UpIb启动子-Smac重组体促膀胱癌细胞凋亡的实验动物研究

目的：探讨携带Smac基因的膀胱癌细胞特异性表达质粒peDNA3．1-UpIb promoter-Smac用脂质体包裹后注射到实验动物瘤体内的表达及促癌细胞凋亡的效应。方法：将人膀胱癌细胞株BIU-87注射到Balb／e-nu／nu雄性裸鼠的皮下，构建膀胱癌皮下移植瘤模型：当移植瘤长至直径约0．5era时，用脂质体将pcDNA3．1-Uplbpromoter-Smac包裹后隔天1次连续3次注射到瘤体内，间隔1天后，连续3天瘤体内注射适量丝裂霉素C诱导凋亡。设三组对照：单用脂质体质粒组、单用丝裂霉素C组和空白组。RT-PCR检测瘤组织SvaaemRNA的表达，免疫组织化学法检测瘤组织Smac蛋白的表达，苏木素伊红染色镜检、DNALadder带凝胶电泳分析和TUNEL-荧光标记检测观察瘤组织癌细胞的凋亡情况。结果：膀眈癌裸鼠移植瘤模型构建成功。瘤体内注射脂质体包裹的pcDNA3．1-Uplbpromoterm Smac后．与未注射脂质体质粒的对照组比较，Smac的表达增强约2．1倍：先注射脂质体质粒后丝裂霉素C处理和单用丝裂霉素C处理的瘤组织均可见典型的凋亡细胞，但前者的凋亡率为49．8％，显著高于后者的23．5％（P〈0．01）。结论：膀胱癌裸鼠移植瘤模型瘤体内直接注射脂质体包裹的pcDNA3．1-Uplbpromoter-Smac后，所携带的Smac基因能够在癌组织中有效表达，并对丝裂霉素C诱手的瘤细胞凋亡有显著的促进作用。该质柱配合丝裂霉素C等凋亡诱导药物的应用，可望为膀胱癌的靶向基因治疗提供一新的治疗模式。     

胸腺素β4基因沉默对膀胱移行细胞癌上皮间质转化的逆转作用

目的 观察胸腺素β4(Tβ4)基因沉默对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)的逆转,探讨其在肿瘤侵袭转移中的作用机制.方法 使用针对Tβ4的慢病毒载体(knti-Tβ4)转染膀胱癌细胞株T24.采用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测Tβ4、整合素连接激酶(ILK)和上皮性标记基因E-cadherin、β-catenin的表达改变;Immunofluorescence法检测ILK、E-cadherin、β-catenin在转染后124细胞中的表达改变;细胞划痕实验、Boyden小室体外侵袭实验、AO/EB荧光染色法反映细胞转移潜能和凋亡的变化.结果 转染后48 h的T24细胞,Tp4、ILK、β-catenin mRNA或蛋白表达开始下降,以转染后96 h明显;而上皮标记基因E-cadherin在转染96h后,表达显著增加(P<0.05);Immunofluorescence显示ILK和β-catenin在细胞质、细胞核中表达减弱,而E-cadherin在胞膜中表达增强,细胞形态向正常上皮细胞转化;转染后的324细胞体外迁移能力与侵袭力下降[(10.4±1.2)%比(73.5±1.4)%],细胞凋亡增多(12.3%比36.6%).结论 肿瘤细胞中的Tβ4表达下调可以逆转肿瘤细胞的间质表型,而向正常上皮表型转化,降低肿瘤转移潜能.     

基于生物信息学分析转移性嗜铬细胞瘤的机制

目的通过生物信息学分析鉴定转移性嗜铬细胞瘤的关键基因及分析相关的生物学通路, 为临床诊断及治疗提供参考。方法从GEO数据库中下载51例样本(转移性嗜铬细胞瘤11例, 对照组40例)的RNA表达谱数据, 利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)分析识别与转移性嗜铬细胞瘤最为相关的模块。提取与转移性嗜铬细胞瘤密切相关的模块基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。接着, 以基因显著性(GS)>0.4;成员之间相关性(MM)>0.6为阈值对模块基因进行初步筛选。为了防止过拟合, Lasso回归算法对初步鉴定的基因进一步筛选。最后采用受试者工作特征(ROC)曲线计算数据集的曲线下面积(AUC)值。结果通过对数据集进行WGCNA分析, 共获得24个基因模块, 其中浅蓝色基因模块与转移性嗜铬细胞瘤相关性最高(r=0.65), 共包含218个基因。GO分析结果提示模块基因主要富集于细胞连接、细胞黏附分子等生物学功能;KEGG分析提示模块基因主要集中在"Wnt信号通路"等信号通路。对浅蓝色模块初步筛选, 得到候选关键基因77个。通过Lasso回归算法进一步分析...     

米非司酮配伍米索前列醇终止10～12周妊娠的临床效果观察

米非司酮配伍米索前列醇终止１０～１２周妊娠的临床效果观察慕成莉１张广意１王智宇２薛玲芳１米非司酮配伍米索前列醇早已广泛用于终止４９天以内妊娠，近年来也有用于妊娠中期及晚期引产的报道，但用于终止１０～１２周妊娠的报道尚未见。既往均用水囊钳刮术终止１０～...     

应用集中度与圆形分布法分析2012—2018年长沙市手足口病季节性特征

目的 探讨长沙市2012—2018年手足口病季节性特征,为制定手足口病防控措施提供科学依据。方法 对长沙市2012—2018年手足口病监测数据进行统计分析,采用集中度和圆形分布法分析其季节性特征。结果 2012—2018年长沙市共报告205 988例病例,年均报告发病率是389.91/10万。发病人群以<4岁儿童(83.34%)为主,以散居儿童(75.29%)和幼托儿童(21.71%)为主。发病集中度M=0.32具有一定的季节性;圆形分布r=0.31,α=175.82°(87.02°,264.62°)(Z=18 648.533,P<0.001),发病高峰日为6月27日,流行高峰期为3月29日—9月25日。结论 2012—2018年长沙市手足口病发病具有一定的季节性,应在该疾病流行期前和流行期间加强重点人群防控。     

磁共振水成像对输尿管肿瘤的诊断价值

目的:探讨磁共振水成像技术(MRU)在原发性输尿管肿瘤的诊断价值。方法:对27例原发性输尿管肿瘤的影像学资料并基于术中所见和病理报告,将MRU与超声?KUB IVU?逆行造影?CT的确诊率进行比较。结果:MRU能清晰显示输尿管的梗阻部位,定位诊断准确率100%,梗阻病因确诊率100%,优于B超、泌尿系造影?逆行造影和CT检查。结论:与其它影像诊断方法相比较,MRU在显示原发性输尿管肿瘤特征方面具有效率高、定位准确和安全无创等优点,而且有更广泛的临床应用范围。     

肾上腺偶发瘤的诊治分析

目的：提高肾上腺偶发瘤的诊断和治疗水平。方法：回顾性分析1998年1月～2006年7月收治的48例肾上腺偶发瘤患者的临床资料，并进行术后病理及随访结果分析。46例患者行手术治疗，其中开放手术15例，经腹腔镜治疗31例。结果：手术效果满意。术后病理检查诊断为肾上腺皮质腺瘤27例，肾上腺囊肿5例，肾上腺皮质癌2例，肾上腺髓性脂肪瘤3例，肾上腺嗜铬细胞瘤3例，原发性醛固酮瘤3例，腹膜后原发性淋巴瘤、皮质腺瘤伴灶状髓性脂肪瘤、转移癌各1例。影像学及实验室检查术前获正确诊断者32例（66．7％）。结论：所有肾上腺偶发瘤均应行内分泌功能检查。内分泌功能检查与CT或MRI联合应用对确诊肾上腺占位性病变有较高价值。对于确诊为恶性肿瘤、功能性肿瘤、转移性肿瘤及直径大于3cm的肿瘤，应积极采取手术治疗。腹腔镜手术创伤小，恢复快，为首选术式。对非功能性、直径小于3．0cm的肿瘤，可定期行生化和影像学检查。     

曲古菌素A对肾癌细胞增殖及对去乙酰化酶1、金属蛋白酶9表达的影响

目的 观察曲古菌素A(TSA)对肾癌细胞7860增殖抑制作用及对组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)表达的影响.方法 噻唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度(100、200、400、800nmol/L)、不同时间(12、24、36、48 h)TSA作用后7860细胞的抑制率.吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)双重染色检测细胞凋亡.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测HDAC1、MMP9的表达.结果 不同浓度TSA作用24h后,细胞生长抑制率分别为32%、45%、58%、62%.TSA作用后部分细胞发生凋亡形态改变.HDAC1、MMP9基因在TSA作用后mRNA表达降低(P<0.01).与空白组、阴性组比较,HDAC1蛋白在TSA作用后表达分别下调18.6%～87.5%(P<0.01)、21.3%～91.4%(P<0.01),MMP9蛋白表达分别下调24.6%～95.7%(P<0.01)、20.8%～89.2%(P<0.01).结论 TSA可抑制肾癌细胞增殖,并可能通过下调HDAC1、MMP9的表达抑制细胞的增殖.