股骨头骨坏死样本空间结构的Micro-CT评估

目的以股骨头骨坏死样本的Micro-CT断层图像为基础，对其进行空间结构评估。方法2003年11月～2005年6月，收集股骨头骨坏死患者行全髋关节置换术时取出的股骨头样本6个，对样本进行Micro-CT断层扫描，获取股骨头骨坏死样本的计算机三维图像，图像空间分辨率为36μm×36μm×36μm。手工选取兴趣区，随后采用骨体积分数（BV／TV）、骨小梁间隙（Tb．Sp）、骨小梁厚度（Tb，Th）、骨小梁数目（Tb．N）、骨表面积体积比（BS／BV）、结构模型指数（SMI）、骨小梁模型因子（Tb．Pf）等三维空间参数分别对股骨头骨坏死标本的正常区域、硬化带和塌陷区进行评价。结果晚期股骨头骨坏死硬化区和塌陷区的骨小梁空间结构明显改变：硬化区Bv／Tv明显增加，Tb．Th明显增厚，Tb，Sp变窄，SMI与正常区域的骨小梁无差别；而塌陷区Bv／Tv明显减少，BS／BV增大，Tb．N和Tb．Pf增加，Tb，Th改变不明显。结论Micro-CT作为一种新的检测手段，能够在不损伤样本的条件下快速获取股骨头骨坏死样本断层图像，具有精度高、检测快、可进行三维重建分析的优点。晚期股骨头骨坏死不同区域的骨三维结构呈现出不同的空间结构特征。     

四肢关节专用低场强MRI对前交叉韧带损伤的诊断价值

目的分析前交叉韧带损伤的MRI表现,评价四肢关节专用低场强MRI诊断前交叉韧带损伤的价值。方法应用A-torscan0·2T永磁型四肢关节专用低场强磁共振机,对40例膝关节前交叉韧带损伤患者分别采用自旋回波(SE)T1W、快速自旋回波(TSE)T2W、梯度回波(GE)T2W的矢状位、冠状位进行扫描。结果四肢关节专用低场强MRI对前交叉韧带损伤的诊断灵敏度高达100%,矢状位T1W和T2W可精确地发现前交叉韧带损伤程度。结论四肢关节专用低场强MRI是临床诊断膝关节前交叉韧带损伤的一种重要、可靠的主要检查手段。对临床医生制订手术方案有重要意义。     

人脂肪干细胞结合微载体在生物反应器中向软骨细胞分化

[目的]探索在旋转生物反应器内,应用微载体技术快速扩增并向软骨分化人脂肪干细胞。[方法]将人脂肪干细胞结合Cytodex3微载体在旋转的生物反应器(RCSS)内进行动态培养,应用倒置显微镜和扫描电镜对微载体表面的脂肪干细胞进行动态观察,并对收获的脂肪干细胞进行Safran in-O、tolu id ine b lue染色等组织化学染色及Ⅱ型胶原的免疫化学染色分析。[结果]脂肪干细胞于24 h内贴附于Cytodex3微载体表面,细胞形态为短梭形,随时间的延长,贴附于微载体的细胞逐渐增多,到培养后期,细胞密度可达最初接种的19倍左右,在微载体上收获的细胞进行番红花O、阿利新蓝染色呈阳性,Ⅱ型胶原染色阳性,均强于对照组。[结论]利用微载体细胞培养技术可简便快速地在体外扩增脂肪干细胞,并成功实现向软骨细胞分化。     

骨组织工程支架材料与新骨生长研究

本文对β-TCP、β-TCP／DCHA和HA材料的结构、表面生物活性及细胞在材料表面的牯附情况避行了检测与分析，用Micro-CT对制备的骨支架材料植入前后的结构进行了评价。将骨髓基质细胞进行培养、分化，扩增得到足够浓度的成骨细胞，并种植于骨支架材料复合培养后，再植入动物体＋观察成骨状况，研究成骨机制。结果表明：骨支架的孔隙中诱导生成新骨，随着新骨生长，支架材料在逐步降解，从而达到骨重建。研制出了具有三维多孔结构、适于新骨生长的孔径、可降解、表面生物活性好以及植入骨细胞后可以诱导新骨生成骨组织工程支架材料。     

镍及镍钛合金的致癌机制

笔者简要综述了镍、镍钛合金的致癌作用。     

生物活性材料成骨活性的体外测定★◇

目的：运用动物体内实验的方法测定生物活性材料成骨活性有较多缺点，为快速有效地评价成骨活性的生物材料，探索一种新的体外测定成骨活性的方法。 方法：实验于2004-01/2005-05在解放军总医院骨科研究所完成。取羊脱钙骨基质和复合材料(粗制羊骨蛋白+羊脱钙骨基 质+牛腱Ⅰ型胶原)两种活性材料分别做免疫组织化学染色检查是否含有骨形成蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）。并取脱钙骨基质、复合材料、rhBMP-2、3种材料与小鼠C2C12细胞共培养72 h后，用1% Triton将细胞裂解，取细胞裂解液测定碱性磷酸酶和总蛋白。利用所测定的碱性磷酸酶和总蛋白吸光度比值代表单位数量的细胞中所含碱性磷酸酶的含量。同时设立阴性对照（单纯细胞不加任何材料）。 结果：脱钙骨基质和复合材料中均含有BMP-2。用3种材料刺激C2C12细胞后，测定C2C12细胞中碱性磷酸酶含量高于阴性对照(P < 0.05)。rhBMP-2刺激C2C12细胞产生的碱性磷酸酶含量较其他材料明显增高(P < 0.001)。 结论：体外测定生物材料成骨活性在实际应用中具有操作简便、效果可靠的特点。     

树舌及其易混种类

树舌为我国林区常见的一种大型担子菌,其子实体(担子果)为多年生无柄的扁平体,民间常称其为“老牛肝”.近些年的研究资料表明树舌可供药用,具有护肝、养肝、安神、抗癌等功用,并已有制剂成品供应市场,如树     

多媒体数字化系统在细胞生物技术研究中的应用

目的 在细胞生物学研究中，利用先进的多媒体技术对传统的图像资料采集方法进行改革，提高资料采集、储存和保管的质量。方法 实验于2002-02／2004-05在解放军总医院全军骨科研究所完成。利用计算机、数码照相机、扫描仪、刻录仪、计算机图像采集系统、彩色激光打印机及各种软件收集和再现各方面的信息资料，按研究目的制作不同数据库及多媒体文件，建立影像资料库，简化资料的处理过程。结果 2002-02起建立细胞生物学多媒体数字化系统，截至2004-05，累计采集图像16万张，相关资料容量60G。结论 此套系统效率高，成本低，技术易掌握，资料分类、保存、查找容易，便于医学科研工作。     

人脂肪干细胞复合脱细胞软骨基质支架在生物反应器中构建组织工程软骨

目的:观察人脂肪干细胞复合脱细胞软骨基质支架在生物反应器中初步构建组织工程软骨的可行性。方法:实验于2005-04/2006-05在解放军总医院骨科研究所完成。脂肪组织和关节软骨均来自膝关节置换术中切除的组织,并经患者知情同意。关节软骨冻干后经粉碎机粉碎,过筛,选取25～38μm大小的软骨微粒。在样品中先加入2.5g/L胰蛋白酶,37℃消化24h,再加入1%Triton X-100震荡72h。将软骨微粒和蒸馏水按1∶3的比例混合后滴加在模板中,置入冷冻干燥机冻干后行紫外线交联。紫外线照射8h完成。最后经25kGy 60Co辐照灭菌完成支架制备。取膝关节置换术中切除的髌下脂肪垫,酶消法获得脂肪干细胞,扩增后复合于脱细胞软骨基质制成圆柱状三维支架上(细胞密度5×1010L-1),置于生物反应器中进行诱导培养,同时设静态培养组作为对照,3周后观测大体形态和组织学形态变化,同时进行组织化学(包括番红花O,阿利新蓝染色)和Ⅱ型胶原免疫组织化学分析。结果:生物反应器组诱导培养3周苏木精-伊红染色显示支架结构消失,只有中心区域残存少量支架结构;静态培养组支架结构尚存在,有少量基质分泌。番红花O染色显示生物反应器组细胞外有大量蛋白聚糖沉积,阿利新蓝染色表明有软骨特异性蛋白多糖的聚集;而静态培养组只有部分区域染色且淡于生物反应器组。Ⅰ型胶原免疫组化的结果显示,在生物反应器组细胞能够合成大量软骨细胞特异性胶原成分,而静态培养组呈弱阳性。结论:生物反应器培养明显促进了脂肪干细胞的增殖与软骨分化,是体外构建组织工程软骨的良好方法。     

四肢关节专用低场强MRI评估对膝关节损伤的诊断价值

目的：分析四肢关节专用低场强MRI诊断膝关节损伤的临床应用价值。 方法：于2004-12/2005-10解放军总医院全军骨科研究所收治经手术、关节镜检查或临床证实的膝关节损伤患者40例（43个膝关节）。应用Atorscan0.2T永磁型四肢关节专用低场强磁共振机,对膝关节损伤的MRI表现进行分析。 结果：四肢关节专用低场强MRI对半月板、前交叉韧带、骨挫伤等均可作出正确诊断。 结论：四肢关节专用低场强MRI对膝关节损伤的综合诊断具有重要意义,是膝关节损伤较理想的一种非创伤性检查方法。