肝细胞生长因子和丹参对大鼠急性肝损伤保护作用的实验研究

作者观察了肝细胞生长因子（HGF）、丹参对DDl4所致大鼠急性肝损伤的影响，结果发现，HGF组、丹参组以及西药联用组对急性肝损伤大鼠的血清ALT、α-肿瘤坏死因子（TNF-α）、丙二醛（MDA）以及肝组织匀浆MDA、肝组织钙含量的升高等均有不同程度的降低作用，且能使CCl4所致降低的血清及肝组织匀浆SOD活力明显升高。光镜及电镜下观察，用药组肝细胞病变软CCl4组有明显改善。本文结果表明，HGF、丹参对CCl4所致大鼠急性肝损伤有良好的保护作用，且HGF、丹参联用效果优于单用．     

小儿全胃肠外营养的肝胆并发症

全胃肠外营养（TPN）相关性肝胆功能异常仍是TPN治疗中重要的并发症。小儿主要表现为肝内胆汁淤积。长期TPN可引起胆泥和胆石形成。其发病机制尚不清楚，一般认为其病因学是多因素的，如静脉营养过量及营养成分失平衡；某些营养素缺乏；缺乏肠道刺激及肠道营养、胃肠激素分泌减少；肠道细菌过度生长、细菌移位及可能的肝脏毒性因子等。其防治应注意给予病人平衡的营养，不要过量；给予营养素全面的溶液；如果可能应尽早经口或肠道进食。     

精氨酸强化全胃肠外营养对肠屏障功能的保护

目的:采用幼兔全胃肠外营养动物模型,观察精氨酸强化全胃肠外营养对肠屏障功能的保护作用。方法:实验于2004-06/2005-05在上海交通大学医学院附属新华医院中心实验室完成。选择新西兰幼兔24只,随机数字表法分为3组。正常对照组右颈静脉结扎后自由饮食,其余两组经右颈静脉插入硅胶管;标准全胃肠外营养组每天输注标准全胃肠外营养液(735kJ/kg,200mL/kg),精氨酸强化全胃肠外营养组输注精氨酸占总热量2%的等氮等热量的全胃肠外营养液。7d后分别取血浆及回肠标本进行检测:①肠黏膜形态学改变。②肠菌移位率。③血浆D-乳酸含量。⑤血浆和回肠组织一氧化氮含量、回肠组织一氧化氮合酶活性和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达。结果:纳入动物24只,均进入结果分析。①肠黏膜在标准全胃肠外营养组明显变薄、萎缩(P<0.01),而精氨酸强化全胃肠外营养组肠黏膜的萎缩较标准全胃肠外营养组明显减轻[黏膜厚度分别为(333.12±36.29),(279.13±49.01)μm,P<0.05],与正常对照组差异无显著性意义(P>0.05)。②标准全胃肠外营养组细菌移位率明显高于正常对照组(分别为62.5%,0,P<0.01),精氨酸强化全胃肠外营养组肠菌移位率较标准全胃肠外营养组显著降低(分别为12.5%,62.5%,P<0.05),与正常对照组差异无显著性意义(P>0.05)。③精氨酸强化全胃肠外营养组血浆D-乳酸含量较标准全胃肠外营养组明显降低[分别为(3.886±1.243),(7.218±1.470)mg/L,P<0.01],但较正常对照组仍偏高(P<0.05)。④精氨酸强化全胃肠外营养组回肠组织的一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达强度较标准全胃肠外营养组有显著增加[一氧化氮含量分别为(1.163±0.123),(0.901±0.252)μmol/L;一氧化氮合酶活性分别为(85.92±16.92),(67.76±15.57)μkat/g;诱导型一氧化氮合酶mRNA表达分别为71.0±10.1,60.4±9.4,P<0.05],与正常对照组差异无显著性意义(P>0.05)。各组血浆中一氧化氮含量差异无显著性意义(P>0.05)。结论:精氨酸对维持肠黏膜形态和功能的完整性具有重要作用,其作用机制与肠道诱导型一氧化氮合酶产生的一氧化氮有关,添加适量外源性的精氨酸具有改善全胃肠外营养所致小肠黏膜损伤的作用。     

精氨酸强化全胃肠外营养对肠屏障功能的保护

目的：采用幼兔全胃肠外营养动物模型，观察精氨酸强化全胃肠外营养对肠屏障功能的保护作用。方法：实验于20014-016／2005-05在上海交通大学医学院附属新华医院中心实验室完成。选择新西兰幼兔24只，随机数字表法分为3组。正常对照组右颈静脉结扎后自由饮食，其余两组经右颈静脉插入硅胶管；标准全胃肠外营养组每天输注标准全胃肠外营养液（735kJ/kg，200mL／kg），精氨酸强化全胃肠外营养组输注精氨酸占总热量2％的等氮等热量的全胃肠外营养液。7d后分别取血浆及回肠标本进行检测：①肠黏膜形态学改变。②肠菌移位率。③血浆D-乳酸含量。（9血浆和回肠组织一氧化氮含量、回肠组织一氧化氮合酶活性和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达。结果：纳入动物24只，均进入结果分析。①肠黏膜在标准全胃肠外营养组明显变薄、萎缩（P〈0．01），而精氨酸强化全胃肠外营养组肠黏膜的萎缩较标准全胃肠外营养组明显减轻[黏膜厚度分别为（333．12&;#177;36．29），（279．13&;#177;49．01）μm，P〈0．05]，与正常对照组差异无显著性意义（P〉0．05）。②标准全胃肠外营养组细菌移位率明显高于正常对照组（分别为62．5％，0，P〈0．01），精氨酸强化全胃肠外营养组肠菌移位率较标准全胃肠外营养组显著降低（分别为12．5％，62．5％，P〈0．05），与正常对照组差异无显著性意义（P〉0．05）。⑧精氨酸强化全胃肠外营养组血浆D-乳酸含量较标准全胃肠外营养组明显降低[分别为（3-886&;#177;1．243），（7．218&;#177;1．470）mg／L，P〈0．01]，但较正常对照组仍偏高（P〈0．05）。（少精氨酸强化全胃肠外营养组回肠组织的一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达强度较标准全胃肠外营养组有显著增加卜一氧化氮含量分别为（1．163&;#177;0.123），（0.901&;#177;0.252）μmol／L；一氧化氮合酶活性分别为（85．92&;#177;16．92），（67．76&;#177;15．57）μkaL／g；诱导型一氧化氮合酶mRNA表达分别为71．0&;#177;10．1，60．4&;#177;9．4，P〈0．051，与正常对照组差异无显著性意义（P〉0．05）。各组血浆中一氧化氮含量差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：精氨酸对维持肠黏膜形态和功能的完整性具有重要作用，其作用机制与肠道诱导型一氧化氮合酶产生的一氧化氮有关，添加适量外源性的精氨酸具有改善全胃肠外营养所致小肠黏膜损伤的作用。     

小儿全胃肠外营养的肝胆并发症

全胃肠外营养（ＴＰＮ）相关性肝胆功能异常仍是ＴＰＮ治疗中重要的并发症。小儿主要表现为肝内胆汁淤积，长期ＴＰＮ可引起胆泥和胆石形成。其发病机制尚不清楚，一般认为其病因学是多因素的，如静脉营养过量及营养成分失平衡；某些营养素缺乏；缺乏肠道刺激及肠道营养、胃肠激素分泌减少；肠道细菌过度生长、细菌移位及可能的肝脏毒性因子等。其防治应注意给予病人平衡的营养，不要过量；给予营养素全面的溶液；如果可能应尽早经口或肠道进食。     

精氨酸强化全肠外营养对小肠上皮细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨精氨酸强化的全肠外营养(TPN)对小肠上皮细胞增殖与凋亡的影响.方法:将24只幼兔分为正常对照组、标准TPN组、精氨酸强化TPN组(精氨酸的供热量占总热量的2%).7 d后,分别取血和回肠组织进行以下检测:①肠黏膜形态学;②肠道细菌移位率;③血浆D-乳酸含量;④肠上皮增殖细胞核抗原(PCNA);⑤肠上皮细胞凋亡.结果:①标准TPN组肠黏膜明显变薄、萎缩(P＜0.01),而精氨酸强化TPN组肠黏膜的萎缩较标准TPN组明显减轻(P＜0.05).②精氨酸强化TPN组肠道细菌移位率较标准TPN组显著降低(P＜0.05).③精氨酸强化TPN组血浆D-乳酸含量较标准TPN组明显降低(P＜0.01),但较正常对照组仍偏高(P＜0.05).④精氨酸强化TPN组PCNA阳性率较标准TPN组明显增高(P＜0.01),但仍低于正常对照组(P＜0.05).⑤精氨酸强化TPN组的凋亡指数显著低于标准TPN组(P＜0.01).结论:精氨酸能维持肠黏膜形态和功能的完整性,促进肠上皮细胞增殖和抑制其凋亡.     

新生兔全胃肠外营养所致肝损害的实验研究

全胃肠外营养（TPN）可引起肝脏并发症，在新生儿主要表现为肝内胆汁淤积，为研究新生儿TPN肝脏并发症问题，建立了新生兔TPN致肝脏并发症的动物模型，24只新生新西兰白兔分为3组，正常对照组，TPN1周组、TPN2周组。正常对照组母乳喂养1周，TPN组动物经输液泵接受持续TPN。TPN1周组血清胆汁酸，胆红素较正常对照组明显增高，TPN2周组有进一步升高，TPN组肝组织可见小叶间胆管胆栓形成，胆管增生，枯否氏细胞及肝细胞胆色素沉积等淤胆表现，并可见轻度肝脂肪变性；TPN2周组上述改变进一步加重，TPN组肝组织电镜上形态特征为线粒体肿胀，毛细胆管扩张，微绒毛减少或消失。     

虫草菌液对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞转化生长因子β_1和纤维连接蛋白表达的影响

目的：研究虫草菌液（HS）对高糖作用下体外培养的大鼠腹膜间皮细胞（RPMCs）转化生长因子β1（TGF-β1）和纤维连接蛋白（FN）表达的影响。方法：将原代培养的第3代RPMCs随机分为6组：对照组、1.5%葡萄糖组、2.5%葡萄糖组、单纯虫草组（10mg/ml）、1.5%葡萄糖＋10mg/ml虫草组、2.5%葡萄糖＋10mg/ml虫草组。同步培养72h后,以RTPCR法检测各组细胞TGF-β1和FN mRNA表达情况;ELISA法检测细胞上清液中TGF-β1和FN的蛋白质水平。结果：高糖作用下RPMC的TGF-β1、FN mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组（P〈0.05）,且增高的程度与葡萄糖浓度呈依赖关系。与相应浓度的高糖组相比,经虫草菌液干预后RPMC的TGF-β1、FN mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P〈0.05）。结论：虫草菌液可下调高糖作用下RPMCs的TGF-β1和FN的表达,具有抗腹膜纤维化的作用。     

丹参注射液对高糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞的过氧化损伤及E钙黏素和α平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 研究丹参注射液对高糖作用下的大鼠腹膜间皮细胞过氧化损伤及E钙黏素和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 体外培养大鼠原代腹膜间皮细胞,第3代细胞经无血清培养基同步培养24 h后分为正常对照组、高糖诱导组(25 mg/mL葡萄糖)、甘露醇对照组(25 mg/mL甘露醇)和丹参干预组(15 mg/mL丹参注射液+25 mg/mL葡萄糖),测定各组细胞内丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用RT-PCR技术和Western blotting方法检测各组细胞内E钙黏素和α-SMA的mRNA和蛋白表达.结果 与正常对照组比较,高糖诱导组细胞内ROS和MDA含量增高,而SOD活性降低,E钙黏素mRNA和蛋白的表达减少,α-SMA mRNA和蛋白的表达增加,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).与高糖诱导组比较,丹参干预组细胞内ROS和MDA含量减少,SOD活性增强,E钙黏素mRNA和蛋白的表达增加,而α-SMA mRNA和蛋白的表达减少,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 丹参注射液可明显减轻高糖诱导的腹膜间皮细胞的过氧化损伤,其对细胞内E钙黏素和α-SMA表达的调控作用可能与延缓腹膜纤维化作用有关.     

丹参注射液对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的：研究丹参注射液对造影剂碘海醇诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用并对其作用机制进行探讨。方法：体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）,分为正常对照组、甘露醇对照组（与碘海醇渗透压相当）、造影剂对照组（碘海醇100mg/ml）、丹参防治组（碘海醇100mg/ml＋丹参注射液15mg/ml）。比色法测定细胞培养上清液LDH水平,MTT法测定细胞增殖活力,DCFH-DA荧光探针测定细胞内活性氧（ROS）,硫代巴比妥酸法测定细胞内MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,RT-PCR测定细胞内血红素加氧酶-1（HO-1）mRNA表达,Westernblot检测细胞内HO-1蛋白表达。结果：碘海醇100mg/ml可明显抑制HK-2细胞增殖、引起培养液中LDH水平上升、促使细胞内ROS和MDA含量增高而细胞内SOD活性下降,同时碘海醇可诱导HO-1mRNA和蛋白表达上调。加入丹参可明显降低培养液中LDH水平,促进细胞增殖,同时抑制细胞内ROS的产生,降低细胞内MDA含量,保护细胞内SOD活性,并使HO-1mRNA和蛋白表达进一步增强。结论：丹参对造影剂碘海醇所致肾小管上皮细胞具有明显的保护作用,其作用机制与其抗氧化能力及诱导HO-1表达有关。