内蒙古地区蒙古族人HLA—DQA1基因多态性研究

目的：了解内蒙古地区蒙古族HLA-DQA1基因多态性。方法：采用PCR-SSP技术对内蒙古地区97例内蒙古族人群进行HLA-DQA1等位基因型别分析。结果：蒙古族中高频率的HLA-DQA1等位基因为*0301、*0501、*0102,最少见的为*0601。结论：蒙古族人群HLA-DQA1基因分布,既有汉族人的特点,又有其独特性。     

内蒙古地区蒙、汉族人HLA-DRB1基因多态性研究

目的 :了解内蒙古地区蒙、汉族人 HLA-DRB1的基因多态性。方法 :采用聚合酶链反应 -序列特异性引物 (PCR-SSP)技术对内蒙古地区 1 0 2例健康蒙古族标本和 1 0 8例健康汉族标本进行 HLA-DRB1等位基因型别分析。结果 :蒙古族中等位基因频率较高的分别是 :DRB1 * 1 2 0 x(genefrequency,GF=1 8.3 5 % ) ,* 0 40 x(GF=1 4.82 % ) ,* 1 5 0 x(GF=1 0 .84% )。汉族中 HLA-DRB1等位基因频率较高的分别是 :DRB1 * 0 90 1 (GF=1 6.67% ) ,* 1 5 0 x (GF=1 5 .0 3 % ) ,* 0 40 x (GF=1 1 .81 % )。其中 :DRB1 * 0 90 1、* 1 2 0 x位点的基因频率差异有显著性意义。结论 :内蒙古地区蒙古族和汉族具有不同的 HLA-DRB1等位基因分布频率。     

Survivin反义核酸增强PANC-1细胞对阿霉素的敏感性

目的:探讨surv iv in反义核酸对阿霉素诱导胰腺癌细胞系PANC-1细胞凋亡的影响。方法:将已构建成功的surv iv in反义核酸真核表达载体pcDNA 3-SVV as电转染胰腺癌细胞系PANC-1,并筛选转染成功的阳性克隆;台盼蓝拒染法观察surv iv in反义核酸与阿霉素联合应用对PANC-1细胞生存的影响;细胞计数和M TT试验测定转染细胞对阿霉素敏感性;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA断裂情况。结果:转染surv iv in反义核酸的PANC-1/SVV as细胞增殖明显受抑,与PANC-1/neo细胞、PANC-1细胞进行比较,具有显著性差异(P<0.05);M TT实验显示,阿霉素对PANC-1/SVV as、PANC-1/neo、PANC-1细胞的IC50值分别为0.285±0.012μm o l/L、1.528±0.317μm o l/L和1.540±0.253μm o l/L。统计分析证明差异具有显著性(P<0.01);经琼脂糖凝胶电泳,PANC-1/SVV as细胞可见到DNA梯形条带,而PANC-1/neo、PANC-1细胞未见到。结论:surv iv in反义核酸可促进阿霉素诱导PANC-1细胞凋亡,为胰腺癌的基因治疗研究提供了实验依据。     

Survivin反义核酸促进紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡

目的　探讨Survivin反义核酸对紫杉醇诱导白血病细胞系HL 6 0细胞凋亡的影响。方法　将已构建成功的Survivin反义核酸真核表达载体pcDNA3 SVVas电转染HL 6 0细胞 ,并筛选转染成功的阳性克隆 ;锥虫蓝拒染法观察Survivin反义核酸与紫杉醇联合应用对HL 6 0细胞增殖的影响 ;细胞计数和MTT实验测定转染细胞对紫杉醇敏感性 ;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA断裂情况 ;核染色检测凋亡细胞的细胞核变化。结果　转染Survivin反义核酸的HL 6 0SVVas细胞增殖明显受抑 ,与HL 6 0neo细胞、HL 6 0细胞进行比较 ,差异具有显著性 (P <0 .0 5 ) ;MTT实验显示 ,紫杉醇对HL 6 0SVVas、HL 6 0neo、HL 6 0细胞的IC50 值分别为 (14 .4± 1.87)ng ml,(31.9± 6 .38)ng ml和 (32 .0± 6 5 2 )ng ml。统计学分析证明差异具有显著性 (P <0 .0 1) ;经琼脂糖凝胶电泳 ,HL 6 0SVVas细胞可见到DNA梯形条带 ,而HL 6 0neo、HL 6 0细胞未见到 ;与HL 6 0neo、HL 6 0细胞相比 ,HL 6 0SVVas的细胞核呈致密浓染。结论　Survivin反义核酸可促进紫杉醇诱导HL 6 0细胞凋亡。     

Survivin反义RNA真核表达载体的构建及鉴定

恶性肿瘤无限增殖的主要原因是细胞凋亡调控障碍.Survivin是新近发现的凋亡抑制蛋白家族(inhibitor of apoptosis protein,IAP)成员[1],特异性表达人类多种常见肿瘤中,而不存在于正常成人组织,能抑制caspase活性而发挥抗凋亡作用[2].有研究表明[3-4],应用反义策略阻断survivin表达可提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,诱导凋亡的发生,已成为肿瘤治疗的新亮点.