基质细胞衍生因子-1α和白细胞介素-1β诱导淋巴管内皮表型的作用

目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及白细胞介素-1β(IL-1β)诱导内皮细胞表达淋巴管表型的作用。方法 SDF-1α和IL-1β分别诱导内皮细胞株CRL-1730,用Real-time PCR、Western blotting及免疫细胞化学等方法检测其内皮及淋巴管标志物,的表达情况。结果 SDF-1α诱导培养之后,CRL-1730细胞株的内皮细胞标志物血管性血友病因子(vWF)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)2随其浓度增高而表达降低,淋巴管标志物平足蛋白(podoplanin)、同源异形盒蛋白-1(Prox-1)和淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)随其浓度增高而表达增高。IL-1β诱导之后,CRL-1730细胞株的vWF、VEGFR2和podoplanin、prox-1、LYVE-1的变化趋势同SDF-1α,而VE-cadherin的表达量基本不变。结论 SDF-1α和IL-1β都能够诱导血管内皮细胞表达淋巴管标志物。     

TNF-α增加骨髓间充质干细胞在缺血组织黏附的可行性探讨

目的 探讨TNF -α促进大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向局部损伤组织迁移的可行性. 方法 将MSCs用不同浓度的TNF -α刺激,检测其表面黏附分子、干细胞标志物的表达率及其与内皮细胞的黏附;制作大鼠自体血栓微粒,建立后肢缺血模型,选取一合适浓度的TNF -α刺激MSCs,移植到后肢缺血损伤的大鼠,计数损伤处MSCs的数目.结果 (1)TNF-α刺激24h后,MSCs的血管细胞黏附分子-1(VCAM -1)表达升高,且呈浓度依赖性,而细胞黏附分子-1 (ICAM -1)、L-选择素(L- Selectin)、细胞黏附分子缓慢抗原-4(VLA -4)的表达无明显变化;MSCs的标志物表达率没有明显改变;(2)10 ng/ml TNF -α刺激的MSCs与血管内皮细胞黏附能力明显增强;(3)10 ng/ml TNF -α刺激的MSCs移植到大鼠后肢缺血模型后,损伤侧肌组织内MSCs数目明显多于对照组. 结论 10 ng/ml TNF -α短期内能够有效提高MSCs的VCAM -1表达,促进MSCs与血管内皮细胞的黏附及向受损部位迁移,且不影响MSCs的特性.     

草决明中多糖提取工艺研究

目的：优化草决明中多糖的提取工艺并测定其含量。方法：以多糖的提取含量为评价指标，采用回流提取法，通过正交实验研究不同温度、提取次数、提取时间、料液比对多糖提取量的影响，并筛选出最佳提取条件。结果：提取温度90℃、料液比1：20、提取3次、提取3h为草决明中多糖的最佳提取条件，多糖的含量为15．22％，平均回收率为99、70％，RSD为2．34％。结论：本方法简便、迅速，草决明中多糖含量丰富，为草决明在临床用药的安全性和有效性提供科学依据。     

炎性环境下内皮微粒介导单核细胞促内皮细胞增殖的作用

目的 探讨炎性环境中内皮微粒(EMPs)在单核细胞参与的促内皮细胞增殖中的作用,并探讨EMPs对单核细胞表达内皮细胞标志物的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激内皮细胞,超速离心法获取EMPs;用透射电镜观察其形态和结构;运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测经EMPs激活的单核细胞株THP-1对血管内皮生长因子(VEGF)中VEGF-A、VEGF-C的表达情况;将HUVECs和THP-1细胞或者经EMPs诱导的THP-1细胞共培养,检测HUVECs的增殖情况;运用RT-PCR和免疫荧光细胞化学技术,观察经EMPs激活的THP-1细胞对内皮细胞标志物vWF和血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)的表达情况.结果 内皮细胞经炎性因子刺激后释放EMPs,EMPs刺激的THP-1细胞上清中VEGF-A和VEGF-C蛋白水平明显升高;HUVECs细胞增殖实验中,与THP-1细胞或者经EMPs诱导的THP-1共培养的两种情况下,HUVECs均显著增多;与EMPs共培养3d后,THP-1中vWF和VEGFR-2蛋白表达为阳性,基因表达为阴性,共培养8d后,vWF和VEGFR-2的蛋白和基因表达均为阴性.结论 炎性环境中内皮细胞释放EMPs可以促使单核细胞分泌VEGF-A和VEGF-C,后两者可使HUVECs增殖,EMPs仅能使单核细胞一过性呈现内皮表型,而不能将其转分化为内皮细胞.     

CCR7在结节性甲状腺肿与甲状腺癌中的表达及其与EMT关系的研究

目的 研究并探讨趋化因子受体-7(chemokine receptor 7,CCR7)在结节性甲状腺肿与甲状腺乳头状癌中与上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的关系.方法 采用免疫组化检测CCR7、N-cadherin与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)在50例结节性甲状腺肿与50例甲状腺乳头状癌中的表达,分析其与患者病理资料的关系.结果 CCR7、N-cadherin在结节性甲状腺肿的结节期滤泡上皮均呈高表达(分别为83.7％、90.7％),且为正相关(P＜0.01),而在胶质贮存期滤泡上皮(分别为2.0％,8.2％)与结节期纤维组织(分别为6.7％,31.1％)低表达.CCR7、N-cadherin与MMP9在甲状腺乳头状癌的淋巴结转移组的阳性表达率为87.1％,90.3％,96.8％,而无淋巴结转移组的阳性表达率为42.1％,57.9％,63.2％,差异有统计学意义(P ＜0.01);CCR7与N-cadherin、MMP9在甲状腺乳头状癌的表达呈正相关(P＜0.01).结论 CCR7在结节性甲状腺肿与甲状腺乳头状癌中均与EMT的指标具有相关性,CCR7可能参与调节滤泡上皮EMT发生.     

肾上腺性高血压的外科治疗

由肾上腺疾病引起的高血压称为肾上腺性高血压，是继发性高血压的重要组成部分。肾上腺性高血压有其特点，如发病年龄早，且大部分青中年人群发病时血压不稳定、波动幅度大、联用多种降压药物难以维持在正常水平等，此外部分患者合并低血钾、向心性肥胖等典型症状。肾上腺性高血压主要包括原发性醛固酮增多症、库欣综合征、儿茶酚胺增多症(如嗜铬细胞瘤/副神经节瘤)。与原发性高血压相比，肾上腺性高血压对人体损害更大，但大部分肾上腺性高血压经外科手术治疗后可好转或治愈。因此，强化高血压的病因筛查意识，增加肾上腺性高血压的检出率，通过微创手术解除病因，对我国高血压的防控有着重要的意义。     

肾上腺静脉取血在原发性醛固酮增多症诊疗中的应用

原发性醛固酮增多症(PA)是以醛固酮产生过多为特征的疾病，可导致高血压及心脏和肾脏靶器官损害，而不同亚型的PA临床治疗方法有很大差异。临床多采用肾上腺静脉取血(AVS)来区分醛固酮升高的病因，AVS也是目前分侧定位、区别不同亚型PA的金标准。对于AVS的应用范围、结果判读、是否采用促肾上腺皮质激素促进醛固酮分泌、醛固酮测定的准确性等问题，还有待更为统一的标准和共识。