癌细胞多药抗药性研究进展

抗药性是癌症化疗成功的主要障碍之一,随着化疗的广泛应用,癌细胞的抗药问题逐渐引起了人们的重视。癌细胞抗药类型较多.最常见的是多药抗药(Multidrug Resistance,MDR),即癌细胞一旦对一种药物产生抗性,对其它结构和作用机制不同的药物亦产生交叉抗药性。近年来,随着分子生物学和基因工程的发展,有关癌细胞MDR的研究取得了重大进展,本文就此作一简述。     

核酸酶BAL31剪切基因片段技术

本文根据作者工作经验介绍了核酸酶BAL31剪切基因片段技术,并对有关问题进行了讨论。该技术可用于基因表达调控等基因工程研究。     

流式细胞术检测供体猪α-1,3-Gal和人源CD46的表达

目的检测基因修饰猪细胞表面α-1,3-半乳糖(α-Gal)抗原敲除情况和人源蛋白CD46(hCD46)的表达情况,为异种器官移植提供可靠的供体。方法采集500μl野生型(wild type,WT)、α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)、hCD46和GTKO/hCD46巴马小型猪血液,分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)。异硫氰酸荧光素标记的植物凝集素(FITC-GSIB4)与PBMC共孵育后采用流式细胞术检测α-Gal抗原敲除情况,异硫氰酸荧光素标记的hCD46膜辅蛋白抗体(antiCD46-FITC)与PBMC共孵育后采用流式细胞术检测h CD46蛋白表达情况。结果 GTKO和GTKO/hCD46巴马猪PBMC表面α-Gal检测呈阴性,WT和hCD46巴马猪检测呈阳性,与测序结果一致;hCD46和GTKO/hCD46巴马猪PBMC表面hCD46蛋白检测呈阳性,WT和GTKO巴马猪检测呈阴性,与PCR鉴定结果一致。结论建立了微量血液流式细胞术直观检测供体猪α-Gal抗原和人源CD46蛋白表达的方法。     

测定血清中单克隆抗体R6.5抗细胞间粘附分子-1结合活性的竞争ELISA法

建立了一种定量测定血清中鼠 IgG_(2a)单克隆抗体 R6.5免疫活性的竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)法,此种单抗通过结合而抑制人细胞间粘附分子-1(ICAM-1)与 CD18糖蛋白复合物以及鼻病毒的相互作用。本方法     

限制性内切酶图谱分析分型单纯疱疹病毒的简便快速方法

单纯疱疹病毒(HSV)是人类的重要致病性病毒,分为HSV—Ⅰ和HSV—Ⅱ两个血清型。HSV型别的鉴定对HSV感染的临床诊断和流行病学调查具有十分重要的意义。利用HSV DNA限制性内切酶圈谱分型HSV是近年来发展的一种分子生物学鉴定方法。本文对文献报道的内切酶图谱鉴定HSV型别的方法进行了改进,现报告如下。