体外培育牛黄镇痛作用的电生理机制

目的探讨体外培育牛黄(calculus bovis sativus,CBS)镇痛作用的电生理机制。方法在蟾蜍坐骨神经干和培养大鼠三叉神经节(TRG)细胞上,分别记录复合动作电位和电压依赖性钠通道电流。结果CBS(>0.4g.L-1)可以抑制复合神经动作电位,4g.L-1CBS对其抑制率为(42.5±17.6)%。CBS(0.2~20mg.L-1)可以剂量依赖性的抑制大鼠TRG细胞电压依赖性总钠通道电流(INa-T)和TTX不敏感型钠通道电流(INa-TTX-r),20mg.L-1CBS对INa-T和INa-TTX-r的抑制率分别为(55.8±7.8)%和(39.3±5.7)%。结论CBS对钠电流的阻滞作用可能是其镇痛作用机制之一。     

Effect of Interleukin-1β on IA and IK Currents in Cultured Murine Trigeminal Ganglion Neurons

To investigate the effect of interleukin-1β (IL-1β) on IA and IK currents in cultured murine trigeminal ganglion (TG) neurons, whole-cell patch clamp technique was used to record the IA and IK currents before and after 20 ng/mL IL-1β perfusion. Our results showed that 20 ng/mL IL-1β inhibited IA currents (18.3±10.7)% (n=6, P<0.05). IL-1β at 20 ng/mL had no effect on G-V curve of IA but moved the H-infinity curve V0.5 from -36.6±6.1 mV to -42.4±5.2 mV (n=5, P<0.01). However, 20 ng/mL IL-1β had effect on neither the amplitude nor the G-V curve of IK. IL-1β was found to selec- tively inhibit IA current in TG neurons and the effect may contribute to hyperalgesia under various in- flammatory conditions.     

WIN 55,212-2对培养的大鼠三叉神经节神经元胞内游离钙离子浓度的影响

目的检测WIN55，212—2对培养的大鼠三叉神经节神经元细胞内钙离子浓度（[Ca^2＋]i）的影响并探讨其机制。方法以Fura一2／AM为钙探针，用细胞内双波长钙荧光系统检测细胞[Ca^2＋]i的变化。结果WIN55，2122（0．01～10μmol／L）可浓度依赖性地升高三叉神经节神经元细胞内[Ca^2＋]i，EC50为0．47μmol／L；用大麻素Ⅰ型受体（CBI受体）阻断剂AM251孵育后，发现10μmol／L的AM251可明显抑制10μmol／L WIN55。212—2对三叉神经节神经元细胞内[Ca^2＋]i的作用（P〈0．01）。结论WIN55，212—2可浓度依赖性地升高三叉神经节神经元细胞内[Ca^2＋]i，该作用可能是由CBI受体所介导。     

蛋白丝/苏氨酸磷酸酶1和2A抑制药对大鼠三叉神经元电压依赖性钠通道的影响(英文)

目的通过研究蛋白丝/苏氨酸磷酸酶1和2A特异性抑制药冈田酸对大鼠三叉神经元电压依赖性钠电流的影响,探讨磷酸酶在细胞信号转导中的作用。方法在成年大鼠三叉神经元上进行全细胞膜片钳记录。结果1μmol·L-1冈田酸显著抑制总钠电流(INa-T) ,仅轻微抑制毒素不敏感型钠电流(INa-TTX-R) ,其抑制率分别为(20±13) %(n=9,P<0 .05)和(4±3) %(n=6, P<0 .05)。冈田酸对INa-T的激活曲线产生明显的超极化位移,半激活电压从给药前的-(13±8)mV升至给药后的-(16±7)mV(P<0 .05) ,但是对INa-TTX-R的激活曲线没有影响。结论①蛋白丝/苏氨酸磷酸酶参与了大鼠三叉神经元电压依赖性钠通道的调节。②大鼠三叉神经元存在多种电压依赖性钠通道,它们对冈田酸具有不同的敏感性。     

冈田酸对培养的大鼠三叉神经元电压门控性钾和钙通道的调节(英文)

目的通过研究冈田酸对大鼠三叉神经元电压门控性钾、钙电流的影响,探讨磷酸酯酶在细胞信号转导中的调节作用。方法采用全细胞膜片钳方法。结果冈田酸1μmol.L-1对瞬时外向钾电流(IA)的抑制率为28.6%,对延迟整流钾电流(IK)和钙电流(ICa)的增加率分别为22.7%和20.0%。冈田酸1μmol.L-1使IA和IK的激活曲线以及IA的失活曲线发生超级化位移,对ICa激活和失活曲线的影响没有统计学意义。结论①蛋白丝/苏氨酸磷酸酯酶1和2A可能参与了大鼠三叉神经节神经元电压门控性钾和钙通道的调节。②电压门控性钾和钙通道对蛋白丝/苏氨酸磷酸酯酶1和2A的去磷酸化反应表现出不同的依赖性。     

缺氧对小鼠背根神经节细胞ⅠK电流的影响

目的：探讨氧感受过程参与对钾通道调制的假设。方法：应用新鲜分离的小鼠背根神经节小细胞,采用全细胞膜片钳记录ⅠK电流。结果：当小细胞缺氧时,钾通道在3min之内即可发生变化,表现为绝大多数（86％,6／7）细胞的ⅠK减弱,1个细胞（14％,1／7）的ⅠK电流增强;缺氧1min时以减弱,3min时产生最大抑制。当测试电位从＋10mV至＋70mV时,急性缺氧显著性降低ⅠK,ⅠK电流密度降低最大幅度从（304．4&#177;122．9）降为（253．9&#177;106．4）pA&#183;pF^-1,但ⅠK稳态激活曲线无明显变化。结论：急性缺氧抑制小鼠背根神经节小细胞ⅠK电流,而ⅠK电流的抑制作用可能是外周神经细胞对缺氧的一种适应和保护机制。     

石英对大鼠背根神经元高电压激活钙电流影响的探讨

[目的]通过分析石英作用后大鼠背根神经元(DRG)高电压激活(HVA)钙电流的变化,探讨石英对钙离子通道结构和功能的影响.[方法]原代培养DRG,分0、5、15、45、135μg/mL5个石英浓度组进行体外染尘,运用全细胞膜片钳记录技术记录不同染尘时间DRG HVA钙电流,每组记录约6个DRG.[结果]135μg/mL剂量组石英作用于DRG后HVA钙电流密度峰值为(-95.9±38.8)pA/pF,大干对照组和低剂量组,差异有统计学意义(P ＜0.05).HVA钙电流从30%升至70%的速率明显快于对照组和其他染尘组,差异有统计学意义(P＜0.01),但达峰时间差异无统计学意义(P＞0.05);135 μg/mL剂量组钙电流平均失活速率明显快于对照组和其他染尘组,差异有统计学意义(P=0.000),电流从峰值到记录结束时的下降率高于对照组和其他染尘组,差异有统计学意义(P＜0.05).45、135 μg/mL组的DRG膜电导值分别为(1 420.0±655.6)pS/μm2和(2257.4±454.2)pS/μm2,均高于对照组和低剂量染尘组,差异有统计学意义(P＜0.05).石英可使DRGHVA钙电流稳态激活曲线V1/2向正值方向移动约6.0～6.5mV,大于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),移动的幅度与染尘浓度关系不明显(P＞0.05);斜率k变化不明显(P＞0.05).石英作用后DRG HVA电流-电压(I-V)曲线形状改变不明显,对DRG HVA钙电流时间依赖性也没有明显影响.[结论]石英作用后DRG HVA钙通道结构和功能发生变化,使钙电流显著增大,呈激活快、失活也快的特征;另外,石英可使HVA钙通道在高刺激电压状况下(-10mV左右)更容易被激活.     

中西医结合护理对系统性红斑狼疮患者皮肤损害的应用研究

目的:探讨中西医结合护理在系统性红斑狼疮患者皮肤损害的应用效果。方法:对我院2011年1月~2013年12月收治的103例系统性红斑狼疮患者皮肤进行中西医结合的治疗和护理。结果:本组103例系统性红斑狼疮患者的皮肤损害症状明显减轻。结论:细心的临床观察、正确的护理方法及有效的心理教育,使系统性红斑狼疮的皮肤护理获得满意的效果。     

辣椒素对培养的大鼠三叉神经节神经元瞬时外向钾电流和延迟整流钾电流的影响

目的探讨辣椒素(capsaicin)对大鼠三叉神经节神经元瞬时外向钾电流(I_A)和延迟整流钾电流(I_K)的不同影响。方法采用全细胞膜片钳方法。结果对于辣椒素敏感神经元，辣椒素可选择性、剂量依赖性地抑制其I_A电流，但辣椒素对I_K无明显选择性作用；对于辣椒素不敏感神经元，辣椒素对I_A和I_K均无作用，且对I_A和_IK激活动力学亦无影响。结论辣椒素可选择性抑制对其敏感的三叉神经节神经元I_A，这可能是初次应用辣椒素时其致痛作用的原因之一。     

甲基汞诱导海马神经细胞凋亡及其机制研究

目的 研究甲基汞对海马神经元的损伤及致凋亡作用,并初步探讨甲基汞神经毒性的机制.方法 以5 d内新生SD大鼠海马神经元为实验对象,用四甲基偶氮唑盐(MMT)法检测甲基汞对培养的海马神经细胞活性的影响,原位末端标记(TUNEL)法和流式Annexin V-FITC-PI法检测甲基汞诱导海马细胞凋亡细胞数和凋亡百分率,并用激光共聚焦技术,从单个细胞水平检测甲基汞对胞内游离Ca2 瞬间动态变化的影响.结果 MMT法显示,0.1 μmol/L甲基汞作用24 h对培养的海马神经细胞杀伤率为(22.90±2.77)%(n=7).TUNEL法显示,0.1 μmol/L甲基汞作用24 h组海马神经元凋亡指数[(34.45±1.30)%,n=10]高于溶剂对照组[(6.01±0.64)%,n=10],差异有统计学意义(P＜0.01).流式Annexin V-FITC-PI法显示,0.1 μmol/L甲基汞作用24 h诱导海马神经细胞凋亡率为(51.20±4.98)%(n=5).即时染毒0.01、0.1、1 μmol/L甲基汞,使海马神经元细胞内游离钙离子浓度分别增加(5.58±2.37)%(n=5),(82.71±20.42)%(n=4)和(246.38±64.77)%(n=4).预孵育硝苯的平可延缓甲基汞升钙作用的起效时间并降低胞内钙离子浓度增加的幅值.结论 甲基汞对培养的海马神经细胞的急剧升钙作用可能参与了甲基汞的致细胞损伤和诱导凋亡作用,并且可能与细胞膜上的电压门控钙通道有关.