FasL在睾丸细胞的定位

FasL/Fas系统介导的胞外信号凋亡途径是哺乳动物睾丸生殖细胞凋亡的一条主要途径,然而,关于FasL在睾丸细胞中的定位却存在争议。本文对近年来国内外关于FasL在睾丸中的细胞定位研究进行了综述,为阐明FasL/Fas系统介导生殖细胞凋亡的机制提供资料,对深入理解睾丸中Sertoli细胞和生殖细胞间的调控关系及临床实践具有一定的指导作用。     

壬基酚和镉离子在体外对小鼠精子顶体反应的影响

目的:研究壬基酚和镉离子在体外对小鼠精子顶体反应(AR)的影响。方法:从小鼠的输精管获得精子,体外培养使精子获能,加30μmol/L的A23187诱导精子顶体反应,然后使用不同浓度的壬基酚(10、20、30、60、100μmol/L),或者镉离子(500、2500、5000μmol/L)处理,对照组使用相应的载体溶剂处理。用FITC-PSA荧光染色法分析精子顶体反应。结果:当壬基酚浓度<30μmol/L时,小鼠精子顶体反应率与对照组比较没有显著差异(P>0.05),而当壬基酚浓度>60μmol/L时能够显著地抑制小鼠精子顶体反应发生率(P<0.01),并且观察到精子存活率随着壬基酚浓度增加而降低。与壬基酚作用不同,用镉离子对小鼠精子进行处理,在所选浓度内(500~5 000μmol/L)均对精子顶体反应无显著影响(P>0.05),且精子存活率与镉离子浓度变化无关。结论:壬基酚与镉离子对小鼠精子发生的作用是通过不同的途径来实现的,前者可以直接抑制顶体反应,而后者则与精子顶体反应无关。     

慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞及其培养

目的 稳定培养人胚胎干细胞,并通过慢病毒载体对其进行绿色荧光蛋白标记.方法 利用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层或Matrigel作为基质培养人胚胎干细胞,包装带有GFP序列的慢病毒转染人胚胎干细胞.对转染前后的人胚胎干细胞进行了碱性磷酸酶和SSEA-3免疫组化鉴定.结果 在MEF饲养层和Matrigel上均可培养出呈克隆样生长,表达标志抗原的人胚胎干细胞,经慢病毒转染及抗生素筛选后仍可稳定表达GFP.结论 成功地培养了人胚胎干细胞系,并进行了GFP标记.     

三黄组合物对2型糖尿病大鼠模型糖脂代谢的影响

目的探讨由黄连、黄芪和地黄水提物组成的组合物(简称三黄组合物,SH)对2型糖尿病(DM)大鼠糖脂代谢的影响并初探其机制。方法以高糖高脂饲料喂养SD大鼠两个月后小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(25 mg.kg-1),连续注射3 d,建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组(MC),盐酸二甲双胍组(M et),三黄组合物低剂量组(SHL)、中剂量组(SHM)、高剂量组(SHH),外加常规饲料喂养的正常组。给药后第3,10周测空腹血糖水平(FPG),第7周测糖异生水平。于实验结束时腹主动脉取血,测血清胰岛素(Insu lin),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),谷丙转氨酶(ALT),尿酸(Uric ac id),游离脂肪酸(FFA)含量,取肝脏测肝糖原含量。结果与模型组相比,SH各剂量组都能显著降低糖尿病大鼠的血糖水平,以中剂量组效果最明显,与二甲双胍组相近;三黄组合物可以降低DM大鼠TC,TG,LDL-C含量,升高HDL-C水平,促进胰岛素分泌和肝糖原的合成,抑制糖异生,调节血清FFA,ALT的含量。结论三黄组合物可以有效降低糖尿病大鼠的血糖水平...     

体外诱导胚胎干细胞分化为生殖细胞的研究进展

胚胎干细胞是一种具有发育全能性的细胞系，理论上能分化为包括生殖细胞在内的各种组织细胞。由于生殖细胞是遗传物质的传递者，所以胚胎干细胞向生殖细胞分化的研究具有更深刻的科学及伦理挑战性。本文简要介绍各国科学家在胚胎干细胞向生殖细胞分化方面的研究进展。     

探索Sertoli细胞对去除精原细胞的动态反应

目的 探索Sertoli细胞对去除小鼠精原细胞后的动态反应。方法 采用15mg/kg、30 mg/kg和44mg/kg的白消安腹腔注射法建立不同程度去除精原细胞的动物模型,处理后5d和28d时对睾丸进行组织学检测,评价精子发生状态,并运用实时定量荧光PCR技术检测这2个时期睾丸GDNF、PLZF、Nanog和GFRα1基因mRNA的表达量。结果 在白消安处理后第5天,GDNF出现显著升高,且呈剂量依赖趋势,而PLZF与GFRɑ1并无显著变化,睾丸组织学观察亦无明显变化。在白消安处理后28d时,GDNF、PLZF、Nanog、GFRɑ1基因mRNA 相对表达量均出现大幅度的升高,睾丸组织学切片观察显示随着给药剂量的增加,精子发生受到的损伤愈加严重。结论 Sertoli细胞早在白消安处理后第5天就对精原细胞的变化做出了反应,Sertoli细胞分泌GDNF的能力发生代偿性增加,进而刺激精原干细胞自我更新速度加快,体现在Nanog和PLZF水平提高,从而实现精子发生的重建。     

哺乳动物精子的领航机制

哺乳动物精子随精液射入雌性生殖道后,经子宫到达精子贮存地即输卵管峡部。雌性排卵后精子从贮存地释放,还要游动很长的距离才能找到位于输卵管壶腹部的卵子完成受精。比较早期的研究认为:射入雌性生殖道内的精子大量涌向卵子,竞争性地与卵子结合完成受精。因此推测哺乳动物精子寻求卵子的过程主要是竞争机制作用的结果,而精子的领航机制不是必需的。近年来研究事实表明:哺乳动物射出的精子     

亮丙瑞林可促进供体精原干细胞(SSCs)在受体小鼠睾丸的归巢效率

目的:研究亮丙瑞林(GnRH-激动剂)处理受体小鼠促进精原干细胞(SSCs)移植后克隆率的作用时间、方式。方法:使用亮丙瑞林(7.6 mg/kg)或其载体剂(生理盐水)皮下注射处理受体小鼠,然后将供体SSCs(具有GFP标记)通过睾丸输出管注射法移植到经白消胺处理过的受体睾丸曲细精管内,分别于移植后1周和4周采样,在荧光显微镜下观察供体细胞在受体睾丸曲细精管中的归巢数量,供体细胞来源的睾丸数量及曲细精管数量;反转录PCR检测移植后1周和4周睾丸组织中β1-整合素(β1-integrin)mRNA表达水平。结果:在SSCs移植1周后,显微镜下可见亮丙瑞林处理组(实验组)曲细精管中SSCs的归巢数量为20.4±4.3个/曲细精管,显著高于对照组(11.5±3.8个/曲细精管)(P<0.05);在SSCs移植后4周,处理组显示绿色荧光的曲细精管比率(24.1±4.5%)也显著高于对照组(13.4±5.3%,P<0.05)。用反转录PCR检测mRNA表达量,在移植后1周时实验组小鼠睾丸内β1-整合素明显增加(P<0.05),而在移植后4周时β1-整合素与对照组相比无显著差异(P>0.05)。结论:GnRH-激动剂对SSCs的归巢具有重要促进作用,并且提示其归巢作用的发生可能是通过β1-整合素来完成的,从而使SSCs在受体小鼠曲细精管的数量一直(到移植后4周)保持着高于对照组的数量优势。     

维生素A在鼠类雄性生殖中的作用

维生素A对视觉及多种细胞的生长与分化起到基础作用。在鼠类中，它与睾丸的功能调节有关。过量的维生素A使生精紊乱。维生素A缺乏导致生精停滞。维生素A受体突变小鼠不育。本文将从维生素A受体在睾丸中的分布、代谢及其对胚胎和成体睾丸功能的影响等方面概述其重要作用。     

丹参提取物对高脂血症地鼠糖脂代谢的影响

目的观察丹参提取物（SM）对高脂地鼠血脂和血糖代谢的影响并初步探讨其机制。方法高脂饲料诱导高脂金黄地鼠模型,设正常组,模型组,辛伐他汀组（1 mg.kg-1）,SM给药组（4.5,9.0 g.kg-1）。每两周检测一次血清TC,TG,HDL-C和LDL-C水平。49 d后剖杀地鼠,检测血脂4项指标、血糖、ApoA1/B,MDA与FFA水平以及SOD活力。HE染色观察地鼠肝脏病变。结果SM明显降低高脂地鼠血清的TC,TG,LDL-C,ApoB,MDA与FFA水平,轻微升高血糖浓度,明显升高SOD活性,而对HDL-C与ApoA1水平无明显作用。HE染色表明丹参可明显改善高脂地鼠的肝细胞脂肪变性。结论SM能有效调节高脂地鼠的糖脂代谢,其调脂机制可能与其降低ApoB与FFA水平以及抗氧化功能有关。