肿瘤生物治疗的新策略——基因-病毒治疗

尽管数十年来 ,对肿瘤的早期诊断与早期治疗取得了一定进展 ,但对极大多数晚期肿瘤仍缺乏有效治疗手段 ,常规治疗治愈率低 ,复发率及病死率高、预后差。因此 ,从 2 0世纪 80年代初提出肿瘤的基因治疗方案到 90年代初进入临床试验 ,人们对肿瘤的基因治疗寄以很高的期望。截至 2 0 0 0年 1 2月 ,已有 2 70多个肿瘤基因治疗方案进入临床试验。经过近 1 0年的临床研究 ,结果表明 :肿瘤的基因治疗方案是非常安全的 ,但其抗肿瘤效应也非常低 ,甚至无任何治疗作用。尽管原因是多方面的 ,但最主要的原因是目前基因治疗的载体系统在体内存在着转染率…     

基因-病毒治疗系统CNHK200-hA的构建及体外初步研究

目的　构建一种结合抗肿瘤新生血管生成的基因治疗与病毒治疗优势的新型肿瘤基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA。方法　克隆人抗血管生成基因Angiostatin(k1 5 ) ,命名为hA。利用病毒重组技术将hA插入肿瘤特异性增殖病毒的病毒基因组中 ,通过病毒增殖试验、电镜技术、Westernblot分析、鸡胚尿囊膜试验 (CAM ) ,观察CNHK2 0 0 hA的复制情况、hA基因的表达及其对新生血管生成的抑制作用。结果　构建了一种新型的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA。该治疗系统为E1b 5 5× 10 3 蛋白缺失而保留了腺病毒E1a蛋白的 5型腺病毒 ,能在肿瘤细胞内大量增殖及复制 ,而在正常细胞内增殖能力较弱 ,从而特异性杀灭肿瘤细胞。同时CNHK 2 0 0 hA携带人抗肿瘤新生血管生成基因hA ,能在肿瘤细胞内高效表达hA蛋白 ,其表达量高于传统基因治疗的腺病毒载体系统。电镜证实该治疗系统可在肺癌A5 49细胞株中复制及增殖。CAM试验证实该治疗系统感染肺癌细胞后的培养液上清具有抗新生血管生成的生物活性。结论　基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA能在肿瘤细胞中增殖复制 ,并明显提高hA基因的表达量 ,表达产物具有抑制新生血管形成的作用。     

香港大学医学院近10年鼻咽癌研究

引言玛丽医院在鼻咽癌研究和治疗方面具有悠久的历史传统，这并非出于偶然。鼻咽癌是广东、广西一种常见的癌症，也是香港地区男性第三位最常见的癌症’“。放射疗法是鼻咽癌主要的治疗方法，玛丽医院是香港首家对癌症采取放射治疗的医院。玛丽医院是香港大学医学院的教学医院，具有良好的多学科协作研究条件。Diyby在4O年代很详细地描述了鼻咽癌的临床特征［’j，何鸿超在6O年代开始并且领导鼻咽癌的流行病学、病因学和治疗方面的研究〔3，4I本文综述了玛丽医院近IO年鼻咽癌的多学科研究，这些研究不仅从多方面对鼻咽癌进行了阐述，而且…     

携带mIL-12基因的增殖腺病毒在鼻咽癌细胞中增殖及mIL-12高效表达

目的联合选择性增殖腺病毒溶肿瘤细胞和小鼠白细胞介素12(mouse interleukin-12, mIL12)免疫治疗的作用,提高对肿瘤细胞的杀伤作用。方法用携带mIL12的选择性增殖腺病毒CNHK200-mIL12转染鼻咽癌细胞株CNE3和915,测定其在鼻咽癌细胞株中的增殖能力和mIL12的表达水平。结果CNHK200-mIL12转染鼻咽癌细胞后,免疫组化染色显示大部分细胞腺病毒六联体蛋白(hexon)阳性,用流式细胞仪检测,转染24 h 后CNE3和915细胞的阳性率分别比0 h增高39%和4%,转染72 h后,病毒增殖超过1 000倍,增殖能力同dl1520相似,并能高水平表达mIL12,在1×104个CNE3和915细胞中分别达到(84.5±4.6)和(75.6±3.4)ng/105空斑形成单位(plaque forming unit, PFU)。结论携带mIL12 的CNHK200在p53缺陷的鼻咽癌细胞中增殖,并且高效表达mIL12,为进一步研究体内外对肿瘤杀伤作用奠定基础。     

鼻咽癌研究进展

鼻咽癌有很多分化类型,常见于咽隐窝,位于咽鼓管咽口内侧角的后内侧壁。这种恶性肿瘤在大多数国家发病率较低,不到1/10万人。但在中国南部,非洲北部和阿拉斯加州,其发病率却很高,尤其多见于阿拉斯加州的因纽特人和中国广东人。有报道在香港鼻咽癌的发病率男女各为20～30/10万和15～20/10万。侨居于东南亚和美国北部的中国人发病率仍然维持在较高的水平,但在美国北部出生的中国人发病率明显低于出生在中国南部的人群。这些发现表明基因、人种和环境因素等可能均在鼻咽癌的发病中起到一定作用。1病理学鼻咽癌的恶性上皮细胞大都是大的多角形细…     

携带IL-12的增殖腺病毒对鼻咽癌细胞的杀伤作用

目的：肿瘤选择性增殖腺病毒携带小鼠白细胞介素12（mIL-12)基因，增强对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法：用非增殖腺病毒Ad-LacZ测定腺病毒对鼻咽癌细胞CNE3和915的转染率，用E1B－55000u蛋白缺失的腺病毒dl1520和E1B－55000u蛋白缺失的腺病毒CNHK200－mlIL12分别转染培养的CNE3和915，并瘤内注射到裸鼠皮下的CNE3移植瘤。结果：Ad-LacZ病毒数量与细胞数量之比（MOI）为100时，转染率分别为63％和56％；MOI为10时，分别为12％和8％。 在体外不加入淋巴细胞的条件下，CNHK200－mIL和dl1520在MOI为100时都可在7d内完全杀灭鼻咽癌细胞CNE3和915。对裸鼠CNE3移植瘤，CNHK200－mil12治疗组疗效显著高于dl1520治疗组（P＜0．05） ，表明在选择性腺病毒中插入mIL12增强了其杀伤功能。结论：选择性增殖腺病毒携带mIL12后能够增强病毒对鼻咽癌细胞的杀伤作用，为鼻咽癌临床治疗探索一种新的基因病毒治疗方法。     

恶性肿瘤治疗的新策略—基因—病毒治疗

本文较系统地介绍了几种增殖病毒治疗肿瘤的最近进展。目前最为有效的增殖病毒是ONYSX-015,它与常规化疗联合,可产生令人鼓舞的临床疗效。但单独应用,其病毒杀伤力仍不足,从而提出了一种新型的肿瘤治疗新策略。即基因-病毒治疗法,该方案充分利用增殖病毒及基因治疗的优势,它可能成为肿瘤治疗最有效的方案之一。