Cajal间质细胞在先天性巨结肠和巨结肠同源病结肠中的分布研究

目的研究先天性巨结肠（Hirschsprung’s disease，HD）和巨结肠同源病（allied Hirschsprung’s disease，AHD）肠壁内Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal，ICCs）的分布状态，探讨HD和AHD的发病机制。方法选择确诊为HD和AHD的患者各20例，取巨结肠根治术吻合口远端的全层肠壁作为实验组，另取16例正常结肠标本作为对照组。用鼠抗人c—kit单克隆抗体（CD117）标记ICCs，Image Pro-Plus图像分析系统检测ICCs。结果对照组中大量ICCs分布在肌间神经丛周围和环纵肌层内，ICCs包绕神经丛周围，肌层间ICCs连续分布；HD组远端肠管中肌层间和各肌层内ICCs明显减少甚至缺如，与对照组比较差异有统计学意义，P〈0．01；AHD组远端肠管中神经丛大小不一，ICCs分布差异大，大多数神经丛区ICCs减少，环肌层内ICCs明显减少，与AHD组和对照组比较差异有统计学意义，P〈0.01。HD组远端结肠中ICCs减少比AHD组显著，差异有统计学意义，P〈0．01。结论HD、AHD病变肠管中除了神经节细胞的异常外，同时存在ICCs异常；ICCs在HD和AHD的分布不同可能与两者临床症状差异有关；肠管中ICCs数量可能与临床症状及预后有一定关系。     

神经母细胞瘤细胞凋亡和BCl-2蛋白表达检测及其临床意义

目的 探讨细胞凋亡对Ｂｃｌ－２蛋白表达与神经母细胞瘤（ＮＢ）发生发展和预后的关系。方法 应用ＬＳＡＢ免疫组化及ＴＵＮＥＬ技术对１７例ＮＢ中Ｂｃｌ－２蛋白表达及细胞凋亡进行检测。结果 年龄〈１岁，１～Ⅱ及ⅣＳ期，Ｆ型ＮＢ凋亡指数（ＡＩ）显著高于年龄〉１岁，Ⅲ～Ⅳ期及ＵＦ型，ＡＩ与ＢＥＩ呈负相关，结论 ＢＥＩ与ＡＩ可作为判断ＮＢ生物学特性和预后的重要指标。     

神经母细胞瘤细胞周期素D1的表达检测

目的 探讨细胞周期素Ｄ１表达与神经母细胞瘤（ＮＢ）发生发展的关系及意义。方法 应用原位杂交技术对２０例ＮＢ标本检测。结果 １７例可检测到ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达，表达指数（ＣＥＩ）４．３％￣５５．３％。年龄〈１岁和神经节神经母细胞瘤标本中ＣＥＩ低于年龄〉１岁及ＮＢ，但无显著性差异。Ⅲ￣Ⅳ期、ＵＦ型及肿瘤广泛转移标本中ＣＥＩ显著高于Ｉ￣Ⅱ及ⅣＳ期、Ｆ型和肿瘤切除者。ＣＥＩ与ＭＫＩ呈正相关，与术后生存时     

小儿假性胰腺囊肿的诊断和治疗

目的探讨准确地诊断和治疗小儿假性胰腺囊肿.方法总结近10年来我们收治经B超、钡餐、CT和MRI以及手术证实的假性胰腺囊肿15例.结果发现15例中男11例,女4例,年龄最小1岁4个月,最大13岁,平均年龄9.4岁.而且7例有明显外伤史(7/15,占40%),恶心呕吐(14/15,占93%)、腹痛(11/15,占73%),腹部肿块(10/15,占66%)为主要临床表现,其次有发热、消瘦、贫血.此外,在诊断上除依靠病史、体检和临床表现外,B超是最适宜和有价值的诊断依据,钡餐、CT和MRI可以帮助诊断和鉴别诊断,还发现一旦血清淀粉酶下降后又重新回升,不但对确诊有重要意义,也是手术的重要指证.14例接受手术治疗患儿均恢复良好,无1例死亡.结论①小儿假性胰腺囊肿诊断除主要依靠病史、体征外,B超对小儿仍是有价值的辅助检查,诊断困难时可结合钡餐、CT和MRI加以鉴别.②小儿假性胰腺囊肿多与外伤有关,男＞女,因男孩好动、顽皮受伤机率多.③囊肿形成超过6周,或者B超显示囊肿壁形成明显时应选用内引流手术,较大囊肿仅外引流难以治愈.     

bcl-2基因调控作用与细胞凋亡在神经母细胞瘤发生发展中的作用

目的：探讨ｂｃｌ－２基因调控作用与细胞凋亡在神经母细胞瘤（ＮＢ）发生发展中的作用。方法：应用ＬＳＡＢ免疫组化及ＴＵＮＥＬ技术检测ＮＢ中ｂｃｌ－２蛋白表达和细胞凋亡。结果：１７例ＮＢ均有ｂｃｌ－２蛋白表达阳性细胞及凋亡细胞，表达指数（ＢＥＩ）９．８％～６１．８％，凋亡指数（ＡＩ）２０‰～１６７‰，二者呈负相关。年龄＜１岁、Ⅰ～Ⅱ及Ⅳ－Ｓ期、ＦＨ型ＮＢ的ＢＥＩ低于年龄≥１岁、Ⅲ～Ⅳ期及ＵＨ型，但差异无显著性意义。ＡＩ在不同分组间差异有显著性意义，且ＡＩ与术后生存时间呈正相关。结论：ｂｃｌ－２基因异常表达可能与神经母细胞或原始神经嵴细胞逃脱凋亡，不能正常成熟或消退，而发展成ＮＢ及ＮＢ的进展有关。ＡＩ高预后好。ＢＥＩ和ＡＩ的检测可为了解ＮＢ的发病机制和判断预后提供实验依据及手段。     

26例神经母细胞瘤p16抑癌基因检测

近年来研究证实，抑癌基因p16的缺失、突变、不表达或低表达所导致的细胞增殖周期失控是许多肿瘤发生发展的分子生物学基础，该方面的研究有助于了解神经母细胞瘤（NB）的发病机理。本文应用原位杂交技术对26例NB标本中pl6基因表达进行检测，冀图探讨p16基因表达在NB发生发展中     

后矢状位肛门直肠成形术后便秘原因初探

目的　研究无肛畸形胎鼠直肠盲端神经元细胞分布情况 ,探讨后矢状位肛门直肠成形术 (PSARP)后便秘发生原因。方法　选用 2～ 3个月龄 ,体重 2 5 0～ 30 0g健康Wistar大白鼠 12只 ,其中雌鼠 8只 ,雄鼠 4只。实验组雌鼠为 5只 ,对照组为 3只。雌雄交配后第 11d对实验组 5只雌鼠使用乙烯硫脲 (ethylenethiourea ,ETU)灌胃 (1%乙烯硫脲溶液 ,12 5mg/kg) ,对照组孕鼠在同一天使用等量蒸馏水灌胃。第 2 2d对两组孕鼠剖宫取胎 ,形态学研究取实验组及对照组各一只孕鼠 ,获实验组无肛胎鼠 6只 ,正常 5只 ,对照组胎鼠 10只。对胎鼠盆腔进行正中矢状切片 ,HE染色后在光镜下观察其形态。免疫组化研究将两组剩余孕鼠 (实验组 4只 ,对照组 2只 ) ,获胎鼠实验组无肛、正常和对照组各 2 7只、16只和 2 1只 ,取胎鼠直肠盲端 ,利用神经元特异性烯醇化酶 (neuronspecificenolaseNSE)和S 10 0蛋白标记肠壁内源性神经元细胞及胶质细胞 (SP)法 ,分别对肌间神经元、粘膜下神经元及胶质细胞进行计数并与对照组对比 ,进行统计学分析。结果　实验组无肛胎鼠盆腔正中矢状切面可显示直肠盲端的形态。直肠盲端与对照组直肠肌间神经元细胞数分别为 2 .0 9± 0 .5 0 ,2 .74±0 .5 1;直肠盲端与对照组直肠粘膜下神经元细胞数分别为 0 .72     

辣椒辣素对大鼠膀胱逼尿肌作用的实验研究

目的　探讨辣椒辣素 (capsaicin ,CAP)对大鼠膀胱功能的影响及其作用机制。 方法　将 2 5只Wistar大鼠分为 5组 ,分别用 0 .9mmol/L、1.8mmol/L、3.6mmol/L、7.2mmol/LCAP作用于大鼠膀胱 ,用生理盐水作对照。观察用药前后膀胱内压力变化、膀胱容量及残余尿量。另取大鼠膀胱三角区组织用PAP法进行免疫组化染色 ,观察P物质 (SP) ,根据免疫组化SP阳性神经纤维的密度和染色强度分为 4级 ,即可疑 (± )、轻度阳性 (+) 2～ 4个阳性纤维 ,染色差 ;中度阳性 (++) 5～ 6阳性纤维 ,染色较强 ;强阳性 (+++) 7～ 9阳性纤维 ,染色很强。结果　①低浓度组 0 .9mmol/LCAP组和 1.8mmol/LCAP组与对照组比较 ,其膀胱内压、膀胱容量和残余尿量均无显著性差异 ;SP分布也无明显差异 (P >0 .0 5 )。②高浓度组 (3.6mmol/LCAP组和 7.2mmol/LCAP组 )膀胱内压明显降低 ,残余尿量增加 (P <0 .0 1) ;③高浓度组膀胱组织内SP阳性神经纤维明显减少 ,染色明显减弱 (P<0 .0 1)。结论　高浓度辣椒辣素可抑制膀胱逼尿肌收缩 ,抑制排尿 ;另外高浓度CAP能耗竭膀胱内感觉神经末梢肽类介质SP。说明CAP通过消耗膀胱内的SP抑制感觉信号的传递 ,使逼尿肌不能正常收缩而抑制排尿     

小儿肝脏恶性肿瘤血管再生性特点的研究

目的：研究小儿原发性肝脏恶性肿瘤中血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）的特点。方法：采用SPTM免疫组化方法检查14例小儿原发性肝脏恶性肿瘤VEGF阳性表达以及MVD计数。病理分类：肝细胞癌7例，肝母细胞瘤5例，恶性间叶瘤和横纹肌肉瘤各1例。另选12例成年人肝癌手术切除标本作为对照。结果：小儿肝肿瘤组VEGF阳性表达面积显著高于成人肝癌组（P＜0．05）；尤其小儿肝癌组与成人组对比差异有极显著性意义（P＜0．01）。小儿肝肿瘤组的MVD也显著高于成人肝癌（P＜0．05）。小儿肝癌组患儿均在2年内死亡；非肝癌肝脏肿瘤预后较好，2例存活超过5年。结论：小儿肝脏恶性肿瘤存在有高度血管再生性的特点，肿瘤的生长快，预后差，以小儿肝癌最为突出。长期存活患儿的VEGF表达均为阴性。     

体外小儿骨髓间充质干细胞对牵张应力早期应答反应的研究

目的 观察体外小儿骨髓间充质干细胞(MSCs)对周期性牵张应力的早期应答反应.方法 分离并培养小儿MSCs,利用体外细胞牵张应力装置对第三～六代细胞加载短期力学信号,检测各组细胞内Oa2+以及早期反应基因蛋白(c-fos、c-jun和c-myc)的表达情况.结果 应力干预MSCs后,细胞内Ca3+浓度在受力1min后即增高,荧光强度是对照组的164.63%,3、5min升高更明显,干预10 min后Ca2+浓度升高的幅度有下降趋势;c-fos、c-jun和c-myc基因蛋白在未受力组细胞内不表达或微量表达,加载力学信号后,表达发生了明显的变化,随时间的延长,均表现为增强-持续-回复原来水平.结论 周期性牵张应力影响MSCs内Ca2+的浓度及早期反应基因蛋白(c-fos、c-jun和c-myc)的表达,推测c-fos、c-jun和c-myc参与了MSCs响应力学的信号传导途径,可能依赖Ca2+通道的活化来调控.