重组胰高血糖素样肽-1载体的构建及其在枯草芽孢杆菌中的表达

目的: 构建及鉴定携带His标签的重组胰高血糖素样肽-1（modified glucagon-like peptide-1,mGLP-1）表达载体,实现其在枯草芽孢杆菌WB800N中的分泌表达。方法: 经化学合成得到含有His标签及BamHⅠ/XbaⅠ酶切位点的mGLP-1基因片段,将其酶切后插入含信号肽amyQ序列的大肠埃希菌枯草芽孢杆菌双穿梭载体pHT43中,得到重组载体pHT43-mGLP-1;通过电转化方法将质粒pHT43-mGLP-1转化到枯草芽孢杆菌 WB800N中,构建含有目的基因的重组菌株WB800N/pHT43-mGLP-1,利用聚合酶链式反应（PCR）、碱基测序、甘氨酸聚丙烯酰胺凝胶电泳（Tricine-SDS-PAGE）及蛋白质印迹法鉴定重组的枯草芽孢杆菌。结果： 菌落PCR和测序结果表明,阳性克隆质粒pHT43-mGLP-1成功转化进枯草芽孢杆菌WB800N;Tricine-SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测表明,重组菌株WB800N/mGLP-1培养上清液中有mGLP-1蛋白表达,且1 mmol/L IPTG诱导下蛋白表达量明显增加。结论： 成功构建了携带mGLP-1基因的表达载体并实现了其蛋白在枯草芽孢杆菌中的分泌表达, 为后续动物实验和制备微生态活菌制剂奠定了基础。     

2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者血清白脂素浓度变化及其影响因素

目的: 研究2型糖尿病（T2DM）合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清白脂素浓度变化及其影响因素。方法: 选取单纯T2DM患者50例,T2DM合并NAFLD者46例,用ELISA法检测两组血清白脂素浓度,并计算体重指数（BMI）、腰臀比、致动脉粥样硬化指数（AIP）和胰岛素抵抗指数(HOMA IR)。 结果： T2DM合并NAFLD组血清白脂素浓度［(1.85±0.79)mg/mL］明显高于单纯T2DM组［(1.39±0.56) ng/mL, t=3.305, P<0.01］。相关分析显示,血清白脂素浓度与T2DM病程、BMI、三酰甘油、AIP呈正相关。T2DM病程为血清白脂素浓度的独立相关因素。根据白脂素浓度将研究对象按三分位法分为Q1、Q2、Q3组,随着血清白脂素浓度增高,NAFLD在Q1、Q2、Q3组的患病率逐渐升高（37.50％、43.75％和62.50％,P<0.05）, T2DM病程、三酰甘油、AIP逐渐升高（P<0.05或P<0.01）。 结论： T2DM合并NAFLD患者血清白脂素浓度增高,提示白脂素可能在T2DM合并NAFLD的发生、发展中起一定的作用。     

浅议肺饮病之论治

肺饮病病位在肺,涉及脾、肾、心等脏,病性为本虚标实之证,病机以肺阳亏虚为本,气、血、水紊乱为标,西医中的肺水肿即属于肺饮病范畴。肺水肿是指肺内组织液的生成和回流平衡失调,大量肺毛细血管内的组织液经过外渗,积聚在肺泡、肺间质和细支气管内,使肺血管外液量增多,从而造成肺的通气与换气功能严重障碍的病理状态。中医在治疗上需要分清标本虚实,注重肺与其他脏腑联系,急性期以温阳利水、化痰理气为主,缓解期以温肺助阳、健脾益肾为主,突出“以温药和之”的治疗原则,用药应标本兼顾、补虚泄实,使得复杂病症得以合理有效的治疗。     

理肺健脾、化痰祛瘀法治疗弥漫性泛细支气管炎1例

弥漫性泛细支气管炎(diffuse panbronchiolitis,DPB)是一种病因未明的、以双肺呼吸性细支气管受累为主的慢性气道炎症性疾病,东亚国家多发,且多见于非吸烟者[1].临床表现为持续性咳嗽、咳痰、活动后喘息,容易反复感染,随着病情加重可出现呼吸衰竭而危及生命[2].《素问?痹论篇》曰:"肺痹者,烦满喘而呕."故现代医家多认为本病当属"肺痹"范畴.兹报道临床运用理肺健脾、化痰祛瘀法治疗弥漫性泛细支气管炎验案1则.     

2型糖尿病患者血清Betatrophin水平与骨密度的相关性研究

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清Betatrophin水平与骨密度(bone mineral density,BMD)的相关性。方法选择95例T2DM患者,采用双能X线骨密度仪检测所有患者腰椎1～4(L1-L4)、股骨颈(femoral neck,FN)及全髋(total hip,TH)部位BMD,按BMD将患者分为骨量正常组(n=46)及骨量异常组(包括骨量减少及骨质疏松,n=49)。所有患者均行口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)及胰岛素释放试验。血清Betatrophin水平用酶联免疫吸附法进行检测。结果与BMD正常组相比,BMD异常组血清Betatrophin水平显著增高(P0.05)。相关分析显示,Betatrophin与FN、TH两个部位骨密度呈负相关(r=-0.238、-0.208,P均0.05)。根据血清Betatrophin水平由低到高分为3组,BMD异常在3组中的发生率逐渐升高(38.7%、53.1%及62.5%)。结论 T2DM骨密度异常患者血清Betatrophin水平显著升高,提示Betatrophin可能在糖尿病骨质疏松症的发生发展中发挥作用,对该指标进行检测可为糖尿病骨质疏松症的预防和治疗提供新的临床依据。     

不同浓度氟化钠抗凝血对POCT血糖仪校准结果干扰影响的研究

目的研究不同浓度氟化钠抗凝血对POCT血糖仪结果干扰情 况。方法20例研究对象每人采集1支EDTA-K2样本管和6支含不同 浓度氟化钠的(NaF)EDTA-K2样本管静脉血,每管2 ml,POCT血糖仪与生化仪检测每管血 糖水平,比较不同浓度氟化钠组间样本管血糖水平差异及相同氟化钠浓度样本管POCT血糖仪 与生化仪检测血糖水平差异。结果POCT血糖仪检测不同浓度氟化钠 样本管血糖水平组间比较,其差异有统计学意义( F=12.192,P <0.001);采用LSD法进 行多重比较,不含NaF组血糖水平与其它含NaF组血糖水平比较,不含NaF组血糖水平明显高 于其它含NaF组血糖水平( t=13.556,14.223,13.512,14.012,13.876,13.864, 均P <0.001),含NaF不同组间血糖水平比较,差异无统计学意义( t=0.352,0.412,0 .386,0.411,0.395,0.414,均P >0.05);生化仪检测不同浓度氟化钠组间血糖水 平比较,其差异无统计学意义( F=0.428,P =0.829)。不含氟化钠样本管两仪器检测血 糖水平比较,差异无统计学意义( t=0.457,P =0.358);含相同浓度氟化钠样本管两仪 器检测血糖水平比较,生化仪检测血糖水平明显高于POCT血糖仪水平( t=-14.415,-14. 746,-13.613,-14.108,-15.253,-14.069,均P <0.01)。结论 氟化钠对采用葡萄糖脱氢酶法POCT血糖仪结果有明显抑制作用,抑制程度与氟化钠浓 度无明显相关,氟化钠不宜作为葡萄糖脱氢酶法POCT血糖仪比对标本的糖酵解抑制剂。     

Betatrophin基因多态性与2型糖尿病的相关性

目的: 探讨Betatrophin基因rs2278426多态性与2型糖尿病（T2DM）的相关性。方法: 分别选取T2DM患者(T2DM组)和健康者(对照组)各200例,采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR RFLP)技术,对Betatrophin基因rs2278426多态性进行检测。结果： T2DM组Betatrophin基因rs2278426位点C/T+T/T基因型及T等位基因的频率明显高于对照组（P<0.05）。C/T+T/T基因型携带者空腹血糖及120 min OGTT血糖(2hPG)明显高于C/C基因型携带者（P<0.05）。Logistic回归分析显示,Betatrophin基因rs2278426 T等位基因相对于C等位基因,增加T2DM的发病风险。 结论： Betatrophin基因rs2278426多态性可能与T2DM的发生有关,T等位基因可能增加T2DM的发病风险。