丙种球蛋白治疗特发性血小板减少性紫癜

1　对象和方法1 .1　对象　 2 4 (女 1 8,男 6)例特发性血小板减少性紫癜 ITP(idiopathic thrombocytopenic purura,ITP)患者均为我院住院患者 ,诊断符合首届中华血液学会血栓与止血学术会议制定的诊断标准 [1 ] .病程 <6mo1 0例 ,>6mo8例 ,>1 2 mo6例 ,最长 1 5mo.初治者 1 0例 ,复治者 1 4例 .复治者为用泼尼松、达那唑或长春新碱无效或疗效不显著者 .各例均有较严重的皮肤、粘膜出血 ,包括皮肤出血点及瘀斑、口腔粘膜血泡及齿龈出血 ,以及消化道出血、泌尿道出血、月经过多等 .2 4例均进行了骨髓涂片检查 ,骨髓增生均在正常范围内 ;巨…     

环孢素A治疗纯红细胞再生障碍性贫血7例疗效观察

Ｔ细胞功能紊乱介导的造血抑制是纯红细胞再生障碍性贫血 (Ｐｕｒｅｒｅｄｃｅｌｌａｐｌａｓｉａ,ＰＲＣＡ)的主要发病机制之一〔1〕。据此 ,我们采用以Ｔ淋巴细胞为主要作用靶点的免疫抑制剂———环孢素Ａ(ｃｙ ｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡ ,ＣｓＡ)治疗了 7例ＰＲＣＡ患者 ,现报告如下。1 　 资料与方法1 .1 　 一般资料7例ＰＲＣＡ患者均为我科 1 999～ 2 0 0 0年期间住院患者 ,其临床表现、外周血常规、骨髓象特征均符合ＰＲＣＡ的诊断标准〔2〕。临床资料详见表 1。1 .2 　 治疗方法ＣｓＡ为新山地明胶囊 (瑞士Ｓａｎｄｏｚ制药公司 )或…     

姜黄素、红霉素逆转K562/A02细胞多药耐药机制的研究

目的研究姜黄素（curcumin，Cur）及红霉素（erythromycin，EM）对多药耐药（MDR）细胞株K562／A02的影响及作用机制。方法MTF法测定Cur、EM作用后K562／A02细胞对阿霉素（ADM）敏感性的变化。流式细胞仪测定细胞内柔红霉素的平均荧光强度（DNR MFI）。免疫组化法检测细胞膜上P—gP的表达。RT—PCR法检测细胞mdr1 mRNA水平：结果Cur、EM均可减低ADM对K562／A02细胞的IC50值，两药合用时逆转倍数可达11．3倍。K562／A02细胞内DNR MFI明显低于K562细胞（P〈0．01），Cur、EM均可明显增加K562／A02细胞内DNR MFI（P〈0．05），以两药合用时作用最为明显，Cur2．5μg／ml处理组细胞内DNR MFI略高于EM120μg／ml处理组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组化检测结果显示K562／A02细胞P—gP表达明显高于K562细胞（P〈0．01），各组药物分别处理后，K562／A02细胞膜P—gP表达减低（P〈0．01），但仍高于K562细胞（P〈0．01）；各药物组处理5d细胞膜P—gP表达均低于3d组（P〈0．01），Cur与EM合用时细胞膜P—gP表达降低最为明湿，低于其它处理组（P〈0．01）。RT—PCR结果显示K562／A02细胞mdr1 mRNA水平明显高于K562细胞（P〈0．01），各组药物处理后，K562／A02细胞mdr1 mRNA水平均减低（P〈0．01），5d组低于3d组，但仍高于K562细胞（P〈0．01）；Cur与EM合用时K562／A02细胞mdr1 mRNA水平降低最为显著，Cur 2．5μg／ml处理5dK562／A02细胞mdr1 mRNA水平低于EM120μg／ml处理5d组（P〈0．01）。结论Cur、EM均可部分逆转K562／A02细胞的MDR，降低其P—gP的表达和功能，逆转作用有时间依赖性；两药联合应用时逆转作用明湿增强，Cur2．5μg／ml逆转作用略强于EM120μg／ml。     

腺病毒介导血管内皮生长因子基因促进大鼠随意皮瓣的早期断蒂

目的：探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子165基因转染大鼠皮瓣，对皮瓣早期断蒂的影响。 方法：实验于2004-08／2005-09在安徽医科大学第一附属医院外科动物实验中心及中心实验室完成。健康SD雄性大鼠30只，随机分成3组：目的组．绿色荧光蛋白对照组、空白对照组，每组10只。所有实验大鼠背部设计2cm&;#215;6cm随意皮瓣，蒂位于髂脊水平。皮瓣形成后，术时即刻将磷酸盐缓冲液稀释的重组复制缺陷型腺病毒携带血管内皮细胞生长因子165基因溶液（目的组）、磷酸盐缓冲液稀释的重组复制缺陷型腺病毒携带绿色荧光蛋白溶液（荧光蛋白对照组）、磷酸盐缓冲液溶液（空白对照组）1mL注射到大鼠皮瓣内，给药后即刻以3-0丝线原位缝合，继续单笼饲养。所有实验大鼠皮瓣4d后断蒂，断蒂后7d观测皮瓣存活面积，取皮瓣远端存活区组织苏木精一伊红染色，光镜下观察组织学变化，免疫组织化学染色检测血管内皮细胞生长因子165表达情况，用CD34免疫组织化学染色计算血管密度。 结果：①断蒂后7d，所有实验动物全部存活，皮瓣存活区与坏死区已经明确。②皮瓣存活率、皮瓣血管断面密度目的组和对照组之间差异有显著性[皮瓣存活率：目的组为（98.8&;#177;1．5）％，荧光蛋白对照组为（78．3&;#177;2．5）%，空白对照组为（79．2％&;#177;2．4）％；皮瓣血管断面密度：目的组为（49．6&;#177;6．3）个／高倍视野，荧光蛋白对照组为（37．5&;#177;3．0）个／高倍视野，空白对照组为（39．5&;#177;3．0）个／高倍视野，P〈0．05]，对照组之间差异没有显著性（P〉0．05）。③免疫组织化学染色各组均可见棕黄色颗粒沉积，目的组比对照组染色深。④组织学观察，目的组皮瓣真皮、肉芽及肌肉中可见大量毛细血管，而对照组较少。 结论：应用重组复制缺陷型腺病毒携带血管内皮细胞生长因子165基因转染大鼠皮瓣具有促进皮瓣早期断蒂的作用。     

双克隆型急性混合细胞白血病一例

急性混合细胞白血病（acute mixed leukemia）是急性白血病中髓细胞系和淋巴细胞系共同累及的一组疾病，也是一种少见的急性白血病。最近我们发现1例双克隆型，现报告如下。     

CMVpp65基因修饰的树突状细胞刺激自身T细胞活化

巨细胞病毒（CMV）感染易发生于慢性移植物抗宿主病（cGVHD）患者，其特异性免疫依赖于T细胞活性。本研究探讨CMVpp65基因修饰的树突状细胞（DC）对自身T细胞的活化作用。采用具有高效转染非分裂细胞的慢病毒系统将CMV全长pp65基因导入鼠源性DC；采用CpG—DNA诱导DC细胞成熟；采用流式细胞术及免疫荧光方法测定T淋巴细胞抗原及IFNγ表达。结果表明：慢病毒感染DC的感染复数（multiplicity of infection，MOI）为50，最佳感染效率可达30％-40％；表达pp65基因的成熟DC能刺激自身naiveT细胞表达CD69；表达PP65蛋白的成熟DC能够刺激自身CD4^＋或CD8^＋T细胞分泌IFNγ。结论：pp65基因修饰、CpG—DNA诱导成熟的DC能体外激活CMV特异性T淋巴细胞。     

急性巨核细胞白血病9例实验室诊断体会

急性巨核细胞白血病（acute megakaryocytic leukemia AMKL）是一种原发的巨核细胞系统异常增殖、病程经过凶险、迅速致死的疾病，FAB^[1]把这个类型的白血病归类到ANLL-M7，现在一直沿用这一名称。M7诊断难度较大，仅靠细胞形态或细胞化学检查不能做出诊断^[2]。我们运用形态学、细胞化学、     

PAD方案成功治疗难治性套细胞淋巴瘤一例报告

1病例报告患者女,58岁,2009-01无明显诱因出现胸闷,伴有夜间阵发性干咳,无发热、盗汗、体质量减轻等。2009-03,上述症状加重,当地医院B超检查提示脾大;胸片检查提示双侧胸腔积液(中量)。抗感染、抽胸腔积液等对症治疗无效,2009-04-03来我院,住院后检查B超:双侧颈部、腋窝、腹股沟及腹膜后多发     

bcl-2反义寡聚脱氧核苷酸抑制HL-60细胞生长的研究

在体外培养中研究了基因的反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleo-tide,ASON)对HL-60细胞生长增殖的影响。根据bcl-2基因cDNA的序列分析,以bcl-2mRNA翻译起始区域前15个核苷酸为作用靶序列,人工合成了15聚ASON片段,同时合成15聚无关寡聚核苷酸(ODN)片段,以作序列特异性对照。把上述ASON和无关ODN片段与HL-60细胞共培养,同时设置空白对照组,作用一定时间后分别测定细胞动力学和~3H-TdR掺入率。实验发现:从3.5—30.0μmol/L的ASON对细胞生长有不同程度抑制作用,低于10μmol/L时抑制作用小,大于10.0μmol/L时抑制作用显著,浓度愈大,抑制程度愈大,而无关ODN作用组的细胞生长状态与空白对照组无显著差别,作用48小时后浓度3.5μmol/L抑制率为6％,而20.0μmol/L时上升为40％;作用96小时后3.5μmol/L的ASON抑制率是5.1％,30μmol/L的抑制率高达67％。相同浓度的ASON作用不同时间后,细胞生长率各不相同,当浓度达到14.0μmol/L时,48小时的细胞生长抑制率达22％,72和96小时的抑制率分别为25％和29.3％。HL-60细胞被ASON处理后,培养体系中死细胞数随时间延长而增加,浓度在10—30μmol/L范围内,死细胞率由2％增到50％,但在无关ODN及空白对照组中未观察到这种现象。同时发现由于bcl-2的ASON作用使HL-60细胞的     

腺病毒介导血管内皮生长因子基因促进大鼠随意皮瓣的早期断蒂

目的:探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子165基因转染大鼠皮瓣,对皮瓣早期断蒂的影响。方法:实验于2004-08/2005-09在安徽医科大学第一附属医院外科动物实验中心及中心实验室完成。健康SD雄性大鼠30只,随机分成3组:目的组、绿色荧光蛋白对照组、空白对照组,每组10只。所有实验大鼠背部设计2cm×6cm随意皮瓣,蒂位于髂脊水平。皮瓣形成后,术时即刻将磷酸盐缓冲液稀释的重组复制缺陷型腺病毒携带血管内皮细胞生长因子165基因溶液(目的组)、磷酸盐缓冲液稀释的重组复制缺陷型腺病毒携带绿色荧光蛋白溶液(荧光蛋白对照组)、磷酸盐缓冲液溶液(空白对照组)1mL注射到大鼠皮瓣内,给药后即刻以3-0丝线原位缝合,继续单笼饲养。所有实验大鼠皮瓣4d后断蒂,断蒂后7d观测皮瓣存活面积,取皮瓣远端存活区组织苏木精-伊红染色,光镜下观察组织学变化,免疫组织化学染色检测血管内皮细胞生长因子165表达情况,用CD34免疫组织化学染色计算血管密度。结果:①断蒂后7d,所有实验动物全部存活,皮瓣存活区与坏死区已经明确。②皮瓣存活率、皮瓣血管断面密度目的组和对照组之间差异有显著性犤皮瓣存活率:目的组为(98.8±1.5)%,荧光蛋白对照组为(78.3±2.5)%,空白对照组为(79.2%±2.4)%;皮瓣血管断面密度:目的组为(49.6±6.3)个/高倍视野,荧光蛋白对照组为(37.5±3.0)个/高倍视野,空白对照组为(39.5±3.0)个/高倍视野,P<0.05犦,对照组之间差异没有显著性(P>0.05)。③免疫组织化学染色各组均可见棕黄色颗粒沉积,目的组比对照组染色深。④组织学观察,目的组皮瓣真皮、肉芽及肌肉中可见大量毛细血管,而对照组较少。结论:应用重组复制缺陷型腺病毒携带血管内皮细胞生长因子165基因转染大鼠皮瓣具有促进皮瓣早期断蒂的作用。