反相高效液相色谱法测定根皮苷原料药的含量

目的采用反相高效液相色谱法测定根皮苷原料药含量,以满足质量控制的要求。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Inertsil ODS-3柱(4.6×150 mm,5μm)。流动相为乙腈-0.15%磷酸(25∶75),柱温30℃,流速1.0 ml/min,检测波长285nm。结果此条件下根皮苷分离良好,在0.4950～49.50μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,回归方程为:Y=46.370X-0.673(r=0.9999,n=3),平均回收率为99.40%,相对标准偏差为0.67%。结论建立根皮素原料药含量测定的HPLC方法专属性强、灵敏度高,为根皮素质量控制提供参考依据。     

RNA 结合蛋白 QKI 吸附海绵载体的构建及其对肝癌细胞增殖的影响

目的：构建针对 RNA 结合蛋白 quaking (QKI)的特异性吸附海绵载体(QRE-sponge),验证其对肝癌细胞系 HepG2中内源性 QKI 分子的抑制作用。方法利用人源 QKI 的特异性识别效应原件(qua-king responsive element, QRE)序列,重复13个拷贝,串联克隆至 pEGFP-C2真核表达载体中,转染 HepG2肝癌细胞及293 T 细胞。通过 Real time PCR,双荧光素酶报告基因检测及 MTT 实验进一步验证该吸附海绵的效果及其对肝癌细胞系 HepG2增殖的影响。结果 pEGFP-C2-QRE-SP 载体经测序证实构建成功,可以成功的在 HepG2细胞中表达,其绿色荧光呈阳性,且转染24 h 后显著影响 HepG2细胞中 QKI 下游靶基因的表达(P ﹤0.05)。双荧光素酶报告基因系统显示, pGL3-QRE-SP 载体可以显著抑制外源性 QKI 的活性(P﹤0.05)。 MTT 结果显示 pEGFP-C2-QRE-SP 载体促进 HepG2细胞的增殖。结论 QKI 吸附海绵载体策略构建的 pEGFP-C2-QRE-SP 载体可以成功的诱骗吸附 QKI,并促进肝癌细胞系 HepG2增殖,为进一步研究 QKI的功能研究提供了良好工具。     

高效液相色谱法测定黑白芝麻中芝麻素含量

［摘要］目的采用高效液相色谱法测定芝麻中芝麻素含量。方法以甲醇：水 （ 75：25，V/V）为流动相，流速1.0 mL•min 1，经Inertsil ODS 3 （4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱分离，于287 nm波长检测。结果芝麻素在0.60～ 89.82 mg•L 1浓度范围内呈良好的线性关系，回归方程：Y＝30 133.83X－3 145.52（r＝0.999 9，n＝3）；芝麻素平均回收率100.0%，相对标准偏差（RSD）为0.81%。结论该方法简便、快速，准确，可为芝麻及其制品的质量控制提供依据。     

《生物制药学》课程思政教学改革探索与实践

将《生物制药学》思想政治教育贯穿到专业课程教学全过程。根据自身学科特色和优势,充分提炼学术内涵和价值范式,找出思政教育与学科专业的结合点、共通处,重塑课程育人目标,进行“思政寓课程,课程融思政”式教学设计。《生物制药学》专业课程“思政寓课程,课程融思政”式教学设计可以潜移默化地使学生在专业知识学习中融入价值观层面的精神指引、社会主义核心价值观和实现民族复兴的理想与责任,达到立德树人的目标。通过积极探索《生物制药学》专业课程“思政寓课程,课程融思政”的教学方法和方式,进一步提高育人意识和育人能力,将《生物制药学》知识与思想政治教育有机融合,使得《生物制药学》教学质量更上一层楼。     

靶向C D19嵌合抗原受体载体的构建及其稳转细胞体外活化效应的研究

目的：构建靶向CD19嵌合抗原受体载体并通过建立稳转细胞系检测其在体外的活化效应。方法合成获取CD19的CAR片段,转入pCMV6?Entry质粒,构建pCMV6?Entry?CAR载体。通过重组酶的作用将pCMV6?Entry?CAR载体和pLenti6．3／V5?DEST载体进行重组,形成pLenti6．3／V5?DEST?CAR载体,将其包装入慢病毒并感染Jurkat细胞建立稳转细胞系。将稳转的Jurkat细胞和Raji细胞共孵育后,利用ELISA检测上清IL?2的含量,判断Jurkat细胞的活化状况。结果成功构建了pLenti6．3／V5?DEST?CAR载体,感染筛选后的Jurkat细胞可稳定表达CD19的CAR,与Raji细胞共孵育后细胞上清中IL?2的浓度增加至22 pg／ml。结论实验中构建的pLenti6．3／V5?DEST?CAR载体能够稳定转染并表达于Jurkat细胞系中,并能有效促进其激活效应。为下一步优化CAR T细胞提供基础。     

RP-HPLC同时测定克银颗粒中的靛蓝和靛玉红

目的建立克银颗粒中靛蓝和靛玉红含量的测定方法。方法采用HPLC法定量分析,色谱柱为Phenomenex C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-水（80∶20,V/V）,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃;靛蓝的检测波长为287 nm,靛玉红为292 nm。结果靛蓝在0.329～32.900μg/mL范围内线性关系良好,Y=56.94C-1.749（r=0.999 8）,靛玉红在0.390～39.000μg/mL（r=0.999 9）范围内线性关系良好,Y=119.1C＋19.71（r=0.999 9）,其平均回收率分别为99.89%（RSD=1.00%,n=5）、99.18%（RSD=0.48%,n=5）。结论所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于克银颗粒的质量控制。