大鼠小肠移植物热缺血时限的研究

随着小肠移植手术技术的不断完善和排斥反应的逐步控制、小肠移植物的供需矛盾日益突出。扩大供体来源、解决移植物的供需矛盾是移植领域的新课题，于是对无心跳供体来源移植物的研究成为国内外关注的热点，尤其在我国无心跳供体是临床器官移植中移植物获取的主要途径。在无心跳供体来源移植物获取过程中存在着热缺血过程，热缺血时限的确定将对临床器官移植中移植物的获取时限提供参考。     

基于医院主体责任的医疗技术临床应用管理政策浅析

目的:通过梳理2000年以来关于医疗技术临床应用管理的各项政策和政策演变,结合现阶段医疗机构技术管理的问题和关键点,提出医院加强技术管理的应对措施和要求.方法:通过对医院管理人员和医务人员进行问卷调查、政策分析等方法,了解政策导向和医疗机构管理现状.结果:技术管理政策主要分为两类,政策性文件和具体专项技术规范.2009年和2018年,国家卫健委先后印发《医疗技术临床应用管理办法》,2009版管理办法首次在国家层面提出对医疗技术进行分类分级管理,2018版和2009版的主要变化是技术管理由准入制变化为备案制,并建立起负面清单管理制度,进一步明确了技术管理的医疗机构主体责任.专项技术管理规范从国家层面上对于技术开展的条件(如人员、设备、资质等)提出严格要求.结论:作为医疗机构要适应医院主体责任的政策导向,按照《医疗机构依法执业自查管理办法》做好技术管理工作的严格自查,通过加强组织建设、制度建设、过程监管和技术评估,严格落实动态管理制度和规范化培训制度,确保医疗技术开展和推广的安全性、有效性,最终让病人受益,保证人民健康.     

大鼠小肠移植物热缺血再灌注损伤研究

目的：探讨大鼠小肠移植物热缺血再灌注损伤后肠黏膜损伤、修复与再生的规律及其参与因素。方法：建立近交系大鼠异位小肠移植热缺血再灌注损伤模型，按热缺血时间0、15、30、60、120min分为5组。分别于移植术后取外周血，测定一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）的含量；同期对移植肠标本行常规组织学检查；并观察受体大鼠及移植物的生存率。结果：各组移植物及受鼠7d生存率为100％（6／6）。术后第7天，各热缺血组小肠黏膜组织学评分趋于一致，与非热缺血组之间的差异有统计学意义（P〈0．01）。术后第1天ET-1／NO与小肠黏膜组织学评分具有相关性。结论：大鼠小肠移植物在无心跳供体中可以耐受120min的热缺血；热缺血时间对移植术后小肠黏膜修复与再生无明显影响；移植术后早期外周血NO／ET-1失衡可能参与热缺血再灌注损伤。     

不同消化道重建方式对胃癌合并2型糖尿病患者血糖的影响

目的:探讨胃癌手术不同消化道重建方式对合并2型糖尿病患者血糖变化的影响.方法:分析2006--2008年行根治性手术治疗的55例胃癌合并2型糖尿病患者术前及术后的血糖变化,按重建方式不同分为3组,包括行远端胃大部切除Billroth Ⅰ式吻合术11例,远端胃大部切除BillrothⅡ式吻合术25例,全胃切除食管空肠Boux-en-Y吻合术19例.比较3种术式患者术前、术后2周及半年空腹血糖和餐后2 h血糖水平.结果:Billroth Ⅱ式吻合、Roux-en-Y吻合2组患者术后2周及术后半年的血糖水半与术前相比出现持续而稳定的下降,且均较Billroth Ⅰ式吻合术组下降明显(P<0.05). Billroth Ⅱ式吻合组、Roux-en-Y吻合组术后半年血糖控制有效率分别为72.00%和73.68%,差异无统计学意义,但均高于Billroth Ⅰ式吻合组的27.27%.结论:Billroth Ⅱ吻合和Roux-en-Y吻合术对于合并2型糖尿病的胃癌患者具有一定的血糖控制作用.     

靶向慢病毒载体RNA干扰小鼠血管内皮细胞异种抗原的研究

目的 使用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)方法抑制小鼠血管内皮细胞异种抗原半乳糖α1,3-半乳糖(Galα1,3-Gal)的表达.方法 经体外设计合成针对α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-GT)mRNA的序列特异性小发夹RNA(shRNA),并构建携带α1,3-GT shRNA的重组慢病毒载体,以慢病毒感染小鼠血管瘤内皮细胞系EOMA细胞.采用荧光实时定量聚合酶链反应检测转染后的EOMA细胞α1,3-GT mRNA表达水平的变化;免疫荧光法和流式细胞术检测转染后的EOMA细胞异种抗原Galα1,3-Gal表达水平的变化.并将转染后的EOMA细胞与人血清混合培养,用四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞存活率.结果 成功获得携带α1,3-GT shRNA的成熟重组慢病毒颗粒,转染EOMA细胞效率可达75%.与空白对照组、空转染组以及阴性siRNA对照组比较,重组慢病毒转染EOMA细胞后,能有效抑制α1,3-GT的表达,抑制率为88%(P＜0.05);Galα1,3-Gal抗原表达水平明显降低(P＜0.05);而空白对照组、空转染组和阴性siRNA对照组间的差异无统计学意义(P＞0.05).重组慢病毒转染后的EOMA细胞与人血清混合培养后的存活率较各对照组明显提高(P＜0.05).结论 成功构建靶向α1,3-GT基因的重组慢病毒载体,通过RNAi沉默α1,3-GT基因,抑制EOMA细胞异种抗原Galα1,3-Gal的表达,在体外实验中可减轻异种超急性排斥反应.     

急性胆源性胰腺炎的外科治疗

目的：探讨急性胆源性胰腺炎（ABP）的外科治疗方法。方法：回顾性分析165例ABP病例的临床资料。将首次住院期间接受手术治疗病例设为手术组,出院3月以后再入院行胆道手术者设为对照组,比较手术组/对照组的平均总住院时间（D）,12月内复发数,死亡病例数,术后并发症发生情况。结果：手术组与对照组相比,死亡率无统计学意义,平均总住院时间相比差异有统计学意义（t=18.582,P〈0.05）,12月内复发率相比差异有统计学意义（χ2=4.714,P〈0.05）,术后出现并发症率相比差异亦有统计学意义（χ2=9.731,P〈0.05）。结论：ABP的外科治疗应遵循个体化治疗原则,选择合适的手术时机在治疗过程中起关键作用。     

复方儿茶酊治疗小面积化学性烧伤临床分析

近年来,我们使用复方儿茶酊早期处理１４４例小面积化学性灼伤创面,取得了较为满意的疗效。现临床分析如下：１临床资料１．１种类酸类６５例（硫酸、硝酸、盐酸、氯乙酸、氢氟酸）,碱类２６例（氢氧化钠、氨水、硫化碱、乙二胺）,黄磷３１例,苯酚８例,沥青８例,其他６例（三氯化磷、三氯乙醛、三聚磷酸钠、１０８树脂、酚醛）。１．２一般资料男１０９例,女３５例。年龄：＜３０岁９２例,３０～５０岁４８例,＞５０岁４例。面积：＜５％９６例．５％～１０％３７例,＞１０％１１例。部位：颈面部４４例,四肢８５例,躯干１３例…     

不同miR-146a表达条件下Treg细胞体内回输对小鼠心脏移植免疫排斥反应的影响

目的:本研究探讨调控miR-146a Treg细胞体内回输对小鼠心脏移植免疫排斥反应的影响。方法:流式分选Treg细胞并进行体外扩增。转染试剂分别上调和下调Treg miR-146a表达。建立小鼠心脏移植模型,设立对照组,空白Treg组,miR-146a上调组,miR-146a下调组。移植后回输Treg,观察生存曲线,病理分级,测定受体脾T细胞亚群,RT-PCR检测供心IFN-γ、IL-4、IL-17表达。结果:细胞扩增10倍后miR-146a表达无明显变化,并能有效调控miR-146a表达。回输后空白Treg组（中位生存期11 d）及上调组（中位生存期13 d）生存时间延长,病理分级降低（P<0.05）;上调组更为明显（P<0.05）;下调组（中位生存期7 d）生存时间缩短,病理分级升高（P<0.05）,Th1细胞数量（28.6%±2.7%）及供心IFN-γ表达（1.12±0.11）升高（P<0.05）。结论:体外能有效地分选和扩增Treg细胞,并保证miR-146a的表达。回输Treg明显抑制小鼠心脏移植急性排斥反应,上调组抑制功能增强,下调组抑制功能减弱。     

MiR-148a-3p通过靶向SRPK2抑制结肠癌细胞转移

目的:MicroRNA (miRNA/miR)参与结肠癌各种生物学过程。目前,miR-148a-3p在结肠癌中的作用还不完全清楚。本研究旨在探讨miR-148a-3p对结肠癌细胞转移及侵袭能力的影响及机制。方法:实时定量PCR （qRT-PCR）检测结肠癌细胞系中miR-148a-3p及SRPK2 mRNA的表达,Western blot检测SRPK2 蛋白的表达。使用miR-148a-3p mimic, miR-148a-3p inhibitor调节HCT-116及SW480细胞中miR-148a-3p的水平。通过划痕及transwell实验检测miR-148a-3p对结肠癌细胞迁移及侵袭能力的影响。生物信息学分析预测miR-148a-3p的靶点,荧光素酶报告实验验证。Western blot及qRT-PCR检测miR-148a-3p对结肠癌细胞上皮-间质转化及SRPK2表达的影响。结果:与正常结直肠粘膜细胞FHC相比,结肠癌细胞系中miR-148a-3p水平降低（P<0.05）。结肠癌细胞中miR-148a-3p过表达可以明显抑制结肠癌细胞转移及侵袭能力（P<0.05）。相反的,敲低miR-148a-3p结肠癌细胞转移及侵袭能力增强（P<0.05）。荧光素酶报告系统结果提示SRPK2是miR-148a-3p的直接作用靶点。过表达miR-148a-3p可以抑制SRPK2在结肠癌中的表达（P<0.05）,但是敲低miR-148a-3p时SRPK2表达明显增高（P<0.05）。结论:MiR-148a-3p可能通过靶向SRPK2抑制结肠癌细胞的转移及侵袭能力。MiR-148a-3p可能成为诊断和治疗结肠癌的靶点之一。