新型Th9细胞及其与包虫病关系的研究进展

CD4+T细胞亚群中最早被发现且研究的是Th1和Th2细胞,近年来不仅对调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞亚群17(Th17)的研究显著增加,还报道了一种新型Th细胞亚群,即辅助性T细胞亚群9(Th9).新近研究表明,在某些特定条件下,存在着不同于Th1、Th2和Th17的CD4+Th细胞亚群,即Th9.它有着独特的分化机制和免疫应答机制,可以产生大量的IL-9.Th9细胞已被证明其不仅参与了各种自身免疫性疾病,还参与了包虫病感染后的免疫应答过程,并且有利于棘球蚴继续寄生在宿主体内.包虫病的"免疫逃避"机制与辅助性T细胞的免疫应答有密切的关系.     

应用平皿法测定冷冻饮品中的大肠菌群

冷冻饮品的大肠菌群检验具有非常重要的卫生学意义.我们应用平皿法[1]和发酵法[2]对36份冷冻饮品进行了大肠菌群的检测比较,现将结果报告如下.     

血脂水平与华支睾吸虫致病性的初步研究

目的比较高血脂小鼠和正常血脂小鼠感染华支睾吸虫后的肝脏病理变化及炎症因子水平,以研究血脂水平对华支睾吸虫致病性的影响。方法通过向BALB/c小鼠投食高脂饲料建立高血脂小鼠模型,用相同囊蚴数感染高血脂小鼠和正常血脂小鼠,比较感染1个月后小鼠相关病理指标。通过Masson染色(Masson′s trichrome staining)判断肝胆纤维化程度,使用免疫组化和实时荧光定量PCR(qPCR)检测肝脏α-平滑肌蛋白(α-SMA)定位情况和转录水平,用流式细胞术检测小鼠脾细胞在刀豆素(ConA)刺激48 h培养上清中细胞因子表达水平。结果与正常血脂感染组小鼠相比,高血脂感染组小鼠出现较显著的肝胆管扩张、肝实质及汇管区出现大量的胶原纤维增生、小胆管增生等病变。高血脂感染组α-SMA转录水平升高,并在肝脏组织汇管区及增生的纤维间隔内表达。高脂感染组脾细胞培养上清中白介素6(IL-6)和IL-10表达水平比正常血脂小鼠高(P0.05),高脂感染组IFN-γ水平比高脂未感染组低(P0.05)。结论高血脂可能使华支睾吸虫感染所致的肝脏胶原纤维增生、胆管扩张更明显,血脂水平高低还可影响华支睾吸虫感染后宿主的免疫应答。     

泡型肝包虫患者外周血树突状细胞成熟度

目的 通过研究泡型肝包虫病(alveolar echinococcosis, AE)患者外周血中树突状细胞(dendritic cells, DC)的成熟度,探究DC在AE患者免疫发病机制中的作用。方法 选取2015年9月—2016年6月于青海大学附属医院初诊并经病理证实为AE患者及健康体检者各20例,流式细胞仪检测外周血CD80⁺细胞、CD86⁺细胞、CD83⁺细胞及(CD80%+CD83%+CD86%)/ CD14%比值。选取2016年6月—2017年2月于该院初诊并经病理证实为AE患者及健康体检者各30例,利用流式细胞仪检测DC表面CD83、CD86、CD80表达率。结果 AE组与对照组外周血检测DC表面的共刺激分子(CD80%+CD83%+CD86%)/ CD14%差异无统计学意义（P>0.05),CD86细胞表达（7.94±1.32）较对照组低（P<0.05)。AE组外周血单核源性培养DC表面的共刺激分子CD80、CD83、CD86的表达水平(41.71±8.16、39.69±8.05、50.79±7.72）均低于对照组（62.27±5.94、56.37±7.33、72.00±7.36）（P均<0.05）。结论 AE患者外周血DC成熟度比健康对照组低,存在成熟障碍,可能会导致宿主抗原提呈功能下降,机体抗感染能力降低,从而促进了多房棘球蚴感染的进展。     

华支睾吸虫重组14-3-3ε蛋白对胆管癌CCLP-1细胞迁移侵袭的作用研究

目的 探讨华支睾吸虫重组14-3-3ε蛋白(rCs 14-3-3ε)对肝内胆管癌细胞株CCLP-1细胞波形蛋白(vimentin)表达的影响,观察该过程中CCLP-1细胞侵袭和迁移能力的变化.方法 用不同浓度(1、5、10 μg/ml)rCs 14-3-3ε与CCLP-1细胞共孵育24、48、72 h后,通过Q-PCR、Western blot等实验方法检测vimentin的表达水平.用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验检测rCs 14-3-3ε对CCLP-1细胞迁移和侵袭能力的影响.结果 Q-PCR实验表明5μg/ml rCs 14-3-3ε刺激CCLP-1细胞72 h后及10 μg/ml rCs14-3-3ε刺激CCLP-1细胞24、48、72 h后,vimentin mRNA水平显著上调;Western blot实验显示,10 μg/ml rCs14-3-3ε刺激CCLP1细胞48、72 h后,vimentin蛋白水平显著上调.划痕实验表明,rCs 14-3-3ε(10 μg/ml)能够促进细胞的迁移能力,处理后的细胞迁移率增大(P＜0.01);Transwell小室检测显示,rCs 14-3-3ε(10 μg/ml)处理组中穿膜细胞数为对照组的1.78倍,显著增加(P＜0.05).结论 rCs 14-3-3ε可以通过上调vimentin蛋白的表达,从而促进肝内胆管癌细胞株CCLP-1的侵袭和迁移能力.     

华支睾吸虫分泌排泄蛋白诱导宿主细胞自噬参与致病的分子机制

目的 探讨华支睾吸虫分泌排泄蛋白（Cs ESP）诱导宿主细胞自噬参与致病的机制。方法 建立华支睾吸虫感染的小鼠模型,分为感染组和对照组,感染组每鼠经口灌胃囊蚴50个,对照组每鼠灌入等体积生理盐水。体外培养人肝星状细胞LX-2,采用不同浓度Cs ESP(0、1、5、10、20、30、50μg/mL)刺激LX-2细胞,Western blot检测感染组和对照组中小鼠肝组织及活化的LX2细胞中自噬相关分子微管相关蛋白1轻链3(LC3B)和自噬相关蛋白16L1(ATG16L1)的蛋白水平。采用Cs ESP与自噬抑制剂三甲基腺嘌呤（3-MA）、氯喹（CQ）或自噬诱导剂Earle’s平衡盐溶液（EBSS）、雷帕霉素（Rapamycin）共同刺激LX-2细胞,分为Control（正常细胞）组、二甲基亚砜（DMSO）组、Cs ESP(50μg/mL)+3-MA(10 mmol/L,预处理2 h)组、3-MA(10 mmol/L)组、Cs ESP(50μg/mL)+CQ(30μmol/L,预处理8 h)组、CQ(30μmol/L)组、Cs ESP(50μg/mL)+EBSS（预处理3 h）组、EBSS组...     

平皿法测定食品大肠菌群的研究及其应用

大肠菌群是食品卫生评价的重要指标之一 ,食品大肠菌群的检测 ,国家标准方法有GB 4 789.3- 94的发酵法 ,推荐方法有食品大肠菌群纸片法[1] 。其中发酵法的灵敏性和准确性都较高 ,但其实验准备、操作过程和收尾工作均过于繁琐且实验所耗时间较长 ;纸片法有简便快捷的特点 ,但纸片质量参差不齐 ,结果的稳定性难以把握。 2 0 0 2年 1～ 10月 ,经过探索研制出一种集二者优点一身的新方法———平皿法。实验表明 ,本法与发酵法和纸片法相比 ,具有简便、可靠、实用等特点。1　材料与方法1.1　实验用品1.1.1　LBA培养基　济南市长清区防疫站实验…