PSGL-1基因敲除小鼠血中MIP-1γ和TNF-α的表达

目的 研究PSGL-1缺失对遗传基因工程小鼠外周血血常规的影响,并检测外周血中炎症因子IGFBP-6、TNF-α和MIP-1γmRNA表达水平。方法 用血常规检测方法检测正常C57/BL/6小鼠和PSGL-1基因缺失的基因工程小鼠（PSGL-1^-/-小鼠）的外周血中血常规的差异;其次,提取两种鼠的血液的mRNA,逆转录为cDNA,采用real-time PCR方法,检测C57小鼠与PSGL-1^-/-小鼠外周血中炎症因子 TNF-α和MIP-1γmRNA的差异。结果 与对照组C57小鼠相比,PSGL-1^-/-基因工程小鼠在12周龄时外周血中中性粒细胞（^*P<0.05）、淋巴细胞（^**P<0.01）和白细胞细胞（^***P<0.001）总数显著增加炎症因子TNF-α以及MIP-1γ表达增加（P<0.05）。结论 PSGL-1的缺失改变了小鼠细胞因子并影响了外周血的血细胞组成,MIP-1γ和TNF-α炎症因子上调,有可能影响了小鼠的免疫功能。     

Tg（CD4-EGFP）；LFA-1^-/-基因工程小鼠模型的构建

目的构建并繁殖T细胞表达绿色荧光蛋白的LFA-1基因敲除小鼠[Tg（CD4-EGFP）;LFA-1^√-]。方法将CD4-EGFP转基因小鼠与LFA-1基因敲除小鼠杂交并将其子代相互杂交,提取小鼠尾部DNA,用PCR法鉴定基因型。根据孟德尔定律,可得到Tg（CD4-EGFP;LFA-1^√-）小鼠。结果Tg（CD4-EGFP）;LFA-1。小鼠的构建、饲养繁殖均获得成功。结论成功获得了T细胞表达绿色荧光蛋白的LFA-1基因敲除小鼠。     

星形细胞瘤VEGF表达与瘤周水肿、瘤脑界面问关系的CT研究

目的研究星形细胞瘤瘤周水肿、瘤脑界面与血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)间的关系,探讨其CT征象的分子生物学意义.方法运用SP免疫组化法,检测52例术后经病理证实的星形细胞瘤VEGF.分析瘤周水肿、瘤脑界面与VEGF间的关系.结果肿瘤边缘、瘤周水肿、占位效应与VEGF表达密切相关.随水肿、占位程度的增加,VEGF阳性率亦显著增高(P＜0.01).边缘模糊组的VEGF阳性率分别69.2±19.0,与边缘清楚组间的VEGF阳性率存在统计学差异(P＜0.05).结论星形细胞瘤的VEGF异常表达,对瘤周水肿及瘤脑界面等CT征象有明显影响.     

星形细胞瘤VEGF表达与瘤周水肿、瘤脑界面间关系的CT研究

目的研究星形细胞瘤瘤周水肿、瘤脑界面与血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)间的关系,探讨其CT征象的分子生物学意义。方法运用SP免疫组化法,检测52例术后经病理证实的星形细胞瘤VEGF。分析瘤周水肿、瘤脑界面与VEGF间的关系。结果肿瘤边缘、瘤周水肿、占位效应与VEGF表达密切相关。随水肿、占位程度的增加,VEGF阳性率亦显著增高(P<0.01)。边缘模糊组的VEGF阳性率分别69.2±19.0,与边缘清楚组间的VEGF阳性率存在统计学差异(P<0.05)。结论星形细胞瘤的VEGF异常表达,对瘤周水肿及瘤脑界面等CT征象有明显影响。     

星形细胞瘤瘤内CT征象与微血管密度相关性的初步研究

目的 研究星形细胞瘤瘤内CT征象与微血管密度(Microvessel density,MVD)间的关系。探讨CT评估星形细胞瘤新生微血管的作用。方法 运用SP免疫组化法,检测52例术后经病理证实的星形细胞瘤MVD。分析瘤内CT征象与MVD间的关系。结果 MVD与病理分级相关。混杂密度及高密度组的MVD显著高于低密度组(P<0.01)。坏死明显组的MVD比坏死不明显组高,二者间存在显著差异(P<0.01)。钙化组的MVD为13.7±4.7,明显少于无钙化组(20.9±5.8)。囊变与MVD无明显相关性。结论 星形细胞瘤瘤内CT征象,如密度、钙化、坏死等征象在判断肿瘤新生血管方面有一定的价值。     

改良CAM移植瘤模型的制备及其对肿瘤血管新生抑制药物的筛选效果

目的： 以改良方法在鸡胚绒膜尿囊膜（chick chorioallantoic membrane,CAM）上接种人成神经胶质瘤U87细胞制备移植瘤,验证改良模型筛选抗肿瘤血管新生药物的有效性和可行性。 方法： 将鸡胚种蛋随机分为2组,分别使用传统方法与改良方法建立CAM-U87移植瘤模型;改良方法在鸡胚孵育中增加9~16 h的开窗适应期,再将特制的硅胶圈放置在CAM组织一级血管的半侧;硅胶圈内接种U87细胞建立CAM-U87移植瘤模型。模型的硅胶圈内分别加入经典抗血管新生药物沙利度胺（50、100、200 μg/ml）和自主研发抗血管新药G3B6,以DMSO为对照;体视显微镜观察肿瘤形态,H-E染色法观察瘤组织新生微血管密度 (microvessel density,MVD）,原位杂交（in situ hybridization,ISH）技术检测血管标记物VEGFR2的表达。 结果： 成功制备改良CAM-U87细胞移植瘤,改良模型不影响CAM本身的血管生成,其瘤细胞接种成功率较传统模型显著升高\[（70.00±4.226）% vs (41.25±5.154)%;t=4.314,P=0.000 7\],移植瘤体积显著增大\[（60.20±6.012）vs （15.97±2.403）mm 3;t=6.012,P<0000 1\]。沙利度胺和G3B6两药均能显著抑制移植瘤组织中的血管形成,使瘤组织中MVD显著降低\[沙利度胺200 μg/ml时（15.85±1.15）% vs （29.80±4.16）%;t=2.49,P=0.047 4\]、VEGFR2表达明显减少。 结论： 改良方法 成功制备CAM-U87移植瘤模型,经沙利度胺和G3B6验证,该模型对抗肿瘤血管新生药物的筛选具有良好的有效性和可行性。     

PSGL-1基因敲除小鼠血中MIP-1γ和TNF-α的表达

目的研究PSGL-1缺失对遗传基因工程小鼠外周血血常规的影响,并检测外周血中炎症因子IGFBP-6、TNF-α和MIP-1γmRNA表达水平。方法用血常规检测方法检测正常C57/BL/6小鼠和PSGL-1基因缺失的基因工程小鼠(PSGL-1-/-小鼠)的外周血中血常规的差异;其次,提取两种鼠的血液的mRNA,逆转录为cDNA,采用real-time PCR方法,检测C57小鼠与PSGL-1-/-小鼠外周血中炎症因子TNF-α和MIP-1γmRNA的差异。结果与对照组C57小鼠相比,PSGL-1-/-基因工程小鼠在12周龄时外周血中中性粒细胞(*P0.05)、淋巴细胞(**P0.01)和白细胞细胞(***P0.001)总数显著增加炎症因子TNF-α以及MIP-1γ表达增加(P0.05)。结论 PSGL-1的缺失改变了小鼠细胞因子并影响了外周血的血细胞组成,MIP-1γ和TNF-α炎症因子上调,有可能影响了小鼠的免疫功能。