人脂肪干细胞复合脱细胞软骨基质支架在生物反应器中构建组织工程软骨

目的:观察人脂肪干细胞复合脱细胞软骨基质支架在生物反应器中初步构建组织工程软骨的可行性。方法:实验于2005-04/2006-05在解放军总医院骨科研究所完成。脂肪组织和关节软骨均来自膝关节置换术中切除的组织,并经患者知情同意。关节软骨冻干后经粉碎机粉碎,过筛,选取25～38μm大小的软骨微粒。在样品中先加入2.5g/L胰蛋白酶,37℃消化24h,再加入1%Triton X-100震荡72h。将软骨微粒和蒸馏水按1∶3的比例混合后滴加在模板中,置入冷冻干燥机冻干后行紫外线交联。紫外线照射8h完成。最后经25kGy 60Co辐照灭菌完成支架制备。取膝关节置换术中切除的髌下脂肪垫,酶消法获得脂肪干细胞,扩增后复合于脱细胞软骨基质制成圆柱状三维支架上(细胞密度5×1010L-1),置于生物反应器中进行诱导培养,同时设静态培养组作为对照,3周后观测大体形态和组织学形态变化,同时进行组织化学(包括番红花O,阿利新蓝染色)和Ⅱ型胶原免疫组织化学分析。结果:生物反应器组诱导培养3周苏木精-伊红染色显示支架结构消失,只有中心区域残存少量支架结构;静态培养组支架结构尚存在,有少量基质分泌。番红花O染色显示生物反应器组细胞外有大量蛋白聚糖沉积,阿利新蓝染色表明有软骨特异性蛋白多糖的聚集;而静态培养组只有部分区域染色且淡于生物反应器组。Ⅰ型胶原免疫组化的结果显示,在生物反应器组细胞能够合成大量软骨细胞特异性胶原成分,而静态培养组呈弱阳性。结论:生物反应器培养明显促进了脂肪干细胞的增殖与软骨分化,是体外构建组织工程软骨的良好方法。     

成功救治颈椎损伤致长期昏迷一例

女，19岁。1995年10月8日入院。入院前5小时不慎从疾驶的三轮车上摔下，伤后短暂昏迷，醒后恶心呕吐一次。查体：意识清楚，格拉斯哥(GCS)评分15分，神经系统无阳性体征。头颅CT检查正常，诊断为脑震荡。9日上午，患诉枕颈部不适，亲属给予按摩时，突然出现呼吸骤停，随即意识丧失。立即气管插管，呼吸机维持呼吸。复查CT，发现枢椎后脱     

四肢战伤高发生率、高伤残率特点及致残原因分析

 目的 分析四肢战伤发生率高、伤残率高的特点及其致残原因,提出战时四肢伤救治的措施。方法 以国内外既往十余次战争中发生的四肢战伤资料为研究对象,应用文献调研、专家咨询、统计描述、逻辑学归纳等方法,研究既往战争中四肢战伤发生率高、死亡率低、伤残率高的特点。结果 提出了减少四肢战伤伤残率的卫勤措施,包括强化火线抢救的时效性、早期进行伤道清创等。结论 有助于降低四肢战伤的致残率,恢复部队战斗力具有参考价值。     

36例围手术期大出血患者的液体治疗研究

目的：探讨围术期大出血危重患者的液体治疗。方法：采用回顾性研究方法,选取2001年8月-2005年7月我院外科重症监护科收治的36例收容时累计出血量大于5000ml的危重患者为研究对象,将抗休克治疗分为两个阶段。第一阶段为出血期,继续失血量〉100ml／h,血压依靠大剂量升压药物维持,少尿或无尿;第二阶段为稳定期,引流量〈100ml／h,血压依靠小剂量升压药物维持,尿量增加。比较两阶段液体复苏的补液量、补液成分以及血流动力学、血气分析和血液生化指标等变化。结果：36例患者无一例死亡。第一阶段的失血量为（310．3±158．9）ml／h,平均治疗达标时间为（7．2±3．3）h,血液制品用量为（181．1±99．9）ml／h,胶体用量为（39．8±4．6）ml／h,与第二阶段[失血量（60．3±58．9）ml／h;平均治疗达标时间（14．3±6．7）h,血液制品用量（31．1±15．6）ml／h;胶体用量（58．8±14．6）ml／h]比较均有明显差异（P〈0．05）。36例患者均在约20h达到稳定循环,停用升压药物。平均SICU住院时间（5．5±1．8）d。结论：大出血患者抗休克治疗不同治疗阶段补液成分和数量存在明显差异,应结合病情进行调整。     

胃肠道功能与急性胰腺炎病情严重程度的关系

目的探讨胃肠道功能与急性胰腺炎病情严重程度的关系。方法回顾性总结我科2001年9月-2012年8月成功救治的42例急性胰腺炎患者的临床资料。将患者胃肠道功能按严重程度进行评分,同时评测患者入院当天的急性生理及慢性健康状况评分Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ）和CT严重度指数（computer tomography severityindex,CTSI）评分,将胃肠道功能中重度不良天数与ICU住院天数、呼吸机使用天数进行相关性分析。比较胃肠道中重度不良组与轻度不良组中重症患者比例。结果急性胰腺炎患者的胃肠道功能不良评分越高,其APACHEⅡ评分（r=0.612,P=0.028）和CTSI评分（r=0.477,P=0.006）也越高,且ICU住院天数（r=0.640,P=0.035）及呼吸机使用天数（r=0.779,P=0.022）与胃肠道功能中重度不良天数呈正相关。胃肠道中重度不良患者中重症胰腺炎比例更高（χ2=4.367,P=0.037）。结论胃肠道功能可反映急性胰腺炎患者病情严重程度。     

结构脂肪乳剂在高胆红素血症患者中应用的安全性研究

目的 比较结构脂肪乳剂(STG)和物理混合的中/长链脂肪乳剂(MCT/LCT)在高胆红素血症患者中应用的安全性.方法 回顾性分析2008年-2009年25对高胆红素血症(术后当天血清总胆红素200-400μmol/L)术后肠外营养应用脂肪乳≥5d的患者,STG组25例,MCT/LCT组25例.结果 与使用脂肪乳前比较,两组使用脂肪乳后第1天和第5天谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),碱性磷酸酶(AKP),γ-GT及胆红素均有所下降(P＜0.05),甘油三酯无明显变化(P＞0.05).两组患者使用后第1天和第5天血生化指标无明显差异(P＞0.05).结论 结构脂肪乳剂在高胆红素血症患者中应用对肝功能的影响与物理混合MCT/LCT无明显差异.     

人脂肪干细胞结合微载体在生物反应器中向软骨细胞分化

[目的]探索在旋转生物反应器内,应用微载体技术快速扩增并向软骨分化人脂肪干细胞。[方法]将人脂肪干细胞结合Cytodex3微载体在旋转的生物反应器(RCSS)内进行动态培养,应用倒置显微镜和扫描电镜对微载体表面的脂肪干细胞进行动态观察,并对收获的脂肪干细胞进行Safran in-O、tolu id ine b lue染色等组织化学染色及Ⅱ型胶原的免疫化学染色分析。[结果]脂肪干细胞于24 h内贴附于Cytodex3微载体表面,细胞形态为短梭形,随时间的延长,贴附于微载体的细胞逐渐增多,到培养后期,细胞密度可达最初接种的19倍左右,在微载体上收获的细胞进行番红花O、阿利新蓝染色呈阳性,Ⅱ型胶原染色阳性,均强于对照组。[结论]利用微载体细胞培养技术可简便快速地在体外扩增脂肪干细胞,并成功实现向软骨细胞分化。     

旋转细胞培养系统培养的山羊软骨细胞

 目的 探讨用旋转细胞培养系统（RCCS）进行大动物软骨细胞扩增的可行性。方法 将单层培养的具有正常表型的中国山羊软骨细胞和Cytodex-3微载体放入RCCS的培养容器中,加入DMEM 培养基进行培养。在细胞培养的第3、6、9、12 天,于倒置显微镜下观察Cytodex-3微载体表面软骨细胞生长形态及增殖变化情况,并对收获的软骨细胞进行蕃红花"O"染色和Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色分析。结果 软骨细胞贴附于微载体表面生长,细胞初期呈球形、半球形凸起,逐渐向周围伸展,随时间的延长,贴附于微载体的细胞逐渐增多。收获的软骨细胞蕃红花"O"染色呈强阳性,Ⅰ型胶原染色呈阴性,Ⅱ型胶原染色则呈强阳性。结论 利用RCCS可简便快速地在体外扩增羊软骨细胞,培养的软骨细胞具有正常的表型,能特异性分泌软骨组织特有的基质成分。     

组织工程骨软骨复合体修复犬膝关节负重区骨软骨缺损的实验研究

目的 观察以骨软骨支架复合骨髓基质干细胞(bone-fflarrow mesenchymal stem cells,BMSCs)修复犬膝关节负重区骨软骨缺损的疗效.方法 利用软骨细胞外基质作为软骨支架部分,以脱细胞骨作为骨支架部分,采用相分离技术制备骨软骨双相支架,将成软骨诱导的BMSCs种植到双相支架上构建组织工程骨软骨复合体,并以此复合体修复犬膝关节股骨髁负重区骨软骨缺损,分为细胞-双相支架组(实验组)和单纯支架组(对照组).分别在术后3和6个月时取材,根据大体、组织学、Micro-CT等检测结果进行半定量或定量评估.结果 大体及组织学评价表明:同一时间点实验组的修复效果优于对照组,且实验组在术后6个月时的修复效果优于其术后3个月时,两项差异均有统计学意义;而对照组小同时间点修复效果的差异无统计学意义.Micro-CT检测结果表明实验组与对照组软骨下骨均得到重建,两者的差异尤统计学意义.结论 骨软骨双相支架复合成软骨诱导的BMSCs能成功修复犬膝关节负重区的骨软骨缺损,其修复效果明显优于单纯支架植入组.     

闭合复位空心加压螺钉内固定治疗儿童股骨颈骨折

自2 0 0 0～2 0 0 1年应用闭合复位空心螺钉内固定治疗儿童股骨颈骨折6例,效果满意,报告如下。1　临床资料1 1　一般资料　本组6例,男4例,女2例。年龄8～1 4岁,平均1 1岁。左侧4例,右侧2例。致伤原因:高处坠落伤4例,臀部着地致伤1例,车祸伤1例。骨折按Colonana分类[1 ] :经颈型骨折4例,基底型骨折2例。1 2　手术方法　连续硬膜外麻醉,在C型臂X线机监护下牵引复位,在大粗隆下方2cm向股骨颈先贯穿2枚直径1 5mm克氏针,注意导针头部距骺板0 3～0 5mm ,沿导针切小口,用标尺准确选择深度,选用适当空心钉2枚沿导针旋入并加压。术后常规行患…