用酵母载体pPIC9k重组构建表达sCR1

目的采用酵母细胞分泌型载体pPIC9k表达人可溶性补体受体(sCR1),研究重组人sCR1融合蛋白的体外生物学活性。方法从人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR获得人sCR1全长cDNA,然后将其克隆入毕赤酵母细胞分泌型表达载体pPIC9k中,构建含人sCR1的重组质粒(pPIC9k-sCR1),经测序鉴定正确,电转化入毕赤酵母细胞SMD1168中,将经G418抗性筛选出的重组sCR1酵母细胞株进行PCR鉴定,经甲醇诱导,表达产物经SDS-PAGE分析和Western Blot鉴定,通过Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化后进行生物学活性鉴定。结果获得毕赤酵母细胞分泌型表达载体pPIC9k-sCR1,经G418筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母细胞株,经甲醇诱导含pPIC9k-sCR1的酵母SMD1168细胞表达出重组sCR1融合蛋白。此蛋白在SDS-PAGE上表现为Mr约31000的蛋白区带,在Western Blot分析中可被sCR1的CD35单克隆单抗体(mAb)识别。经Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化后得到较纯的sCR1融合蛋白及较高的生物学活性。结论人sCR1融合蛋白在酵母细胞表达系统中的高水平表达,并且有与人体天然蛋白相同的抗原性及其生物学活性。     

HIF-1α和RelA基因在急进高原正常人外周血单个核细胞中的表达及其与急性高原反应的关联性

目的：观察急进高原前后正常人单个核细胞中缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和核转录因子NF
-κB p65亚基（RelA）表达水平的变化,探讨HIF-1α和RelA在急性高原
反应（AMS）发生中的作用及机制。方法：对某部赴玉树抗震的士兵分别于进入高原前和进入高原后
48 h采集外周血,提取单个核细胞中的mRNA和蛋白,采用RT-PCR方法检测RelA和HIF-1α mRNA表达水平,Western blotting法检测HIF-1α蛋白表达水平。Spearman相关分析法
分析RelA和HIF-1α基因表达与AMS发生的相关性。结果：与急进高原前比较,进入高原后H
IF-1α和RelA mRNA及HIF-1α蛋白表达水平均显著增高（P<0.01）; HIF-1α mRNA和RelA
mRNA表达呈正相关关系（r= 0.806,P<0.01）;HIF-1α蛋白表达与AMS的发生率
呈正相关关系（r= 0.875,P<0.01）; HIF-1α和 RelA表达不同性别之间比较差异无统计
学意义（P>0.05）。结论：HIF-1α蛋白表达水平可作为预测和干预AMS的监测指标。
急进高原后HIF-1α和RelA mRNA表达水平显著增加且呈显著正相关关系,提示在其信号传导通路之间存在
cross-talk现象。     

基于省级监测平台的陕西省药品短缺现状研究

目的：调查陕西省药品短缺现状,分析短缺原因,为保障药品供应提供参考。方法：依托陕西省药品短缺监测平台,收集2016年5月至2017年4月期间短缺药品的通用名、剂型、规格、价格等信息,通过描述性统计方法分析药品短缺现状和特征,探索药品短缺原因。结果：共收集药品短缺信息187条,登记短缺药品109种,平均每种药品短缺频次为1.72次。化学药品、中成药和生物制剂均出现不同程度的短缺,化学药品中抗肿瘤药短缺最为严重。对短缺药品的特征进行统计,发现大部分为生产厂家较少和采购价格较低,基本药物和注射剂更容易出现短缺。结论：陕西省药品短缺形势不容乐观,短缺药品品种多,覆盖疾病种类广,具体短缺原因尚不明确。建议完善药品短缺监测平台;加强对制药企业的日常监管;安排专人指导制药企业进行整改;定点生产常见易短缺药品。     

云南小狭口蛙促胰岛素释放肽的分离纯化与结构鉴定

通过葡聚糖Sephadex G-50凝胶过滤和反相高效液相析(RP-HPLC)等手段,对云南小狭口蛙(Callueslla yunnanensis Boulenger)皮肤分泌液进行分离纯化,得到了有促胰岛素释放活性的多肽分离峰.运用质谱仪测定该促胰岛素释放肽的相对分子质量为1 768.08,一级结构鉴定测得其氨基酸基...     

胸腹腔镜联合食管癌切除食管胃左颈部吻合术视频要点

1技术背景介绍食管癌是我国高发的消化道恶性肿瘤,目前食管癌的治疗仍然以手术方式为主,化疗、放疗等方法为辅[1]。食管癌手术切除术式经过多年的演变,从开放左胸一切口、二切口,发展到开放右侧进胸二切口、三切口。随着高清晰度胸腔镜、高科技内镜手术器械和先进麻醉技术的应用,微创食管切除手术技术得到迅猛的发展并趋于成熟。胸腔镜手术具有创伤小、恢复快等优势,已经在胸外科手术中得到了充分肯定[2-3]。本视频旨在展示胸腹腔镜联合食管癌手术的手术入路和操作要点。     

我国乙型脑炎病毒优势基因型转换及其风险和对策

乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的人畜共患病,在自然界中主要是通过蚊虫叮咬进行传播,能够引起人的中枢神经系统损伤和猪的繁殖障碍等疾病,对公共卫生安全造成了严重威胁。 由于乙型脑炎病毒在水禽宿主中的适应性差异,导致了病毒优势基因型由 GⅢ型逐渐向 GⅠ型转变。 乙型脑炎病毒优势基因型的转换和流行范围的扩大给疾病防控带来了新挑战,本文对我国乙型脑炎病毒优势基因型转换及其风险和对策进行了综述。     

职业性急性重度化学物中毒性呼吸系统疾病死亡病例1例

对1例职业性急性重度化学物中毒性呼吸系统疾病的死亡病例进行总结分析。在接诊此职业病诊断病例后,通过对患者的尸检司法鉴定报告、临床检查资料,并多次组织诊断医师到其工作场所进行现场职业卫生、流行病学调查、病例讨论会诊后,最终诊断病例为职业性急性化学物中毒性呼吸系统疾病——肺泡性肺水肿（混合型化学物硫酸为主）。当地职业病诊断鉴定委员会组织鉴定后结果为职业性急性重度化学物中毒性呼吸系统疾病。本病例提示用人单位应加强、重视劳动者在职业活动过程中对职业病危害的防护,急性化学物中毒性肺水肿的病例应该密切观察,在潜伏期及时救治。     

健康教育在噪声作业工人职业健康检查中的应用

目的观察健康教育在噪声作业工人职业健康检查中的应用效果。方法选取2016年4月-2017年3月江门市职业病防治所进行职业健康检查的106例噪声作业工人按检查顺序分为观察组和对照组各53例。对照组以告知检查相关事项为主,观察组在对照组的基础上给予健康教育。比较两组噪声防护知识知晓情况、漏检率及检查者对护理工作的满意度。结果观察组噪声防护知识知晓优良率明显高于对照组;观察组漏检率明显低于对照组;观察组服务态度、检查讲解、咨询服务、问题解释评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论健康教育能有效促进噪声作业工人对噪声损伤听力的防护知识的认识,从而降低漏检率,并提升职业健康检查护理工作的质量。     

脂肪乳对两种凝血检测系统检测结果的影响比较

<正>随着检验医学的快速发展,新仪器和新方法不断出现,对临床检验结果的准确性和可靠性要求也越来越高。近年来,随着人口老龄化和多发病谱的改变,心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)的发病率也不断提高。CVD成为人类的主要病死原因之一,其发病率和病死率不断上升。血小板又是动脉粥样硬化患者血栓形成的生理病理机制中的主要环节,同时,多项血栓病诊断试验用于临床血栓和出血性疾病的研究,人们对凝血过程及血栓形成的本质有了更