肿瘤微环境对树突细胞功能状态的影响

目的：探讨肿瘤细胞分泌的可溶性细胞因子营造的微环境对树突细胞(DCs，dendritic cells)的分化发育的影响，以进一步揭示肿瘤的免疫逃逸机制。方法：用免疫磁珠从人外周血分离CD14^ 单核细胞，加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和人白血病细胞Jurkat培养上清液体外培养DCs，以正常培养诱导的DCs作为对照，采用傅立叶变换红外光谱(FTIR)技术分析人白血病细胞培养上清液对DCs分化发育的影响。结果：正常培养DCs与肿瘤上清液培养的DCs相比，在细胞内蛋白质和核酸的相对含量和细胞内消耗葡萄糖重新合成磷脂的量方面差异无显著性，但是，在细胞的转录状态方面差异有显著性。结论：肿瘤细胞上清液培养液所营造的微环境细胞转录水平上对DCs的功能状态有明显的抑制作用。     

类风湿性关节炎的发生发展与树突状细胞的关系研究进展

类风湿性关节炎主要表现为进行性关节破坏和滑膜组织异常增生［1］,其发病机制主要是细胞免疫反应,随着研究的深入,人们逐渐发现了树实状细胞（DC ）与类风湿性关节炎的发生发展的关系。R 。 Thomas等［2］首先在发现类风湿性关节炎滑液和滑膜组织中含有丰富的DC ,与正常外周血DC相比,滑液DC特异性刺激自身外周血T 细胞的能力增强, DC的存在部位与类风湿性关节炎炎症病变部位非常一致,在类风湿性关节炎炎症病变较重的部位,DC的数量也较多,从形态学方面证实了DC与类风湿性关节炎的炎症活动情况有关;进一步的研究发现,DC是目前发现的功能最强大的抗原递呈细胞,也是唯一能够激活初始T细胞的专职抗原递呈细胞,因此DC的性质和功能状态直接影响 T 细胞的活化和分化方向,它的活性状态、数量可影响到免疫应答过程,故参与类风湿性关节炎的发生及发展。     

抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

目的 制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法 利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs, Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性。结果 获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1～5。通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a*κ型、4个为IgG1*κ型,其效价均达到2×104以上。Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合。结论通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础。     

ω-3多不饱和脂肪酸对树突状细胞生物物理学特性及迁移能力的影响

目的 从生物物理学与免疫学交叉角度,分析二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid, EPA）、二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid, DHA）对鼠源树突状细胞（dendritic cells, DCs）生物物理学特性、细胞骨架及迁移能力的影响,探讨ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 polyunsaturated fatty acids, ω-3 PUFAs）对DCs免疫功能的影响及其潜在作用机制。方法 分离C57BL/6J小鼠骨髓来源单核细胞,经20 ng/mL重组鼠集落刺激因子（recombinant mouse granulocyte macrophage colony stimulating factor, rmGM-CSF）和10 ng/mL重组鼠白介素-4（recombinant mouse interleukin-4, rmIL-4）诱导分化为未成熟树突状细胞（immature dendritic cells, imDCs）,第6天加入100 ng/mL脂多糖诱导为成熟树突状细胞（mature dendritic cells, mDCs）,进一步对imDCs及mDCs进行形态学观察及CD11c阳性率分析;通过细胞增殖检测试剂盒（cell counting kit-8, CCK-8）及流式细胞仪检测不同浓度EPA和DHA（浓度均为0~60 μmol/L）作用下DCs细胞活力及凋亡情况;在确定最佳作用浓度后分别通过荧光偏振法、细胞电泳法及浓度梯度法检测分析DCs的膜流动性、电泳迁移率（electrophoretic mobility, EPM）及渗透脆性变化,并用免疫荧光法检测其细胞骨架纤维状肌动蛋白（filamentous actin, F-actin）表达,最后利用Transwell系统检测DCs迁移能力。结果 imDCs及mDCs的CD11c阳性率均在80%左右;不同浓度EPA和DHA均呈剂量依赖性降低DCs细胞活力,但并没有诱导其凋亡。在50 μmol/LEPA和DHA作用下,DCs生物物理学特性均发生改变,其中渗透脆性和EPM明显下降,膜流动性明显增大。DCs细胞骨架F-actin含量表达均明显上升,迁移率显著下降。结论 ω-3 PUFAs可能会通过改变DCs细胞骨架结构及生物物理学特性,抑制细胞迁移能力,进而影响其免疫功能。     

文献阅读研讨课在医学生物物理教学中的应用

文献阅读研讨课是一种以学生为主、教师引导的课堂讨论教学模式,注重学生的学习过程和科研能力培养。在此主要介绍该教学模式的特点及其在医学生物物理学教学过程中的应用,并探索其教学效果的评价方法。     

生长发育过程中血细胞流变学特性的研究进展(综述)

血液中红细胞、白细胞和血小板等在体内行使其生理功能的过程中经历了各自的分化发育过程，这些过程伴随有细胞流变学特性的变化。在此主要综述近年来国内外关于血液细胞在分化发育中的流变学研究，拓展了生物流变学和生物物理学的研究领域。     

肝癌细胞对成熟树突状细胞生物物理学特性的影响

目的:研究肝癌细胞微环境成熟树突状细胞(Mature dendritic cells,mDCs)的生物物理学特性的影响,从交叉学科的角度来探索肿瘤细胞的免疫逃逸机制.方法:用免疫磁珠从人外周血分离CDl4+单核细胞,加人rhGM-CSF和rhIL-4将单核细胞诱导分化为imDCs,利用TNF-α将未成熟树突状细胞(Immature dendritic cells,imDCs)诱导为mDCs,mDCs与HCCs在Transwell 中共培养48 h,分别利用微吸管法、荧光偏振法和Transwell法研究细胞粘弹性、膜流动性和迁移能力.结果:与肝癌细胞(Hepa tocellular carcinoma cells,HCCs) 共培养后,mDCs的粘弹性和膜流动性显著下降,细胞的迁移能力受到显著的损伤.结论:HCCs可能能够损伤mDCs的生物物理学特性来影响其迁移能力,这可能是肿瘤逃脱机体免疫监视的方式之一,这对进一步深入理解肿瘤的免疫逃逸机制具有重要意义.     

肿瘤细胞对不同分化阶段树突状细胞脂含量和蛋白质二级结构的影响

目的:利用傅里叶变换红外光谱(Fourier transformed infrared spectrum,FT-IR)技术探讨肿瘤细胞共培养对不同分化阶段树突状细胞(dendritic cells,DCs)的脂含量和蛋白质二级结构的影响,为深入理解肿瘤的免疫逃逸机制寻找线索。方法:免疫磁珠法分离人CD14+单核细胞,以经典方法将其诱导为未成熟DCs(immature DCs,imDCs)和成熟DCs(mature DCs,mDCs),分别将imDCs和mDCs与肝癌细胞株BEL7402、红白血病细胞株K562以及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelialcells,HUVECs)共培养48 h,正常培养的DCs作为对照。采用FT-IR技术研究不同肿瘤细胞对不同分化阶段DCs的脂含量和蛋白质二级结构的影响。结果:与正常培养的DCs相比,与肿瘤细胞BEL7402和K562共培养后imDCs和mDCs的膜磷脂成分减少(2.718±0.296,3.124±0.361vs4.855±0.324,P<0.05;2.964±0.136,3.522±0.173vs4.217±0.206,P<0.05),而总的脂含量增加(3.768±0.185,3.591±0.197vs2.487±0.212,P<0.05;4.288±0.156,4.155±0.167vs3.233±0.206,P<0.05);蛋白质α-螺旋含量减少(1.863±0.192,1.754±0.169vs2.364±0.188,P<0.05;1.124±0.133,1.016±0.107vs1.392±0.113,P<0.05),β-折叠(3.397±0.225,3.433±0.236vs2.486±0.198,P<0.05;2.646±0.209,2.591±0.216vs1.558±0.159,P<0.05)和转角含量(4.366±0.284,4.322±0.266vs3.127±0.272,P<0.05;2.675±0.221,2.627±0.235vs1.773±0.181,P<0.05)增加;并且mDCs比imDCs更容易受到肿瘤来源因素的影响。结论:与肿瘤细胞共培养能够导致mDCs和imDCs的脂含量和蛋白质二级结构发生改变,可能是肿瘤导致DCs功能损伤的结构基础。     

癌相关成纤维细胞与M2型巨噬细胞相互作用促进肿瘤发生发展的研究进展

癌相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境(TME)中主要成分之一。在TME中,肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间或非肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间的相互作用能促进肿瘤发生发展。CAF可与多种免疫细胞之间产生相互作用,通过抑制适应性免疫细胞功能,重塑TME中免疫微环境促进肿瘤的发生发展。其中CAF与巨噬细胞相互作用,并诱导巨噬细胞向M2型极化在促进肿瘤发生发展中起到重要作用。