用非同位素原位杂交组化在光镜和电镜水平观察前阿黑皮素mRNA在垂体的分布

用地高辛标记反意前阿黑皮素(pro-opiomelanocortin,POMC)cRNA探针原位杂交组化在光镜和电镜水平观察了POMC mRNA在大鼠垂体的分布,并比较了碱性磷酸酶(AKP)显色系统和辣根过氧化酶(HRP)显色系统在光镜水平上的敏感性.结果:POMC mRNA广泛地分布于垂体的中间叶和前叶.中间叶全部细胞均为POMC mRNA阳性.前叶中除前叶的腹侧缘和前叶与中间叶交界处阳性细胞较少外,都有较多的POMC mRNA阳性细胞分布.AKP显色系统比HRP显色系统敏感.在电镜水平,POMC mRNA主要分布于粗面内质网,少数分泌颗粒可能呈阳性反应,胞核未见阳性反应沉淀.文内还就阳性分泌颗粒在调节细胞合成功能方面可能起的作用进行了讨论.     

青年及老年大鼠下丘脑弓状核阿黑皮素原mRNA的表达

目的：观察青年和老年期大鼠下丘脑弓状核阿黑皮素原mRNA（POMC mRNA）的表达水平。方法应用原位杂交技术显示POMCmRNA和用计算机图像分析观察杂交信号的强弱及阳性细胞的面积,结果：与青年组相比,老年组下丘脑弓状核及其附近区域POMCmRNA阳性神经元的灰度下降,POMCmRNA阳性神经元的数目无明显变化,结论：老年期POMCmRNA阳性神经元相应的mRNA表达水平下降可能是下丘脑的POMC基因衍生肽表达水平下降的原因之一。     

超致死量~(60)Co丙种射线对大鼠下丘脑神经分泌大细胞的影响

成年雄性大白鼠受_(60)Co丙种射线全身一次照射2000拉德后,下丘脑室旁核大细胞内神经分泌物逐日增多。电镜观察照射后3天室旁核大细胞,看到核糖体增多,高尔基复合体合成面外侧池膨大,各种小泡明显增加。作者认为上述变化可能与应激反应有关。     

Digoxigenin标记反意RNA探针原位杂交技术显示新生鼠脑内生长抑素神经元分布

本实验采用含生长抑素基因的PSP65cDNA质粒通过转化至大肠杆菌扩增,经碱变性提取,纯化后用限制性内切酶进行酶切使质粒线性化,并将其作为模板,用Digoxigenin-UTP作为标记物(Boehringer公司)体外转录合成生长抑素(Somatostatin,SS)的反意 RNA探针。选用新生大鼠经多聚甲醛心脏灌注固定后,速取全脑,恒冷箱冰冻切片,切片经杂交前预处理后用含有Digoxigenin-UTP标记的SS反意 RNA探针杂交液进行杂交,之后切片,经后处理予以显色。结果表明含有生长抑素     

肛腺的组织学及其临床意义(摘要)

肛腺与肛周感染,关系至为密切。但其性质、形态、功能和临床意义等,国外文献说法不一,国内尚未见到有关报道。本文取胎儿和成人肛管材料8例,作全肛管连续切片和部分选择切片,按常规染色,进行组织学观察。主要结果,摘要如下: 一、肛腺的位置。多限于肛管壁的固有层和粘膜下层,常进入肌内。偶有超越齿线而分布于直肠的粘膜面。     

短期饥饿对老年、成年大鼠下丘脑加压素神经元及血浆皮质酮的影响

免疫组化光、电镜法观察禁食五天老年及成年大鼠下丘脑精氨酸加压素(AVP)神经元,并检测其血浆皮质酮(B),与同龄正常鼠相比.结果:(1)B均值明显升高(P<0.01),(2)各神经核团的阳性神经元有增有减,非同步变化,(3)正中隆起外带阳性纤维密集,面积增加,(4)视上核主部及室旁核的神经元粗面内质网层次增多,线粒体较密集,(5)成年饥饿鼠阳性细胞总数增加,但其视上核主部的减少,并和血浆B的增加负相关(r=-0.98,P<0.01),而老年饥饿鼠阳性细胞总数减少,且和血浆B的相关性不明显.实验结果表明:血浆B和下丘脑AVP神经元均有明显应激反应,不论成年或老年鼠对短期饥饿均呈现合成及分泌AVP较旺盛的结构变化,但老年的饥饿应激反应弱于成年鼠的.     

从果蝇染色体DNA制备RNA探针及其染色体原位杂交定位

在相差显微镜下显微切割野生型黑腹果蝇唾液腺X染色体的1区片段,抽提该片段的DNA并与PGEM3Z质粒重组,然后转化到JM103 E.colt中,共切割12个染色体,抽提到大约10pgDNA,经重组、转化获得9个重组子。提取其中5个重组质粒分析其重组片段,2个约为0.6kb,另3个约为3.0kb。2个约为0.6kb重组片断用依赖DNA模板的SP6RNA聚合酶体外合成~3H标记的RNA,以此作探针进行染色体原位杂交定位,被克隆片段定位在果蝇唾液腺X染色体1E,1F位点上。本文结果表明重组到PGEM3Z质粒中染色体DNA可直接作为合成RNA探针的模板。