RNA干扰Axin2对大鼠骨髓基质干细胞的成骨分化及Wnt信号途径相关因子mRNA表达的影响

我们利用已建立的大鼠BMSCs体外培养模型,在诱导其成骨分化同时对Axin2进行RNA干扰(RNAi),从而探讨Axin2基因沉默对骨髓基质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化过程以及Wnt信号途径的影响.     

RNA干扰Axin2对大鼠骨髓基质干细胞的成骨分化表达的影响

目的 通过对大鼠Axin2基因的RNA干扰(RNAi),探讨Axin2对大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化过程的影响.方法 取6周龄雌性SD大鼠双侧股、胫骨骨髓细胞,采用全骨髓培养法进行原代和传代培养.细胞传2代后实验组进行Axin2 mRNA干扰质粒转染,对照组进行阴性干扰质粒转染.转染48 h后换用成骨诱导分化培养基.诱导分化28 d后用 von Kossa方法进行细胞外基质矿化染色.采用适时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)技术检测诱导分化后第7、14天β-catenin、骨钙素(OCN)、frizzled-2、Lef-1、Wnt5a mRNA的表达水平.结果 对照组大鼠BMSCs经体外诱导后分化为具备矿化细胞外基质能力的成熟成骨细胞,而实验组BMSCs成骨分化不全;RQ-PCR检测显示,诱导分化后第7天实验组β-catenin、frizzled-2 mRNA表达水平显著低于对照组,而OCN、Lef-1、Wnt5a mRNA表达水平显著高于对照组;诱导分化后第14天实验组frizzled-2、Lef-1和Wnt5a mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05).结论 对大鼠BMSCs Axin2进行RNAi后,BMSCs向成骨细胞分化晚期细胞外基质矿化能力减弱.     

辛伐他汀对幼鼠骨发育及骨髓基质干细胞成骨分化的影响

背景：辛伐他汀作为常用降脂类药物,表现出一定的促成骨分化和骨形成作用,但目前的研究结果尚有争论,尤其对幼鼠骨发育的影响并无报道。 目的：课题创新性设计观察辛伐他汀对幼鼠骨小梁骨形成相关因子表达以及骨髓基质干细胞成骨分化的影响。 方法：1周龄雄性SD大鼠20只,随机分为实验组和对照组,每组10只。实验组皮下注射辛伐他汀[5 mg/(kg•d)]2周,对照组给与安慰剂2周。采用免疫组织化学方法检测胫骨上端骨小梁成骨相关因子骨形态发生蛋白2、基质金属蛋白酶13、血管内皮生长因子等因子的表达情况;取双侧股骨骨髓基质干细胞向成骨方向诱导培养。培养14 d分别进行碱性磷酸酶染色,21 d采用Real-time PCR法检测骨形态发生蛋白2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5等成骨过程中相关因子mRNA的表达,28 d进行von Kossa染色。 结果与结论：①实验组和对照组胫骨上端骨小梁骨形态发生蛋白2、基质金属蛋白酶13、血管内皮生长因子等因子的表达差异无显著性意义。②两组碱性磷酸酶染色阳性细胞(胞浆蓝黑色)比例均在30%左右,差异无显著性意义(P > 0.05)。③骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化过程中相关因子骨形态发生蛋白2、RUNX2、Osterix、DLX3、DLX5、MSX2 mRNA表达水平差异无显著性意义。④von Kossa 染色可见大小不等染为棕黑色的钙化点,其大小和密度两组比较差异无显著性意义。结果表明,皮下注射辛伐他汀[5 mg/(kg•d)]2周不能显著影响幼鼠骨小梁骨形成相关因子表达以及骨髓基质干细胞成骨分化。     

辛伐他汀对幼鼠骨发育及骨髓基质干细胞成骨分化的影响

背景:辛伐他汀作为常用降脂类药物,表现出一定的促成骨分化和骨形成作用,但目前的研究结果尚有争论,尤其对幼鼠骨发育的影响并无报道.目的:课题创新性设计观察辛伐他汀对幼鼠骨小梁骨形成相关因子表达以及骨髓基质干细胞成骨分化的影响.方法:1周龄雄性SD大鼠20只,随机分为实验组和对照组,每组10只.实验组皮下注射辛伐他汀[5 mg/(kg·d)]2周,对照组给与安慰剂2周.采用免疫组织化学方法检测胫骨上端骨小梁成骨相关因子骨形态发生蛋白2、基质金属蛋白酶13、血管内皮生长因子等因子的表达情况;取双侧股骨骨髓基质干细胞向成骨方向诱导培养.培养14 d分别进行碱性磷酸酶染色,21 d采用Real-time PCR法检测骨形态发生蛋白2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5等成骨过程中相关因子mRNA的表达,28 d进行von Kossa染色.结果与结论:①实验组和对照组胫骨上端骨小梁骨形态发生蛋白2、基质金属蛋白酶13、血管内皮生长因子等因子的表达差异无显著性意义.②两组碱性磷酸酶染色阳性细胞(胞浆蓝黑色)比例均在30％左右,差异无显著性意义(P＞0．05).③骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化过程中相关因子骨形态发生蛋白2、RUNX2、Osterix、DLX3、DLX5、MSX2 mRNA表达水平差异无显著性意义.④von Kossa染色可见大小不等染为棕黑色的钙化点,其大小和密度两组比较差异无显著性意义.结果表明,皮下注射辛伐他汀[5 mg/(kg·d)]2周不能显著影响幼鼠骨小梁骨形成相关因子表达以及骨髓基质干细胞成骨分化.     

中西医结合治疗NDM-1细菌感染1例

2010年8月以来,国际上陆续报道印度、巴基斯坦、英国等地发现产Ⅰ型新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi Metallo-β-lactamase 1,NDM-1)泛耐药肠杆菌科细菌(NDM-1细菌),俗称“超级细菌”,引起全社会广泛关注。10月28日我院证实1例NDM-1阳性患者,此患者病情复杂,经中西医结合治疗后目前病情尚稳定,现报告如下。     

中西医结合治疗超级细菌感染1例

通过中西医结合治疗超级细菌感染1例,说明抗生素的滥用对微生物进行了定向选择,从而导致疗效不佳;祖国医学虽然无"超级细菌感染"一说,但其辨证论治遵伤寒、温病之法,处方简,疗程短,疗效捷,费用低,体现了祖国医学治疗该病的独特性.     

伊班膦酸钠与椎体成形术治疗胸腰椎转移瘤疼痛疗效对比

目的：对比伊班膦酸钠与椎体成形术治疗脊柱转移瘤疼痛效果。方法脊椎转移瘤患者62例随机分为伊班膦酸钠（A 组）和经皮椎体成形术（B 组）,每组31例,分别给予伊班膦酸钠静脉给药及经皮椎体成形术不同治疗方案,以视觉模拟评分（Visual analogue scale,VAS）判定疗效标准,分别记录治疗前、治疗后48 h、1个月、3个月时间点 VAS 评分,治疗前及治疗后2周体力状况（以 ECOG 功能分级评估）。进行统计学分析。结果2组治疗前 VAS 评分差异无统计学意义（ P ＞0．05）。 B 组 VAS 评分于治疗后48 h 及1个月时间点较 A 组明显降低,差异有统计学意义（ P ＜0．05）,但治疗后3个月差异无统计学意义（ P ＞0．05）。 B 组在治疗后2周较治疗前 ECOG 分级明显改善（ P ＜0．05）,而 A 组在治疗后2周 ECOG 分级较治疗前比较,差异无统计学意义（ P ＞0．05）。结论伊班膦酸钠和经皮椎体成形术都是治疗脊柱转移瘤疼痛的有效治疗方法,患者满足手术条件可考虑行经皮椎体成形术,能早期加强脊柱稳定性,不能满足手术条件的患者应积极给予以伊班膦酸钠为代表的二膦酸盐类药物治疗。     

辛伐他汀对人骨髓基质干细胞向成骨细胞分化过程的影响

目的：观察辛伐他汀（SIM）对体外人骨髓基质干细胞（hBMSCs）向成骨分化的影响,探讨其刺激成骨的作用机制.方法：取健康成人骨髓进行体外成骨诱导培养,实验分为对照组（G1）：不给予药物干预;实验组（G2）：传代后加入SIM1×10-7mol/L.于传代后7,14,21d采用RealtimeRT-PCR检测mRNA水平和BMP-2,Smad1,β-catenin,Frizzled2的表达,并用免疫组织化学检测蛋白水平β-catenin的表达.传代后7d行细胞碱性磷酸酶（ALP）染色和比活性检测;传代后21d行vonKossa染色,检测细胞外基质矿化.结果：SIM作用后7,14,21d3个不同时间点,BMP-2表达均显著高于对照组;Smad1在成骨诱导14,21d时表达高于G1,其余组间差异均不显著;β-catenin免疫组织化学染色2组差异不显著;G2组ALP表达和矿化能力均显著高于G1组.结论：SIM1×10^-7mol/L可促进体外成骨诱导培养的hBMSCs向成骨细胞分化,上调TGF-β/BMPs信号通路部分信号分子表达,但未能显著改变Wnt/β-catenin信号通路部分相关因子的表达.     

中医护理发展现状研究与分析

目的系统评价国内中医护理文献,了解近年来中医护理发展现状。方法计算机检索中国生物医学文献数据库,纳入中医护理相关文献。提取文献涉及疾病种类,文献研究类型,文献发表年限,作者研究方向,作者单位,中医一般护理及传统护理方法临床应用状况。分析现有中医护理相关文献,评价中医护理发展现状。结果纳入研究文献共1 275篇;中医护理涉及疾病种类广泛,涵盖了国际疾病分类编码所有大的疾病分类;文献研究类型主要以临床经验和临床对照试验为主;在临床工作中,以联合运用多种中医护理方法居多;文献发表量逐年增加,作者单位以医疗机构为主,研究方向以中医临床护理居多。结论中医护理虽已有一定发展基础,但无论从科学研究还是传统护理技术临床应用方面,都有待进一步发展。     

CyclinD1及CDK4在软骨肉瘤诊断中的应用

目的 观察CyclinD1及CDK4蛋白在软骨肉瘤中的阳性表达状态,探讨CyclinD1及CDK4蛋白在软骨肉瘤发生发展中的机制.方法 以SP法检测肿瘤组织中CyclinD1及CDK4蛋白表达的情况.结果 软骨肉瘤组织中CyclinD1、CDK4同时高表达,两者呈正相关关系(P<0$.05).结论 CyclinD1及CDK4蛋白均呈高表达,在软骨肉瘤的发生发展中起互相协同,使肿瘤细胞的生长优势增强,对肿瘤的发生发展中发挥重要作用.