干扰SET8调节血管平滑肌细胞增殖、凋亡促进血管钙化

背景与目的血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡在许多血管钙化疾病的病理过程中起关键作用。近期研究表明,赖氨酸甲基转移酶SET8参与调节细胞增殖、凋亡过程。文章旨在探寻SET8是否通过调节VSMC增殖、凋亡而影响血管钙化。方法体外培养原代大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组、空质粒组和SET8-shRNA组。以脂质体Lipofectamine~(TM)2000为载体,转染VSMC。采用茜素红染色法和钙含量测定法判断细胞钙化程度;采用MTT法检测三组细胞的增殖能力;实时荧光定量PCR、Western blot法检测三组细胞中增殖基因Survivin和凋亡基因Caspase-3的表达水平,分析干扰SET8对VSMC增殖、凋亡及其相关基因和蛋白表达的影响。结果 (1)干扰SET8可成功抑制VSMC中SET8蛋白的表达(P0.05)。(2)转染VSMC后,与正常对照组和空质粒组比较,SET8-shRNA组钙含量明显升高(P0.05)。(3)MTT结果显示,在第12 h、24 h、36 h、48 h,SET8-shRNA组VSMC的增殖能力较正常对照组和空质粒组明显降低(P0.05)。(4)实时荧光定量PCR和Western blot结果显示SET8-shRNA组Survivin的mRNA和蛋白表达较正常对照组和空质粒组明显下降,而Caspase-3的mRNA和蛋白表达则相反(P0.05)。结论干扰SET8能够增加促凋亡基因表达,抑制增殖基因表达,SET8有可能参与调节大鼠血管钙化。     

抗肿瘤药物相关肾损害患者的临床病理特点分析

背景 肿瘤治疗措施导致的肾损害日益多见,而该领域关于相应患者肾脏病理的研究较少。 目的 分析抗肿瘤药物相关肾损害患者的临床及肾脏病理特点。 方法 选取2013年10月至2021年8月在河北医科大学第四医院肾内科住院并行肾穿刺活检的≥18岁患者112例,肾损害出现时间位于发现肿瘤后或者与肿瘤同一时间出现,肾损害与恶性肿瘤或者肿瘤相关治疗存在直接或间接关系;既往应用化疗、分子靶向药物或免疫检查点抑制剂等全身治疗的患者纳入抗肿瘤药物组（65例）,其余患者纳入未用抗肿瘤药物组（47例）。收集患者的一般资料、实验室检查和病理资料。分析抗肿瘤药物相关肾损害患者的临床及肾脏病理特点。 结果 抗肿瘤药物组中59例实体瘤患者发生急性肾损伤（AKI）30例（50.8%）,6例血液系统肿瘤患者发生AKI 4例（4/6）。未用抗肿瘤药物组35例实体瘤患者中发生AKI 11例（31.4%）,12例血液系统肿瘤患者发生AKI 6例（50.0%）。抗肿瘤药物组治疗前血肌酐低于治疗后（P<0.001）。抗肿瘤药物组性别、吸烟比例、血清白蛋白、尿蛋白阳性率与未用抗肿瘤药物组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;两组年龄、血红蛋白、血肌酐、尿素氮、尿酸、D-二聚体、糖尿病比例、高血压比例、总胆固醇、三酰甘油、尿蛋白定量、AKI发生率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。抗肿瘤药物组实体瘤患者肾脏病理表现为肾小管间质损伤的比例高于未用抗肿瘤药物组（P=0.023）,而膜性肾病的比例较未用抗肿瘤药物组低（P=0.004）。抗肿瘤药物组最主要的病理表现为肾小管间质损伤34例（52.3%）,未用抗肿瘤药物组最主要的病理表现为膜性肾病18例（38.3%）、肾小管间质损伤18例（38.3%）。 结论 抗肿瘤药物相关肾损害患者的临床及病理存在多种类型,抗肿瘤药物可能会导致肾功能的损害,应用期间应警惕肾小管间质损伤。     

UMOD 基因启动子区单核苷酸多态性与 CKD 患者发病年龄的关系

目的：探讨UMOD基因启动子区多态性与慢性肾脏病患者发病年龄的关系。方法选取89例CKD患者作为病例组,选择与病例组年龄、性别相匹配的体检健康者104例作为对照组。采用PCR法检测两组UMOD基因启动子区进行扩增并测序,分析其多态性与CKD患者发病年龄的关系;分析性别、吸烟史、体重指数（ BMI）、平均动脉压等与CKD患者发病年龄的关系。结果病例组－1617（ rs13333226） G等位基因的频率高于对照组（χ^2＝4．737,P＝0．030）;携带rs13333226A者发病年龄早于携带rs13333228G患者（χ^2＝7．902,P＝0．005）。单因素分析结果显示,BMI≥22的CKD患者发病年龄＜45岁者的比例高于BMI ＜22者,吸烟者发病年龄＜45岁者的比例高于非吸烟者（P均＜0．05）。多因素分析示UMOD基因rs13333226的多态性是CKD患者发病年龄的独立影响因素（OR＝0．494,95％CI：0．268-0．913,P＜0．05）。结论 CKD患者UMOD基因rs13333226等位基因的频率增高,携带rs13333226 A的CKD患者发病年龄较小。 UMOD基因rs13333226的多态性是CKD患者发病年龄的独立影响因素。     

BMP信号通路在华法林诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化中的作用

目的探讨骨形态发生蛋白(BMP)信号通路在华法林诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化中的作用。方法体外分离培养大鼠胸主动脉VSMC,将其随机分为正常对照组、高磷组、华法林(10μmol/L)干预组及华法林(10μmol/L)+维生素K(10μmol/L)干预组。对细胞进行钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性检测,茜素红染色检测钙结节,Western blot检测细胞中Runx2蛋白的表达变化,RT-PCR检测细胞中骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Smad1及Runx2的表达变化。结果茜素红染色结果显示,与正常对照组和高磷组相比,华法林干预组钙化结节明显增多;钙含量测定结果与茜素红染色结果基本一致。与正常对照组和高磷组相比,华法林干预组ALP活性明显增加(P0.05),Runx2 mRNA和蛋白表达水平及BMP-2、Smad1 mRNA表达明显增高(P0.05);与华法林干预组相比,华法林+维生素K干预组细胞钙含量、ALP活性及BMP-2、Smad1、Runx2的表达均明显降低(P0.05)。结论BMP信号通路参与了华法林促进的大鼠VSMC钙化,其可能的作用机制是介导了VSMC的表型转化。     

EphrinA1-Fc对人肾透明细胞癌786-O细胞EphA2和ERK表达影响的研究

  目的  探讨EphrinA1-Fc对人肾透明细胞癌786-O细胞系促红细胞生成素产生肝细胞受体A2（EphA2）和细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）磷酸化程度的影响。  方法  应用可溶性配体EphrinA1-Fc干预人肾透明细胞癌786-O细胞系,采用Wsternblot方法分析不同时间点细胞内EphA2和ERK1/2的磷酸化程度。  结果  EphrinA1-Fc干预5、10、30、60 min后,p-EphA2、p-ERK的相对表达量逐渐增加（F=9.392,P=0.025;F=4.428,P=0.041）,p-EphA2、p- ERK在EphrinA1-Fc干预前均未见表达。  结论  EphrinA1-Fc抑制肿瘤转移复发的可能机制之一是其促使肾透明细胞癌786-O细胞EphA2磷酸化而导致其降解实现。      

维持性血液透析患者全血Runx2甲基化水平与血管钙化的关系

目的 探讨Runx2甲基化水平与维持性血液透析(MHD)患者血管钙化的关系。方法 选取在河北医科大学第四医院行MHD的患者58例为研究对象,收集患者的临床资料,根据冠状动脉钙化(CAC)评分结果将患者分为无钙化组、轻中度钙化组、重度钙化组。应用Methprimer进行Runx2甲基化引物设计,采用甲基化特异性PCR检测患者的全血Runx2甲基化水平,Spearman相关性分析探究其与血管钙化的关系。受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估Runx2甲基化水平对MHD患者血管钙化的诊断价值。结果 差异性检验发现三组间全血Runx2甲基化水平差异有统计学意义,且随着血管钙化程度的增加,Runx2甲基化的表达水平降低。Spearman相关性分析显示Runx2甲基化水平与血管钙化呈负相关(r＝－0.51,P＜0.01),年龄、血磷与血管钙化呈正相关(P＜0.05)。ROC曲线分析显示,Runx2甲基化水平诊断血管钙化的ROC曲线下面积(AUC)为0.761(P＜0.001),Runx2甲基化水平与年龄、血磷三者联合诊断血管钙化的AUC及灵敏度均显著提高(P＜0.05)。结论 全血Runx2甲基化水平可能成为诊断MHD患者血管钙化的生物标志物,且与年龄、血磷联合评估时AUC及灵敏度均显著提高。     

慢性肾脏病大鼠血管收缩张力与血管钙化的关系

目的通过检测慢性肾脏病(CKD)大鼠血管收缩张力,探讨其与血管钙化的关系。方法 30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组、慢性肾脏病组(CKD组)及慢性肾脏病血管钙化组(CKD+VC组),第4周留取血清学及血管标本,采用离体血管环灌流方法测定胸主动脉张力,硝酸银染色(Von Kossa染色)、钙含量测定和EVG染色检测血管钙化和弹性纤维变化情况,电镜观察平滑肌细胞(VSMCs)的超微结构。结果①CKD+VC组的血管收缩张力与正常对照组比较,最大值(Emax)下降(P=0.001),半数有效浓度(EC50)差异无统计学意义(P>0.05);与CKD组相比,Emax与EC50均无统计学意义(P>0.05)。②光镜结果显示,CKD+VC组可见弹性纤维严重断裂和钙盐沉积,CKD组可见弹力纤维排列紊乱、变细,未见钙盐沉积;电镜结果显示,模型组均可见凋亡VSMCs。结论 VSMCs凋亡和弹性纤维断裂共同参与CKD大鼠胸主动脉张力的下降,而血管钙化对张力的变化无影响。     

维持性血液透析患者血清ADMA水平影响因素分析

目的 分析影响维持性血液透析(MHD)患者血清非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平的因素.方法 选择行MHD的终末期肾脏病(ESRD)患者126例,记录年龄、性别、吸烟、糖尿病、透析龄、透前收缩压、舒张压.采用高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)测定血清ADMA浓度.提取全血DNA,用Snapshot基因测序法确定DDAH-2(-449G/C)单核苷酸基因多态性.将血清ADMA水平与各变量之间进行统计分析.结果 DDAH-2(-449G/C)基因型GG、CG、CC患者血清ADMA浓度差异无统计学意义(P＞0.05);血压升高、长透析龄、透前收缩压升高、胆固醇升高患者的ADMA水平较高(P均＜0.05).经多元线性回归分析,透析龄、透前收缩压及血清总胆固醇水平是影响血清ADMA水平的独立危险因素.结论 透析龄、透前收缩压及血清总胆固醇水平是影响行MHD患者血清ADMA水平的独立危险因素.DDAH-2(-449G/C)单核苷酸基因的多态性可能对中国行MHD患者的ADMA水平无影响作用.     

BioZ.com无创血流动力学监测系统指导终末期肾脏病维持性血液透析患者调整超滤量价值研究

目的 探讨BioZ.com无创血流动力学监测系统指导血液透析超滤量设定对终末期肾脏病患者维持血流动力学稳定的临床意义。方法 选取2014年2-7月于河北医科大学第四医院血液净化中心行维持性血液透析治疗的终末期肾脏病患者41例,采用随机数字表法将患者分为对照组（21例）和试验组（20例）。按照BioZ.com无创血流动力学监测系统操作说明监测血流动力学,试验组根据胸腔液体量（TFC）实时调整超滤量,对照组仅以临床常规调整超滤量。记录两组患者透析前后TFC及血流动力学参数,并记录透析过程中心悸、低血压、肌肉痉挛等透析相关不良事件的发生情况。结果 透析前,两组血流动力学参数比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。透析结束时,实验组心输出量（CO）、每搏输出量（SV）、左心室做功（LCW）、左心室做功指数（LCWI）高于对照组,平均动脉压（MAP）低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组透析前后TFC分别为40.4（8.4）、32.7（8.7）/Ω,试验组透析前后TFC分别为40.2（11.3）、32.4（4.2）/Ω。两组透析前后TFC变化比较,差异无统计学意义（Z=-0.692,P＞0.05）。对照组发生透析相关不良事件5例（23.8%）,其中心悸1例,低血压4例;试验组未发生透析相关不良事件。试验组透析相关不良事件发生率低于对照组,差异有统计学意义（P=0.048）。结论 采用BioZ.com无创血流动力学监测系统指导透析患者超滤量的设定并进行实时调整,可维持患者血流动力学稳定,改善心功能,减少透析相关不良事件的发生。     

赖氨酸甲基转移酶SET8结构和功能及其与肿瘤关系的研究进展

SET8（又称SETD8、PR-SET7、KMT5a）是现今发现唯一能够特异性单甲基化H4K20的赖氨酸甲基转移酶。SET8及其催化形成的H4K20me1共同参与了细胞周期调控、染色质结构及基因转录的调节。近年来研究发现SET8在多种肿瘤组织中高表达,参与调控体内细胞的细胞周期、增殖及凋亡等过程,涉及肿瘤的发生、生长、转移等多个环节,有望成为肿瘤治疗的新靶点。本文主要从SET8的结构、功能及其在肿瘤发生中的作用等方面综述了SET8的研究进展。