螺内酯对肝硬变门脉血流动力学的实验和临床研究

目的探索螺内酯对门脉高压实验犬和肝硬变患者门脉血流动力学的作用．方法用直接门脉插管测压和９９ｍＴｃＭＩＢＩ心肝放射性摄取比值（Ｈ／Ｌ）测定慢性胆总管结扎肝硬变犬（ｎ＝１６）门静脉压力和门体分流，口服螺内酯２０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）．肝硬变患者１４例测定Ｈ／Ｌ，门静脉内径和流速后口服螺内酯８０ｍｇ／ｄ，４ｗｋ为１疗程．结果完成试验的犬１３只治疗前后门脉压力（ｋＰａ）从２５９±０５１下降为２４２±０４７（Ｐ＜００５），Ｈ／Ｌ从０３３±００６降至０３０±００８（Ｐ＜００５）．１４例肝硬变患者治疗前后Ｈ／Ｌ值从１２０±０２６降为１０２±０３４（Ｐ＜００５），门脉内径（ｍｍ）从１３９±２３缩小为１２３±２０（Ｐ＜００５）．门静脉流速明显增加．结论螺内酯口服可降低门脉压力和门体分流．     

川芎嗪对中波紫外线辐射后细胞光产物影响及其光保护作用机制的研究

目的观察中波紫外线(UVB)辐射后永生化角质形成细胞株(HaCaT细胞)中光产物环丁烷嘧啶二聚体(CPDs)的产生和清除情况,观察川芎嗪对UVB辐射后细胞光产物的影响并探讨其保护作用机制。方法采用30mJ/cm2UVB照射培养的HaCaT细胞,加入川芎嗪干预处理,采用免疫组织化学法检测CPDs,以RT-PCR法和Western blotting法检测各受试组中p53和增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA和蛋白的表达水平。结果UVB辐射后HaCaT细胞中CPDs生成,0.5h达高峰,辐射后4h内清除速率较快,4h后清除速率较慢直至辐射24h。川芎嗪处理UVB辐射的细胞中CPDs少于单纯照射组(P<0.05)。川芎嗪可下调p53(34.9%)和PCNA(30.9%)的mRNA表达,还可下调p53(23.1%)和PCNA(24.9%)的蛋白表达。结论HaCaT细胞对UVB照射所致光产物CPDs的清除存在快速期及慢速期;川芎嗪可降低光产物CPDs水平。川芎嗪的光保护作用可能与其下调修复相关调控分子p53和PCNA基因及蛋白表达有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯下调紫外线诱导小鼠皮肤TNF-α mRNA及p53蛋白水平的研究

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对中波紫外线(UVB)慢性辐射诱导BALB/c小鼠皮肤TNF-αmRNA表达及p53蛋白表达水平的影响。方法EGCG局部外用于小鼠背部及耳部皮肤后给予不同强度的UVB辐射,每日1次,连续1个月,RT-PCR法检测不同处理条件下小鼠背部皮肤组织中TNF-αmRNA的表达水平,免疫组化法检测耳部皮肤组织中p53蛋白表达水平。结果经β-actin内参校正后,RT-PCR示不同剂量UVB慢性辐射后小鼠皮肤中TNF-αmRNA表达水平较对照组升高,但表达水平与UVB辐射强度间无明确的剂量依赖关系。UVB慢性辐射诱导小鼠皮肤p53蛋白表达,且表达水平与UVB辐射强度间呈剂量依赖关系。EGCG处理后可下调UVB辐射诱导的TNF-αmRNA水平及p53蛋白表达。结论UVB辐射能诱导小鼠皮肤TNF-αmRNA及p53蛋白表达,EGCG可干预UVB辐射诱导的上述作用。     

羟氯喹及中药对紫外线损伤角质形成细胞保护作用的实验研究

目的 :研究羟氯喹及某些中药活性成分对紫外线损伤角质形成细胞保护作用的影响及作用环节。方法 :采用 30、6 0、90mJ cm2 剂量的UVB照射培养的永生的角质形成细胞HaCaT ,以羟氯喹及没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)、黄芩、川芎进行干预处理 ,观察其保护性能及作用环节。以普通光学显微镜对照观察细胞受损程度 ,记录 72h内细胞生长曲线 ,以MTT法检测细胞活性 ,以酶联免疫吸附实验检测IL 6和TNF α的分泌量。结果 :HaCaT细胞经UVB照射后 ,受试角质形成细胞的损伤程度与紫外线照射剂量呈正相关 ,细胞计数与活性下降 39%～ 80 % ,在照射后72h损伤程度超过 80 %。药物处理后细胞活性可恢复10 %～ 72 %。经比较表明 ,羟氯喹具有一定的光保护作用(OD值为 [0 4 3± 0 0 4 ]至 [0 96± 0 0 4 ],P <0 0 5 )。EGCG具有较强的光保护效应 (OD值为 [1 19± 0 0 7]至 [1 2 8±0 0 6 ],P <0 0 1) ,空白组为 ([0 2 6± 0 0 4 ]～ [0 79± 0 0 2 ])。此外 ,EGCG可抑制角质形成细胞释放IL 6和TNF 等细胞因子 ;羟氯喹及黄芩只能抑制IL 6的释放 ,对TNF α无明显抑制作用 ;而川芎则未见有明显抑制角质形成细胞释放IL 6和TNF α等细胞因子的能力。结论 :UVB对皮肤细胞的损伤作用具有剂量递增性 ;羟氯喹及茶多酚 (EGC     

5-单硝酸异山梨醇酯对肝硬化食管静脉曲张患者食管动力学的影响

食管静脉曲张破裂出血是肝硬化门静脉高压最严重的并发症之一，也是肝硬化患者死亡的主要原因。血管扩张剂5-单硝酸异山梨醇酯（ISMN）能确切降低门静脉压力，其作用机制是产生一氧化氮舒张门静脉血管平滑肌，降低血管压力，但可能同时引起食管平滑肌舒张，使食管下段括约肌压力下降，蠕动清除功能减弱，反流性食管炎加重。本研究报道ISMN对肝硬化食管静脉曲张食管动力学和酸反流指标的影响。     

急性重症胰腺炎患者食管内镜下表现和动力学研究

急性重症胰腺炎患者常伴有多器官功能损害。由于患者血中多种细胞因子如内毒素、肿瘤坏死因子(TNF)、一氧化氮(NO)等升高，可减弱食管下括约肌收缩和食管清除功能，引起食管反流和炎症。本研究用液体灌注测压法和内镜检查评价重症急性胰腺炎患者的食管动力学和炎症改变。     

人参皂苷Rb1对UVB诱导原代角质形成细胞光损伤的影响

目的:观察人参皂苷Rb1对中波紫外线诱导的人原代角质形成细胞光损伤的影响,探讨其可能的作用机制.方法:通过细胞培养法,加入不同浓度人参皂苷Rb1(5、20、50μg/m1)预处理细胞,以中波紫外线辐射剂量30mJ/cm2诱导细胞DNA损伤,MTT法观察细胞活力的变化,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡,免疫细胞化学染色观察细胞DNA损伤环丁烷嘧啶二聚体.结果:人参皂苷Rb1对未辐射中波紫外线的角质形成细胞的活力无明显影响,但可显著增强紫外线辐射后细胞的活力,减少核浓缩、核小体的形成及细胞凋亡的发生,加速环丁烷嘧啶二聚体的清除.结论:人参皂苷Rb1可能通过加速DNA损伤的清除,抑制紫外线诱导的角质形成细胞凋亡的发生.     

中波紫外线照射对表皮朗格汉斯细胞p53蛋白磷酸化表达的影响

目的：研究皮肤朗格汉斯（Langerhans）细胞（LC）在不同剂量中波紫外线（UVB）照射前、后p53蛋白磷酸化水平的差异。方法：联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化LC，将LC分为实验组和对照组，实验组分别接受30、60和90mJ／cm^2 UVB辐射，辐射后4h提取总蛋白，采用Western—blotting法检测各组细胞中p53蛋白及磷酸化p53蛋白的表达量，并比较两者之间的差异。结果：接受UVB辐射后，皮肤LC中p53蛋白表达基本无变化，而p53蛋白磷酸化水平显著升高，差异具有统计学意义，并呈剂量依赖性。结论：UVB辐射可刺激p53蛋白磷酸化，并呈剂量依赖性，进而诱导p53蛋白活化，发挥其下游功能。     

微囊肿性附属器癌一例

微囊肿性附属器癌（microcystic adnexal carcinoma,MAC）又称为硬化性汗腺导管癌（sclerosing sweat duct carcinoma）,属于汗腺癌的一个亚型。MAC是一种以局部侵袭性生长为主,并向汗腺导管方向分化的罕见低度恶性肿瘤,生长缓慢,临床罕见,本文报道一例。     

绿茶提取物及羟氯喹对表皮细胞光保护生物学效应的研究

目的观察羟氯喹及没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)对中波紫外线(UVB)照射引起的人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞增殖活性变化及凋亡的影响。方法采用剂量分别为0、30、60、90mJ/cm~2的UVB照射培养的HaCaT细胞并加入羟氯喹及EGCG,共孵育24h后以四甲基偶氮唑蓝还原法(MTT)检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率变化。结果UVB照射后HaCaT细胞出现增殖活性下降,其幅度与辐射强度成正比;加入羟氯喹及EGCG可使细胞活性有一定程度恢复;此外,UVB照射可诱导HaCaT细胞产生凋亡,凋亡率呈UVB剂量依赖方式增加;30mJ/cm~2UVB照射可使HaCaT细胞出现明显S期阻滞,随UVB剂量增大,S期细胞数量相对下降;加入药物处理可抑制上述改变。结论羟氯喹和EGCG可明显抑制UVB引起的HaCaT细胞增殖活性下降、凋亡与细胞周期阻滞。