Clusterin在人精子膜表面的表达及其意义

目的 探讨clusterin在人类精子中的表达及其意义.方法 从精子表面用1%TritonX-100提取及氯仿/甲醇分离疏水性的膜表面蛋白,用免疫印迹法检测精子表面是否存在大然clusterin蛋白.用免疫荧光方法确定clusterin在人精子膜表面的分布特点.结果 人精子膜表面及精浆中含有大量的clusterin,且clusterin仅分布于精子头部及顶体区域,而阴性对照组没有发现天然clusterin的存在.结论 人精子头部及顶体表面分布大量的clusterin,可能与精子成熟及精卵结合有关.     

附睾蛋白酶抑制剂对前列腺特异性抗原活性的抑制作用

目的 观察附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)是否抑制前列腺特异性抗原(PSA)酶活性.方法 利用分子克隆技术体外构建、表达、纯化重组Eppin和PSA.利用PSA水解变色底物S-2586的颜色变化,于分光光度计下测定其吸光度值,代表PSA酶反应速度,反应体系是在缓冲液0.1 mol/LTris-HCl,pH8.3,1.0 mol/L NaCl中进行,观察不同浓度Eppin的加入对PSA酶反应速度的影响.结果通过体外重组技术获得较高纯度和生理活性的Eppin和PSA,通过PSA水解变色底物S-2586的检测,重组PSA具有酶活性,0.3 μmol/L PSA与底物S-2586反应的饱和曲线分析显示Km(反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度)值是0.5 μmol,底物饱和浓度0.2 mmol/L,分别加入4中不同浓度的重组Eppin 0、0.56、1.16、2.32 μmol/L,随着Eppin浓度的增加,PSA水解其变色底物S-2586速度明显减慢,PSA活性越来越受到抑制.结论 附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)是前列腺特异性抗原(PSA)一种新的特异性抑制剂.

Abstract：

Objective To investigate the inhibitory effects of the epididymal protease inhibitor (Eppin) on the activity of prostate specific antigen (PSA).Methods Recombinant Eppin and recombinant PSA were produced by molecular cloning technique in vitro.The enzymatical analysis of Eppin inhibiting PSA was done in the reaction buffer 0.1 mol/L Tris-HC1,pH 8.3,1.0 mol/L NaCl.The hydrolysis of velocity of PSA to the chromogenic substrate S-2586 was detected by spectrometer.Results Recombinant Eppin and PSA with high purity were produced by molecular cloning technique.The recombinant PSA had the enzymatical activity by hydrolyzing its substrate S-2586.0.3μmol/L PSA and the substate S-2586 reaction to the saturation curve analysis showed that Km( response rate of half the maximum reaction rate when the substrate concentration) value was 0.5μmol,and substrate saturated concentration was 0.2 mmol/L.With the increases of Eppin (0,0.56,1.16,2.32μmol/L),the hydrolysis velocity of PSA to S-2586 was slowed down.Conclusion Eppin,as a new inhibitor,specifically inhibits the activity of PSA.     

附睾蛋白酶抑制剂Eppin与精囊Fibronectin相互作用

Eppin(SPINLW1;基因号:57119)基因是定位于人类染色体20q12-13.2的单拷贝基因[1-2],仅在睾丸和附睾中表达.以重组Eppin制作的疫苗可造成猴子的不育,既往研究认为Eppin调控精液的凝固和液化过程,影响精子的获能和运动,其详细的机制尚不清楚.     

输尿管硬镜联合钬激光碎石治疗各类输尿管结石的临床研究

目的 探讨输尿管硬镜联合钬激光碎石对各种部位的输尿管结石的疗效.方法 回顾性收集江苏省镇江市第二人民医院2006年9月至2013年5月用WOLF牌F8/9.8硬镜联合钬激光治疗的1 000例输尿管结石患者（观察组）,并将其与江苏康复医疗集团泌尿外科2006年1月至2013年5月气压弹道处理800例输尿管结石碎石患者（对照组）进行对比研究.对两组患者的手术相关指标进行统计分析.结果 采用输尿管硬镜联合钬激光治疗的患者共1000例,气压弹道800例.平均年龄42岁（21～54岁）,结石部位包括下段、中段及上段,直径为1.6 cm（6 mm～5 cm）.对于中下段结石成功率大于90％,上段结石联合体外震波碎石（术前、术后）处理结石成功率大于90％,无一例转开放手术,两组数据进行比较,观察组的手术时间较对照组缩短平均10 min,无结石上移入肾盂例数,无开放手术例数,结石完全清除率为90.2％,术后住院天数较对照组平均缩短0.2 d,差异均具有统计学意义（P＜0.05）.结论 输尿管硬镜联合钬激光碎石比气压弹道碎石对各类输尿管结石均具有较好疗效,同时住院时间短,并发症少,值得临床推广应用.     

超微通道经皮肾镜与组合式输尿管软镜治疗上尿路结石比较性研究

目的:比较超微通道经皮肾镜及组合式输尿管软镜治疗上尿路结石的疗效及并发症。方法:将69例患者随机分为两组,其中32例患者行超微通道经皮肾镜取石术(超微经皮肾镜组),37例患者行组合式输尿管软镜碎石术(组合式输尿管软镜组),比较两组患者的术中手术时间、并发症、术后血红蛋白下降量、术后降钙素原水平、术后住院时间、结石清除率。结果:超微经皮肾镜组手术时间为(55.5±14.8)min,发生胸膜损伤3例(9.38%),肾周血肿1例(3.22%),无其他并发症,术后1、6、24、48h血红蛋白下降量分别为(11.3±6.0)g/L、(11.5±5.3)g/L、(13.8±5.9)g/L、(14.0±6.1)g/L,术后1、24、48h降钙素原检测分别为(1.01±0.25)ng/ml、(1.47±0.36)ng/ml、(0.91±0.23)ng/ml,术后住院时间为(5.0±1.5)d,术后第1天及术后1个月结石清除率为87.50%、96.88%;组合式输尿管软镜组手术时间为(72.5±31.2)min,肾周血肿2例(5.41%),无其他并发症,术后1、6、24、48h血红蛋白下降量分别为(3.5±2.2)g/L、(4.0±2.0)g/L、(4.4±1.9)g/L、(4.4±2.1)g/L,术后1、24、48h降钙素原检测分别为(0.60±0.11)ng/ml、(0.76±0.09)ng/ml、(0.50±0.12)ng/ml,术后住院时间为(4.3±1.1)d,术后第1天及术后1个月结石清除率为27.03%、70.27%。结论:2种术式手术时间、术中并发症、术后住院时间比较差异无统计学意义,超微通道经皮肾镜取石术出血及术后感染发生率高于组合式输尿管软镜碎石术,但是结石清除率方面超微经皮肾镜组优于组合式输尿管软镜组。     

微通道经皮肾镜与标准通道经皮肾镜碎石术术中肾盂内压力比较性研究

目的比较微通道经皮肾镜(MPCNL)与标准通道经皮肾镜(PCNL)术中的肾盂内压力(IPP)变化及术后并发症,研究其相关性。方法将20例患有肾结石且已经接受过体外冲击波碎石(ESWL)治疗后结石残留的患者随机分成两组,每组10例,由同一位主刀医师,分别施行微通道和标准通道经皮肾镜碎石术。测量两组研究对象穿刺开始前、碎石时、冲洗碎石时、手术完成时的肾盂内压力。并观察两组患者手术时间、术后住院时间、血红细胞比容下降、术后并发症等情况。结果PCNL组患者的手术时间以及住院时间明显延长(P=0.034、0.01)。MPCNL组患者术后血细胞比容下降幅度较低(P=0.004)。在不同的手术阶段,MPCNL术中的IPP均明显升高。PCNL组手术时间、术后住院时间、血红细胞比容下降高于微通道组(P<0.05),但两组患者的术后并发症差异并无统计学意义。结论在MPCNL术中IPP水平较标准PCNL明显升高,行MPCNL时需要对充分考虑术中灌注压力,但两者术后并发症等无明显差别。     

复方益肾解毒汤对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的机制研究

目的 探讨益肾解毒汤对大鼠急性肾缺血再灌注的保护作用及机制研究。方法 48只雄性大鼠随机分为4组:假手术组、肾缺血再灌注组（RIR组）、益肾解毒汤+肾缺血再灌注组（Drug+RIR组）、姜黄素+肾缺血再灌注组（Cur+RIR组）。术后24、96 h取大鼠目内眦采血,比较各组大鼠血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;取术后24 h大鼠肾脏组织,比较各组肾脏损伤评分;比较假手术组、RIR组和Drug+RIR组3组炎症因子NF-κB水平。结果 与假手术组比较,RIR组、Drug+RIR组和Cur+RIR组血清Scr、BUN、肾小管损伤评分均升高,Drug+RIR组高于Cur+RIR组,但均明显低于RIR组（P<0.05）;且比较术后96 h RIR组、Drug+RIR组2组血清Scr、BUN,Drug+RIR组肾功能指标恢复更快。结论 复方益肾解毒汤对大鼠肾脏缺血再灌注损伤有明显保护作用,其机制可能与NF-κB相关炎症因子的表达有关。      

微通道经皮肾镜与组合式输尿管软镜碎石术治疗肾结石比较性研究

目的 比较微通道经皮肾镜与组合式输尿管软镜碎石术两种方式治疗肾结石的疗效和并发症.方法 100例体外冲击波碎石无效的肾结石患者,分为两组,51例患者行微通道经皮肾镜碎石术,49例患者行组合式输尿管软镜碎石术,比较两组患者的手术时间、术中出血量、术后并发症、术后住院时间、术后清除率.结果 51例微通道经皮肾镜组手术时间(53.5±19.6)min,术中出血(75.0±18.5) mL,术后住院时间为(8.0±1.5)d;术后总并发症发生率80.4％:47例结石清除,总清石率为92.16％.49例输尿管软镜组手术时间为(49.0±25.6)min,术中出血(15.2±2.9) mL,术后住院时间为(4.5±0.6)d;术后总并发症发生率为30.6％;32例结石清除,总清石率为65.31％.两者比较手术时间无明显差别;术中出血量、术后住院时间、术后并发症发生率、总清石率微通道经皮肾镜组大于组合式输尿管软镜组;但分组分层发现在多部位、多发结石方面清石率组合式输尿管软镜组优于微通道经皮肾镜组.结论 微通道经皮肾镜在治疗结石负荷＜2 cm、下盏结石、单个结石优于组合式输尿管软镜,但在多部位、多发结石方面清石率组合式输尿管软镜优于微通道经皮肾镜.     

人精子表面Eppin蛋白分子网络的研究

Eppin(SPINLW1;基因号:57119)基因是定位于人类染色体20q12-13.2的单拷贝基因[1-2],属丝氨酸蛋白酶抑制剂家族中的成员,用125I标记的重组Eppin对新鲜的、有活动力的"上游"精子饱和性结合分析表明,精子表面可能存在Eppin的结合受体[3].