并运用Western blotting实验手段检测相关黏附分子蛋白表达。结果：对几种活血化瘀中药成分进行筛选后发现大黄素具有一定的抗肿瘤-内皮黏附能力,同时可降低内皮细胞黏附分子ICAM-1及E-selectin的表达。结论：大黄素具有抗肿瘤-内皮细胞黏附能力,可能是通过降低黏附分子表达的机制实现的。     

抗氧化能力检测方法评估及微型化

 目的评估现有抗氧化能力检测方法,建立微型化抗氧化能力检测方法,加速抗氧化物质的筛选。方法在考察血浆铁还原能力(FRAP)、二苯基苦基苯肼(DPPH)方法学的基础上,建立微型FRAP、DPPH法,并通过微型FRAP、DPPH法对内源性抗氧化剂(维生素C、维生素E、谷胱苷肽、α-硫辛酸、β-胡萝卜素)和外源性抗氧化剂(白藜芦醇)进行抗氧化能力检测,以考察其灵敏度和专属性。结果微型FRAP、DPPH法具有良好的线性、精密度、回收率。与传统FRAP、DPPH方法相比,不仅简便、快速、样品用量大大减少,而且对水溶性维生素E类似物(Trolox)、白藜芦醇、茶多酚的检测结果非常相近,对维生素E、维生素C和白藜芦醇都有很好的灵敏度和专属性。结论①微型抗氧化能力检测方法可以加速评价物质的抗氧化能力;②微型抗氧化能力检测与传统紫外法相比,在评价质量上没有明显区别;③微型抗氧化能力检测方法对内源性和外源性抗氧化物质均显示很好的灵敏度和专属性。     

黄嘌呤氧化酶对血管内皮功能障碍的影响

目的考察黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase)在自发性高血压大鼠(SHR)血管舒缩及内皮功能障碍中的作用。方法采用尾套法测定SHR和正常大鼠(WKY)血压;Greiss反应测定血清一氧化氮分泌量;FRAP(ferric reduction abilitypower)法测定主动脉蛋白总抗氧化能力;RT-PCR法考察黄嘌呤氧化酶及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达情况;血管环舒缩测定来评价黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇(oxypurinol,Oxy)对大鼠腹主动脉内皮依赖性舒张反应的影响。结果SHR血压(191.1±5.6)显著高于WKY大鼠(140.4±5.9)mmHg;SHR血清NO分泌量(28.4±5.4)、主动脉蛋白总抗氧化能力(1.02±0.14)U/μg蛋白和腹主动脉内皮依赖性舒张反应(66.2±4.6)%均显著低于WKY[分别为(51.6±5.8),(2.8±0.3)U/μgpro和81.0%±2.7%);而心、肾及主动脉中黄嘌呤氧化酶表达均显著高于WKY大鼠(P<0.05)。黄嘌呤氧化酶抑制剂Oxy能明显降低黄嘌呤氧化酶mRNA表达(降低31.6%),且改善腹主动脉内皮依赖型舒张反应(提高20.2%),但对eNOS表达则无显著影响。结论结果提示SHR中存在内皮功能障碍和氧化应激状态,黄嘌呤氧化酶参与了SHR内皮功能障碍。     

黄嘌呤氧化酶对血管内皮功能障碍的影响

目的 考察黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase)在自发性高血压大鼠(SHR)血管舒缩及内皮功能障碍中的作用.方法 采用尾套法测定SHR和正常大鼠(WKY)血压;Greiss反应测定血清一氧化氮分泌量;FRAP(ferric reduction ability power)法测定主动脉蛋白总抗氧化能力;RT-PCR法考察黄嘌呤氧化酶及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达情况;血管环舒缩测定来评价黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇(oxypurinol,Oxy)对大鼠腹主动脉内皮依赖性舒张反应的影响.结果 SHR血压(191.1±5.6)显著高于WKY大鼠(140.4±5.9)mm Hg;SHR血清NO分泌量(28.4±5.4)、主动脉蛋白总抗氧化能力(1.02±0.14)U/μg蛋白和腹主动脉内皮依赖性舒张反应(66.2±4.6)%均显著低于WKY[分别为(51.6±5.8),(2.8±0.3)U/μg pro和81.0%±2.7%);而心、肾及主动脉中黄嘌呤氧化酶表达均显著高于WKY大鼠(P＜0.05).黄嘌呤氧化酶抑制剂Oxy能明显降低黄嘌呤氧化酶mRNA表达(降低31.6%),且改善腹主动脉内皮依赖型舒张反应(提高20.2%),但对eNOS表达则无显著影响.结论 结果提示SHR中存在内皮功能障碍和氧化应激状态,黄嘌呤氧化酶参与了SHR内皮功能障碍.     

雷公藤多苷凝胶膏剂的处方优化

目的:优化雷公藤多苷的处方。方法:以膏体的初黏力、剥离强度、综合感官(外观性状、皮肤追随性、残留量)的综合评分为指标,通过正交试验考察甘羟铝、甘油、酒石酸、聚维酮K90用量对制剂处方的影响。结果:各因素均对制剂处方具有显著性影响,尤以甘油与甘羟铝用量对凝胶膏剂成型影响更大,最佳处方中聚维酮K90-甘羟铝-甘油-酒石酸(1.50∶0.15∶30.0∶0.15)。制备的雷公藤多苷凝胶膏剂膏体均匀,色泽一致,皮肤追随性好,敷贴无残留;初黏力、剥离强度及综合感官评分分别为48.89,19.43,28.67分。结论:采用正交试验优选雷公藤多苷凝胶膏剂处方可有效减少试验次数,便于综合分析制剂处方的影响因素,优化的制剂处方稳定可行。