中缝大核对大鼠心脏伤害性感受的下行抑制性调控作用及其调控通路

目的：观察大鼠心脏-躯体运动反射（CMR）,阐明中缝大核(NRM)对大鼠心脏伤害性感受的下行抑制性调控作用及其调控通路。方法：34只雄性健康SD大鼠随机分为NRM电刺激组（n=8）、NRM电刺激联合脊髓背外侧束（DLF）横断组（n=8）和NRM电刺激联合5-羟色胺（5-HT）受体拮抗剂鞘内微注射组（n=18）。所有大鼠均采用心包插管术制作为CMR模型,以心包内注入致痛剂辣椒素（CAP）所诱发的背斜方肌肌电（EMG）为检测指标,通过NRM区域放置刺激电极和(或)脊髓鞘内置管的方法,观察NRM高强度电刺激对CMR的下行调控作用及双侧DLF横断和鞘内5-HT受体拮抗剂注射对NRM下行调控作用的影响。 结果：给予NRM 75 μA 高强度电刺激后,CAP注射诱发的EMG反应与其未实施NRM电刺激前的基础对照比较明显减小（P<0.05）;实施双侧DLF横断后,NRM高强度电刺激后的EMG反应明显大于DLF横断前（P<0.05）,且与其基础对照比较差异无统计学意义（P>0.05）;5-HT受体拮抗剂鞘内微注射后,NRM高强度电刺激后的EMG反应较鞘内注射前明显增加（P<0.05）,但仍小于其基础对照（P<0.05）。 结论: NRM高强度电刺激对心脏伤害性感受具有下行抑制性调控作用,其下行抑制性调控通路主要由DLF所介导,且脊髓内5-HT能神经系统可能参与了源自NRM的抑制性调控过程。     

不同剂量缓释茶碱治疗小儿哮喘的疗效

目的探讨在小儿哮喘治疗中应用剂量不同的缓释茶碱疗效。方法对我院2011年7月至2012年7月收治的76例哮喘患儿进行随机分组,分别为38例高剂量组与38例低剂量组,采用不同剂量的缓释茶碱对患儿进行治疗,并分析不同剂量的缓释茶碱对患儿的临床治疗情况。结果低剂量组的症状评分相比治疗前有88.52%的减少,高剂量组的症状评分与治疗前相比有80%的减少。对比两组的临床疗效、临床症状的消失时间与不良反应率,结果有明显差异(P值<0.05)具有统计学意义。结论相对而言,低剂量缓释茶碱适合在治疗小儿哮喘中应用,其具有不良反应消除时间短、不良反应发生几率低、临床疗效明显等优势,值得在小儿哮喘的临床治疗上推广应用。     

延髓头端腹内侧区对大鼠心脏伤害性感受的下行调控作用

目的观察延髓头端腹内侧区（rostroventral medulla, RVM）对大鼠心脏伤害性感受的下行调控作用。方法通过心包插管
术制作心脏-躯体运动反射（cardiosomatic motor reflex, CMR）大鼠模型,采用RVM电刺激（强度分别为25、75 和100 μA）及
RVM电损毁的方法,以心包内可复性注入致痛剂辣椒素（capsaicin, CAP）所诱发的背斜方肌肌电（EMG）为指标评估RVM对心
脏伤害性感受的下行调控作用。结果RVM内8个刺激位点对CAP注射诱发的EMG反应产生了强度依赖性的抑制作用（F[2,
21]=43.188,P=0.001）;3个刺激位点产生了完全易化效应,其易化的程度与刺激强度无关（F[2,6]=0.884,P=0.461）;11个刺激位点对
CAP注射诱发的EMG反应产生了双向调节作用,即低强度（25 μA）刺激,EMG反应明显大于基础对照（P<0.05）,高强度（75/
100 μA）刺激,EMG反应明显低于基础对照（P<0.05）;RVM实施电损毁后,EMG反应明显高于损毁前及假损毁组（P<0.05）。结
论心脏受到伤害性刺激后,RVM对大鼠心脏伤害性感受具有双向调控作用,且以下行抑制性调控作用为主。
     

钠钙交换体激活 CaMKII 介导大鼠离体心脏缺血再灌注损伤

目的：探讨钠钙交换体(Na+/Ca2+ exchanger,NCX)在离体心脏缺血再灌注损伤中的作用及其可能机制。 方法：40只大鼠随机分为4组：正常对照组(Control组)、10 μmol/L KB-R7943药物对照组(KB-R7943组)、缺血再 灌注(ischemia reperfusion,IR)组和10 μmol/L KB-R7943干预缺血再灌注组(KB-R7943+IR组)。采用Langendorff灌流 装置建立离体心脏缺血再灌注模型;以再灌注末心肌纤维形态的变化、左室发展压(LVDP)比值、左室舒张末压 (LVEDP)、冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、心肌梗死面积及细胞色素c和cleaved caspase-3蛋白的变化评价心肌损伤程度;Western印迹检测磷酸化钙/钙调蛋白依赖的蛋白激酶II(Ca2+/calmodulin- dependent protein kinase II,CaMKII)和受磷蛋白(phospholamban,PLN)苏氨酸17位点磷酸化(pThr17)水平的变化。 结果：与Control组相比,IR组再灌注末心肌纤维排列紊乱,断裂明显,心肌梗死面积、LVEDP和冠状动脉流出 液中LDH活性明显增加,LVDP比值降低,细胞色素c、cleaved caspase-3、磷酸化CaMKII及pThr17-PLN水平均上调 (P<0.01);KB-R7943+IR组心肌梗死面积明显减小,LVEDP降低,LVDP比值明显改善,LDH活性明显降低,细胞色素 c和cleaved caspase-3蛋白水平明显降低,磷酸化CaMKII和pTh r17-PLN水平也明显下调(P<0.01)。结论：NCX可通过激活 CaMKII启动细胞凋亡和坏死,进而诱导心肌缺血再灌注损伤。     

褪黑素在大鼠离体心脏急性钙超载损伤中的作用

目的：观察褪黑素(melatonin,Mel)对大鼠离体心脏急性钙超载损伤的保护作用。方法：将32只大鼠随机 分为4组：对照组(Control)、褪黑素组(Mel)、钙反常组(calcium paradox,CaP)和Mel干预钙反常组(Mel+CaP)。大鼠离 体心脏行Langendorff灌流,建立钙反常模型;观察左室发展压、心肌梗死面积、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活性、细胞色素c及caspase-3蛋白的表达变化;HE染色观察心肌纤维形态学变化。结果：与Control组相比, CaP组心肌几乎全部梗死(P<0.01),冠状动脉流出液中LDH活性显著增加(P<0.01),心肌纤维排列紊乱,细胞色素c和 caspase-3蛋白表达均上调(P<0.01);Mel(10 μmol/L)干预钙反常组心脏损伤各项指标均明显降低(P<0.01)。结论：Mel可 明显减轻大鼠离体心脏急性钙超载诱导的损伤。     

钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ通过介导凋亡加重H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的:探讨钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(Ca~(2+)/calmodulin-dependent protein kinase II,Ca MKII)在H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中的作用。方法:H9c2心肌细胞随机分为4组:正常对照(control)组、Ca MKII特异性抑制剂KN-93(1μmol/L)对照(KN-93)组、H/R组和KN-93+H/R组,其中KN-93组及KN-93+H/R组先用1μmol/L KN-93预处理2 h后,再进行其它处理。倒置显微镜观察各组H9c2心肌细胞的形态变化,CCK-8法检测各组H9c2心肌细胞的活力,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测各组培养基中LDH的活性,Western blot法检测Ca MKII及其底物受磷蛋白(phospholamban,PLN)的磷酸化水平以及凋亡相关蛋白cleaved caspase-3的表达,TUNEL染色和流式细胞术观察细胞凋亡。结果:与control组相比,KN-93组各项指标均无显著性差异;H/R组细胞皱缩,大量死亡,细胞活力明显降低,培养基中LDH活性明显升高(P0.01),Ca MKII及PLN的磷酸化水平和cleaved caspase-3的蛋白水平显著增加(P0.01),TUNEL染色阳性细胞数和流式细胞凋亡率显著增加(P0.01);1μmol/L KN-93干预H/R可明显改善细胞形态,增加细胞活力,降低培养基中LDH活性(P0.01),减少Ca MKII和PLN的磷酸化水平以及cleaved caspase-3的蛋白水平(P0.05),降低TUNEL染色阳性细胞数和流式细胞凋亡率(P0.01)。结论:Ca MKII通过介导细胞凋亡参与H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤。     

动物实验教学的卫生安全防护

目的 动物实验教学在培养合格的医药卫生人才中发挥着非常重要的作用.然而,在教学过程中也存在各种潜在的生物安全危险.因此,采取有效的卫生安全监督和管理措施,加强防护意识和技能的培训,尽可能的减小或杜绝自身感染、环境污染等事件的发生有着非常重要的意义.     

中脑导水管周围灰质腹外侧区促代谢型谷氨酸受体亚型7和8对大鼠心脏-躯体运动反射的双向调节作用

目的观察中脑导水管周围灰质腹外侧区（VL-PAG）内促代谢型谷氨酸受体亚型7（mGluR 7）和8（mGluR 8）对大鼠心脏-
躯体运动反射（CMR）的调节作用。方法通过心包插管术制作CMR大鼠模型,在VL-PAG内分别注射mGluR 7和mGluR 8的
激动剂AMN082和DCPG,观察其对大鼠CMR的调节作用;同时电损毁延髓头端腹内侧区（rostroventral medulla, RVM）亚核中
的中缝大核或双侧网状巨细胞核,观察VL-PAG对大鼠CMR的下行调控作用。结果AMN082选择性激活VL-PAG内mGluR
7后,对辣椒素诱发的CMR具有明显的易化作用（P<0.05）;与之相反,DCPG激活VL-PAG内mGluR 8对CAP诱发的CMR具有
明显的抑制作用（P<0.05）;这种易化或抑制效应均可被其拮抗剂MSOP完全拮抗;损毁大鼠VL-PAG的主要中继亚核中的中缝
大核后,VL-PAG内AMN082微注射所产生的易化效应没有受到明显的影响（P>0.05）,VL-PAG内DCPG微注射所产生的抑制
效应被部分地减弱（P<0.05）;而双侧网状巨细胞核损毁后,AMN082微注射所产生的易化效应明显被减弱,同时DCPG所产生
的抑制效应也有所减弱。结论VL-PAG内mGluR 7和mGluR 8对大鼠CMR具有易化和抑制双向调节效应,而这种双向调节
效应很可能是通过RVM的不同亚核、不同神经元的激活而实现的。     

2,3-丁二酮单肟改善大鼠离体心脏钙反常损伤的作用及机制

目的探讨挛缩抑制剂2,3-丁二酮单肟（2,3-butanedione monoxime, BDM）改善大鼠离体心脏钙反常损伤的作用及其机 制。方法32只SD雄性大鼠随机分为4组：正常对照组、BDM对照组、钙反常组和BDM干预组。大鼠离体心脏行Langendorff 灌流,记录左室内压（left ventricular pressure, LVP）、左室舒张末压（left ventricular end-diastolic pressure, LVEDP）,并计算左室 发展压（left ventricular developed pressure, LVDP）评价心功能;测定复灌期冠脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）的含量反映心肌损 伤;2、3、5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法评价心肌梗死面积的变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数;Western blot法检测 cleaved caspase-3和细胞色素c（cytochrome c）蛋白的表达。结果与正常对照组相比,BDM（20 mmol/L）对照组大鼠心脏左室 功能、心肌梗死面积和凋亡指数及cleaved caspase-3和细胞色素c蛋白的表达,无显著性变化（P>0.05）;钙反常组LVEDP显著抬 升,LVDP为0,冠脉流出液中LDH含量明显增多（P<0.01）,cleaved caspase-3和细胞色素c蛋白的表达以及凋亡指数明显增加 （P<0.01）,心脏组织几乎全部死亡（P<0.01）;BDM（20 mmol/L）干预钙反常组大鼠心脏心梗面积显著减小（P<0.01）,LVEDP降 低、LVDP部分恢复（P<0.01）,LDH释放减少（P<0.01）,cleaved caspase-3和细胞色素c蛋白表达量以及凋亡指数明显降低（P< 0.01）。结论BDM明显抑制急性钙超载引起的挛缩和细胞凋亡,改善心功能,减轻大鼠离体心脏钙超载损伤,是一种潜在的缺 血再灌注心肌保护药物。