兔口腔黏膜细胞与灭活的3T3成纤维细胞的体外共培养

目的 探讨口腔黏膜细胞的培养方法,为进一步以口腔黏膜细胞为种子细胞构建组织工程化尿道提供实验依据.方法 体外分离口腔黏膜细胞,取部分细胞与经丝裂霉素灭活的3T3成纤维细胞进行共培养(共培养组),定期观察细胞形态变化及生长增殖情况.以非共培养的口腔黏膜细胞作为对照(非共培养组).同时,对体外培养获得的口腔黏膜细胞进行广谱角蛋白抗体(AE1/AE3)和K19免疫荧光染色鉴定;流式细胞仪检测第2代共培养组细胞的AE1/AE3阳性细胞百分比.结果 共培养组口腔黏膜细胞,呈现典型的"铺路石"状,细胞形态均一,可传代至7～8代.非共培养组口腔黏膜细胞则形态多样,传至第2代时,即开始出现老化,细胞贴壁及增殖能力均明显减弱.免疫荧光染色显示,体外培养获得的口腔黏膜细胞AE1/AE3免疫荧光染色阳性,40%细胞K19染色阳性.流式细胞仪检测结果表明,第2代共培养组口腔黏膜细胞AE1/AE3阳性细胞百分比》95%.结论 口腔黏膜细胞在有灭活的3T3成纤维细胞存在时可成功培养和扩增,为进一步将其作为种子细胞构建组织工程化尿道奠定了良好的基础.     

慢性细菌性前列腺炎患者精子中促凋亡蛋白Omi/HtrA2的表达

目的:检测慢性细菌性前列腺炎患者精子中促凋亡蛋白Omi/HtrA2的表达,探讨该疾患影响男性生育的可能机制。方法:采集41例慢性细菌性前列腺炎患者(A组)和12例健康生育男性(B组)的精液后,分别检测精液中炎症细胞因子(TNF-α、IL-1β)的浓度和精子密度、活动力及形态。精液经47.5%、57%、76%和95%Percoll梯度分离法分离后,分别用RT-PCR和Western印迹法检测精子促凋亡蛋白Omi/HtrA2的表达。结果:A组与B组炎症因子TNF-α、IL-1β的浓度分别为:(53.62±27.60)pg/ml、(60.75±32.42)pg/ml和(25.03±5.02)pg/ml、(18.70±7.06)pg/ml,两组相比差异有显著性(P<0.05)。A组中促凋亡蛋白Omi/HtrA2的转录和表达水平亦显著升高(P<0.05)。结论:慢性细菌性前列腺炎患者精子中促凋亡蛋白Omi/HtrA2的表达上调。     

应用组织工程口腔黏膜重建尿道的初步实验研究

目的 探讨兔口腔黏膜细胞的体外培养方法,并以其为种子细胞与异体膀胱黏膜下脱细胞基质(bladder acellular matrix graft,BAMG)复合,构建组织工程尿道. 方法 18只10周龄雄性新西兰大耳白兔,体重0.3～0.5 kg.取其中12只兔口腔黏膜组织,分离获得口腔黏膜细胞.将口腔黏膜细胞分别接种于有3T3细胞及无3T3细胞的培养皿进行培养,接种后第2天于倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,绘制细胞生长曲线,观察生长增殖情况,并行免疫荧光组织化学染色鉴定.取余6只兔膀胱,经脱细胞处理制备BAMG,随机取1 cm×1 cm组织行HE染色,观察脱细胞效果.将接种于有3T3细胞培养皿培养获得的第2代口腔黏膜细胞种植于BAMG上,培养1周后,行HE染色及扫描电镜观察口腔黏膜细胞与BAMG的复合状况. 结果 倒置相差显微镜下观察,接种于有3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞可传至7～8代,其细胞形态均一,功能良好;无3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞形态多样,传至第2代时,即开始出现老化.细胞生长曲线显示,两种方法培养的口腔黏膜细胞均于第8天开始呈对数增长,第14天达峰值.接种于有3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞,培养至融合时所获得细胞数量明显多于接种于无3T3细胞培养皿的u腔黏膜细胞.两种方法培养的口腔黏膜细胞行免疫荧光染色,均呈绿色荧光.HE染色观察,BAMG经脱细胞处理后未见细胞,脱细胞效果良好.复合培养1周后,HE染色及扫描电镜观察口腔黏膜细胞与BAMG复合良好. 结论 兔口腔黏膜细胞可在体外成功培养、扩增,与同种异体BAMG复合后生长良好,为构建组织工程尿道提供了一种新的选择.     

前列腺切除术后膀胱颈部挛缩的诊断与治疗

膀胱颈部挛缩(bladder neck contracture,BNC)是前列腺良恶性病变术后一种常见的并发症,诸多因素导致了BNC的发生发展,治疗手段可根据患者的病情严重程度从简单的尿道扩张到复杂的经腹部-会阴联合径路重建手术,现将国内外对BNC治疗的现状及最新进展情况进行综述。     

输尿管憩室癌1例

患者,男,61岁。因反复出现无痛性肉眼血尿1个月入院。体检：左输尿管近膀胱入口处有压痛。尿常规检查红细胞3301／ul。静脉肾盂造影（IVP）示左侧输尿管下段近膀胱人口处呈囊袋样膨大,其内可见小片状充盈缺损,边缘欠光滑,其上段输尿管无扩张,考虑为输尿管憩室内占位性病变。核素肾图显示左侧肾小球滤过率（GFR）为36．6ml／min,右侧GFR为48．1ml／min,     

乳腺癌环磷酰胺化疗后继发膀胱平滑肌肉瘤1例报告并文献复习

目的：探讨环磷酰胺相关性膀胱平滑肌肉瘤（bladder leiomyosarcoma,BLMS）的发病机制和及诊治方法。方法：报道1例乳腺癌环磷酰胺化疗后继发BLMs的病例。50岁女性患者接受环磷酰胺化疗8个月出现为尿频、尿急。B超、CT示膀胱颈部左侧壁-24mm&#215;20mm&#215;30mm的实性肿块,膀胱镜检示膀胱颈部1-3点处隆起,表面呈滤泡样增生。检索MEDLINE和CBM数据库中相关文献,进行复习。结果：患者行膀胱部分切除,术后病理诊断为低度恶性BLMS。镜下肿瘤细胞呈梭形,胞浆嗜酸性,核长顿圆,多型性明显。免疫组化显示SMA、vimentin和desmin阳性,EMA和CK为阴性。文献报道了环磷酰胺相关性BLMS12例,而乳腺癌环磷酰胺化疗后继发BLMS尚未见报道。结论：环磷酰胺治疗是发生BLMs的重要原因,因此接受环磷酰胺治疗的患者应进行泌尿系统的密切随访。     

膀胱平滑肌肉瘤6例诊疗分析及文献复习

目的:结合临床资料和文献复习,探讨膀胱平滑肌肉瘤的诊断和治疗方法。方法:自1996～2006年收治膀胱平滑肌肉瘤6例,均表现为肉眼血尿,膀胱镜检查提示肿瘤瘤体光滑,呈菜花或乳头状,位于膀胱侧壁、顶壁或后壁。行根治性全膀胱切除术1例,肿物及部分膀胱切除术5例。结果:病理检查证实均为膀胱平滑肌肉瘤,免疫组织化学检查SMA强阳性6例,MSA阳性6例,Des( )2例,S-100(-)4例,S-100( /-)2例,CD34(-)6例。结论:膀胱平滑肌肉瘤是一种少见的泌尿生殖系恶性肿瘤,治疗以手术为主,除非肿块很小,一般不考虑采用经尿道电切术。该病的发生可能与环磷酰胺化疗和放射治疗等因素相关。     

经闭孔吊带尿道球部悬吊术治疗男性尿失禁

奥地利学者Rehder等通过尸体标本和临床应用,观察了经闭孔吊带(TOT)尿道球部悬吊术治疗男性尿失禁的效果。尸体标本取会阴部正中切口,暴露球海绵体肌,沿其中线向两侧分离,游离尿道球部近端至会阴中心键。以手指钝性分离出尿道球部和两侧阴茎海绵体之间的间隙。取阴囊两侧平阴茎根部小切口,将螺旋状穿刺针自切口垂直穿入闭孔筋膜内侧缘,左手食指在尿道球部和阴茎海绵体间的球海绵体肌内引导穿刺针向会阴部穿出,吊带的一端与穿刺针固定,逆行回撤穿刺针,将吊带拉出切口。同法处理对侧。吊带中部远端与尿道球部固定,近端与会阴中心键固定。在…     

非编织状聚乙醇酸膜片重建兔尿道的实验研究

目的探讨非编织状聚乙醇酸膜片重建兔全层尿道的效果。方法制备1cm×1cm的非编织状PGA膜片。建立新西兰大白兔尿道腹侧1cm全层尿道缺损动物模型,将PGA膜片植入尿道缺损区域,修补尿道缺损。术后1、2、3个月进行尿道造影、大体观察和组织学观察评价尿道重建情况。结果PGA膜片修复新西兰兔全层尿道缺损,9只动物除1只术后1个月发生尿瘘外．其余动物均排尿通畅。组织学检查发现尿道黏膜再生良好,但尿道海绵体区域主要以纤维瘢痕增生为主,未见明显尿道海绵体再生。结论PGA膜片能够修复新西兰大白兔1cm尿道黏膜的缺损,但缺乏尿道海绵体再生。     

尿道损伤诊疗安全共识

正多种外伤可导致尿道损伤~([1-6])。其中钝性损伤(如骑跨伤)是男性前尿道损伤的最常见病因~([7-9]),而后尿道损伤则多见于骨盆骨折~([10-11])。女性尿道损伤并不多见,可由骨盆骨折造成,且往往伴随阴道损伤~([8])。值得注意的是,随着经尿道手术的广泛开展,医疗操作造成的尿道医源性损伤日益增多~([12-14])。有效预防和恰当处置医源性尿道损伤,才能更全面地保