巨噬细胞源性神经营养因子的初步分离

本文制备了巨噬细胞条件培养基（ＭφＣＭ），并应用快速自动比色微量分析法检测ＭφＣＭ对体外培养的生后７ｄＳＤ大鼠小脑皮质神经元的作用。结果表明，分子量大于１０ｋＤ的ＭφＣＭ对神经元（细胞密度１×１０６／ｍｌ）的作用，与对照组比较有明显的神经营养活性（Ｆ＜０．０５）；用盖玻片培养法表明，该组份有促进神经元突起生长的作用。ＭφＣＭ经ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－１００－ＨＲ凝胶层析和生物活性鉴定，获得了具有神经营养活性的第二峰洗脱液。此洗脱液经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，证明ＭφＣＭ中神经营养活性成份的蛋白质其分子量为３１ｋＤ－６８ｋＤ之间。     

体外反搏治疗失血性休克中一氧化氮合酶的变化

目的：探讨反搏治疗失血休克中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的变化。方法：复制狗的失血休克模型，用同位素方法测定反搏前后各组织的ＮＯＳ活性。结果：体外反搏后平均动脉压较反搏前明显上升（Ｐ＜００１）。脑ＮＯＳ测定值假手术对照组明显高于失血休克组Ｐ＜００１）及失血休克克反搏组（Ｐ＜００１），失血休克组则明显低于失血休克反搏组（Ｐ＜００１）；心肌ＮＯＳ活性假手术对照组与失血休克反搏组均明显高于失血休克组（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１），但假手术对照组与失血休克反搏组之间无显著差异（Ｐ＞００５）；主动脉ＮＯＳ活性假手术对照组明显高于失血休克组（Ｐ＜００１）及失血休克反搏组（Ｐ＜００５），但失血休克组与失血休克反搏组间无明显差异（Ｐ＞００５）。结论：体外反搏可以增强小血管ＮＯＳ活性，ＮＯＳ活性的恢复则可能在反搏治疗中起重要作用     

钙调蛋白在大鼠晶状体生长发育和白内障形成中作用的研究

目的 探讨钙调蛋白(CaM)活性变化在大鼠晶状体生长发育和白内障形成中的作用。方法 从大鼠脑组织中提取钙调蛋白，从牛心中提取钙调蛋白依赖型磷酸二酯酶(PDE-I)，测定不同生长发育阶段和硒性白内障大鼠晶状体中钙调蛋白的相对活性。结果 钙调蛋白相对活性随大鼠年龄增长下降，硒性白内障晶状体中钙调蛋白相对活性高于同年龄正常晶状体。结论 钙调蛋白参与晶状体的生长发育过程，钙调蛋白相对活性升高是白内障形成的原因之一。     

雪旺氏细胞分泌的神经营养活性物质的提取及体外生物活性研究

雪旺氏细胞（ＳＣ）分泌多种神经营养因子促进周围神经再生，但ＳＣ分泌的各种蛋白质对周围神经再生的影响尚未完全阐明。为此，从成年大鼠瓦勒氏变性坐骨神经中分离出ＳＣ，经培养获得ＳＣ无血清条件培养液（ＳＣ－ＳＦＣＭ）。通过ＰＭ１０超滤浓缩、Ｄｉｓｃ－ＰＡＧＥ和Ｂｉｏｔｒａｐ电洗脱，从ＳＣ－ＳＦＣＭ中分离出Ｄ蛋白带，分子量在４３～６７Ｋｄ之间。经ＭＴＴ检测，Ｄ带蛋白在２５～５０ｎｇ／ｍｌ浓度时对脊髓前角神经元表现出明显的体外成活作用。Ｄ蛋白带可能是一种有别于已知的ＳＣ源神经营养物质，其活性浓度达到了神经营养因子分子检测水平，值得深入研究     

雪旺细胞胞浆神经营养蛋白的分离纯化和理化性质测定

目的：分离纯化雪旺细胞胞浆神经营养蛋白并测定其等电点。方法：培养收集新生１－３天ＳＤ乳鼠四肢神经雪旺细胞，超声粉碎，超速离心，取上清胞浆成份超滤浓缩，收集分子量＞１０ＫＤａ浓缩蛋白液，通过ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ离子交换层析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤层析和Ｄｉｏｌ－１５０高压液相分子筛层析进行分离纯化，等电聚焦电泳测定纯化的活性蛋白质等电点和ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其亚基分子量。结果：成功地分离纯化出一种活性蛋白质，分子量约５８ＫＤａ，等电点４．５５，结论：联合应用超滤浓缩、离子交换层析、凝胶过滤层析和高压液相能较理想地分离纯化雪旺细胞胞浆蛋白     

三步法纯化雪旺细胞源神经营养蛋白

目的探索三步法纯化及获得雪旺细胞源神经营养蛋白的方法，为获得纯化蛋白进行单克隆抗体研究奠定基础。方法收集预损伤大鼠坐骨神经２００条，用酶消化结合差速粘附法纯化并收集其中雪旺细胞，将细胞超声粉碎、离心，收集上清液超滤，再经ｓｅｐｈａｄｅｘＧ１００层析，得到两个主峰，分段收集，将其中活性部分过高效液相色谱柱。结果得到三个主峰，相对分子质量分别为６８×１０３、５４×１０３和３０×１０３，用ＭＴＴ法测定生物活性，５４×１０３蛋白生物活性最大，经ＳＤＳＰＡＧＥ电泳证实基本为单一蛋白带。结论应用三步法同时各步采用合适方案是纯化雪旺细胞源神经营养蛋白的较好方法。     

二甲氨基偶氮苯(DAB)诱发大白鼠肝癌过程中肝内分枝氨基酸转氨酶同工酶谱的变化

大鼠体内存在三种分枝氨基酸转氨酶(EC2.6.1.6)同工酶。同工酶Ⅰ和Ⅲ分布广泛,同工酶Ⅱ仅存在于肝脏,K_m值较高,底物特异性严格,只能催化亮氨酸与α-酮戊二酸之间的转氨反应,并且受体内糖皮质激素和高蛋白膳食的诱导。同工酶Ⅲ是分枝氨基酸转氨酶同工酶的胚胎分子形式存在于肾、脑、卵巢和胎盘组织中。文献报导,各种Yoshida腹水型肝癌、Morris肝癌、各种化学致癌剂和致癌病毒转化的肝细胞以及自发转化的细胞中都出现胚胎分子同工酶Ⅲ。近十余年来,大量的研究证明,癌瘤组织中基因表达发生紊乱,产生一些相应的正常分化组织所没有的、或含量极微的基因表达产物,同时正常分化组织所特有的一些功能蛋白则降低或消失。     

CaM对PHA促淋巴细胞分裂作用的影响

本文应用MTT微量自动定量比色法分析细胞的存活与增殖状况，观察钙调蛋白（Calmodulin,Cam）对PHA促小鼠脾淋巴细胞分裂作用的影响。结果发现，细胞经培养48h后，PHA加Cam的最大刺激组的光密度（OD）值比末加CAM的PHA组提高了46.8%（OD值分别为0.457和0.311），CAM的最大刺激浓度为30μg/ml。结果表明，CAM参与细胞增殖的调节作用，并能显著提高PHA的有丝分裂原活性的作用。     

许旺细胞源神经营养因子对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的 了解许旺细胞源神经营养因子对神经损伤所致脊髓前角运动神经元死亡的保护作用。方法 选用出生３周ＳＤ鼠切断坐骨神经,神经近侧行旺细胞源神经营养因子或生理盐水,４周后观察腰４－５节段脊髓前角运动神经元的存活率和一氧化氮合成酶表达情况。结果术后４周,营养因子组神经元的存活率是９３．４％,生理盐一是５９．６％,两组一氧化氮合酶表达均未见增加。结论 许旺细胞源神经营养因子对员的俏髓前角运动神经元有明显     

眼镜蛇毒因子的研究进展

目的：介绍眼镜蛇毒因子的性质,应用现状及发展前景,方法：参考国内外的文献,介绍眼镜蛇毒因子的理化性质,分子生物学特性,免疫学作用机制及其临床应用。结果与结论：眼镜毒因子的一种强效的补体抑制剂,具有突出的优点和特异的临床应用范围,有广阔的开发前景。