TNF-α和低氧对胰腺癌细胞表达VEGF-A、C的调节

目的:探讨细胞活素肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、SNAP(S-Nitroso-Nacetyl-penicillamine)对胰腺癌细胞产生血管内皮生长因子A、C(VEGF-A、C)的调节.方法:用Northern杂交和Western杂交法分析6种人胰腺癌细胞株中VEGF-A、C基因和蛋白的表达;以TNF-α或SNAP刺激其中两个细胞株后用逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR)分析其VEGF-A、C基因的表达.结果:Northern杂交法显示这6种胰腺癌细胞株均有4.1kb VEGF-A基因和2.4kb VEGF-C基因的表达;Western杂交法显示它们均有分子量为43kD的VEGF-A蛋白质和分子量为55kD的VEGF-C蛋白质的表达.RT-PCR分析法显示:TNF-α使细胞株COLO-357产生VEGF-A、VEGF-C mRNA分别减少约1～2.5倍、1～2倍,使细胞株CAPAN-1产生VEGF-A、VEGF-C mRNA分别减少约1倍、1.6～2.5倍;而SNAP刺激细胞株COLO-357产生VEGF-A mRNA增加约5倍,刺激细胞株CAPAN-1产生VEGF-A mRNA增加约4倍,但对这两种细胞株产生VEGF-C mRNA均无明显刺激作用.结论:细胞活素TNF-α和低氧通过调节血管内皮生长因子A、C的表达而影响胰腺癌细胞的生物学特性,抑制癌细胞的增殖,促进其凋亡、死亡或进展、恶化.     

胰十二指肠切除术近期合并症及技术改进

目的:探讨如何提高壶腹周围肿瘤的切除率以及降低胰十二指肠切除术后的主要并发症-胰漏的发生.方法:1995年3月～2000年12月本院行胰十二指肠术126例,除经典的手术步骤,作者对手术方法进行了改进,完整切除胰腺钩突,在门静脉与胰头粘连时应仔细分离,受到浸润时可合并门静脉侧壁或部分切除,胰肠端侧吻合时,将胰腺残端确切地套入空肠,并在吻合口两角危险区及前壁覆盖一束大网膜.结果:胰十二肠切除技术的改进,提高了切除率和生存率,而且并发症并未增加,本组患者1、3年生存率分别为71.4%、48.6%;胰肠端端吻合胰漏的发生率为4.8%,端侧吻合加吻合口周围附以带蒂大网膜无胰漏发生.结论:随着外科学的进步,胰十二指肠切除及合并门静脉部分切除已是安全有效的手术方式,胰肠端侧吻合加吻合口周围覆盖大网膜能有效地避免胰漏的发生.     

Raf激酶抑制蛋白和P-ERK在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)和磷酸化细胞外信号调节激酶(phos-extracellular signal regulated kinase,P-ERK)在肝细胞癌( hepatocellular carcinoma,HCC )中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学方法检测RKIP和P-ERK在HCC、癌旁及正常肝组织中的表达,并分析其与HCC临床病理学特征的关系.结果:HCC组织中RKIP的表达低于癌旁及正常肝组织,而P-ERK的表达高于癌旁及正常肝组织,差异有统计学意义;HCC组织中RKIP与P-ERK 的表达呈显著负相关( r =-0.227, P =0.039);RKIP在HCC组织中的表达与有无肝内或淋巴结转移及肿瘤分化程度相关( P <0.05);P-ERK在HCC组织中的表达与肿瘤分化程度、有无癌栓及有无肝内或淋巴转移相关( P <0.05).结论:RKIP表达的减少或缺失与HCC的发生、发展密切相关,RKIP表达的减少或缺失可能通过上调P-ERK的表达促进HCC的侵袭和转移.     

HPA与CXCR4的表达及其与肝癌浸润转移的关系

目的：探讨乙酰肝素酶（heparanase,HPA）和趋化因子受体CXCR4在肝癌细胞中的表达及其与肝癌浸润转移的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测HPA和CXCR4在肝癌、癌旁及正常肝组织中的表达,并分析其与肝癌临床病理学特征的关系。结果：在肝癌组织HPA和CXCR4的表达均显著高于癌旁及正常肝组织;HPA在肝癌组织中的表达与肿瘤大小、有无肝内或淋巴结转移及肿瘤分化程度有关（P〈0.05）;CXCR4在肝癌组织中的表达与有无癌栓及有无肝内或淋巴结转移有关（P〈0.05）;肝癌组织中HPA与CXCR4的表达呈显著正相关（r=0.313,P=0.027）。结论：HPA与CXCR4可能在肝细胞癌的发生发展、浸润转移中发挥着重要的协同作用。     

NS-398对人肝癌BEL-7402细胞凋亡作用及其机制的研究

目的：本研究应用NS-398对肝癌细胞株进行药物干预，探讨NS-398对肝细胞癌凋亡的影响。方法：NS-398取0、25、50、75、100μmol／L 5个浓度组，每个浓度组选取24h、48h、72h三个作用时间点。MTT法测定生长抑制情况，FCM检测细胞周期、凋亡率和Survivin、cyclin D1、PTEN的表达。结果：NS-398可以显著抑制BEL-7402细胞增殖，使G0／G1期比例显著降低；G2／M期比例显著增高并且诱导细胞凋亡（P〈0．001），并呈时间和剂量依赖性。与对照组相比．NS-398使Survivin、cyclin D1、PTEN蛋白表达显著下调并呈时间和剂量依赖性关系（P〈0．001）．结论：NS-398可诱导BEL-7402细胞凋亡．可能部分通过下调Survivin和PTEN途径实现的。     

NS-398对肝癌SMMC-7721和BEL-7402细胞凋亡和survivin、PTEN表达调节作用的研究

目的:研究应用NS398对肝细胞癌细胞株进行药物干预,探讨NS398对肝细胞癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:人肝细胞癌细胞株SMMC7721、BEL7402细胞常规培养。NS398取0、25、50、75、100μmol/L5个浓度组,每个浓度组选取24、48、72h三个作用时间点进行检测,观察NS398对各细胞株的作用。MTT法测定2种细胞株的增殖抑制情况,FCM检测对细胞周期和凋亡的影响,FCM定量检测COX2、survivin、PTEN的表达。结果:MTT法结果显示,NS398可以显著抑制SMMC7721、BEL7402细胞增殖。FCM检测结果显示,NS398分别使SMMC7721、BEL7402细胞G0/G1期比例显著降低;G2/M期细胞比例显著增高,S期细胞比例无明显变化,并引起了显著的细胞凋亡(P<0.001),并且呈时间依赖性和剂量依赖性。与对照组相比,NS398使COX2、survivin和PTEN蛋白表达显著下调并且呈时间和剂量依赖性关系(P<0.001)。结论:NS398通过诱导SMMC7721、BEL7402细胞株凋亡而抑制其增殖,可能部分通过下调survivin和PTEN途径实现的。     

环磷酰胺抑制作用下小鼠对人红细胞抗原的选择性耐受

目的　以环磷酰胺 (CY)作为免疫抑制剂 ,诱导小鼠产生对人红细胞血型抗原的选择性免疫耐受。　方法　1 0 2只 Balb/c小鼠分成 1 7组 ,在 2× 1 0 7人红细胞免疫注射后 ,分别以不同 CY剂量和给药时间给予抑制。并通过直接和间接血凝反应测定小鼠免疫应答所产生的抗人红细胞抗原的 Ig M和 Ig G型抗体效价。　结果　在 5 0～ 1 5 0 mg/kg CY剂量范围内 ,免疫注射当天至免疫后第 4天 (d0～d4)均可对小鼠的免疫应答产生抑制。而诱导小鼠产生对人红细胞抗原完全耐受的最佳 CY抑制时间和剂量分别为免疫注射后的第 1天和 1 0 0 mg/kg。　结论　 CY能有效抑制小鼠对人红细胞免疫所产生的应答 ,选择适当的给药时间和 CY剂量对耐受的建立十分重要。本项研究对诱导小鼠免疫系统产生对人红细胞血型弱抗原的应答具有探索意义。     

肝癌组织中Raf激酶抑制蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)在肝癌中的表达及其临床意义.方法 采用RT-PCR方法 检测肝细胞癌、癌旁组织及正常肝组织中RKIP mRNA的表达;采用组织芯片的免疫组织化学方法 检测RKIP蛋白和磷酸化的RKIP蛋白的表达,并分析RKIP蛋白和磷酸化的RKIP的表达与肝细胞癌临床病理学特征的关系.结果 RKIP mRNA在肝细胞痛组织、癌旁肝组织及正常肝组织的表达差异无统计学意义(P>0.05).肝细胞癌、癌旁肝组织及正常肝组织中RKIP蛋白表达的阳性率分别为22.2%、86%、93.8%,磷酸化的RKIP蛋白表达的阳性率分别为29.2%、84%、93.8%;肝癌组织中RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达均显著低于癌旁及正常肝组织(P<0.05);RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达与肿瘤大小、AFP水平及有无门静脉或胆管癌栓无关(P>0.05);RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达与肝细胞癌分化程度及有无肝内或淋巴转移有关,中高分化组RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达高于低分化组,无肝内或淋巴转移组高于有肝内或淋巴转移组(P<0.05).结论 RKIP和磷酸化的 RKIP 蛋白表达的减少或缺失与肝癌的发生、发展、侵袭转移密切相关.     

腹壁放线菌感染1例

患者,女性,55岁,主因右上腹疼痛不适半年余入院.患者半年前无明显诱因出现右上腹疼痛,持续性,时轻时重,向右侧腰背部放射,深呼吸及右侧卧位时加重,纳差,无恶心、呕吐、腹泻,无发冷、发热.大小便正常.查体,一般情况可,心肺查体未见异常.腹部平坦,未见肠胃型及胃肠蠕动波;右上腹可触及一包块,大小约15 cm×13 cm、质硬、固定、表面光滑、边界欠清、有压痛;移动性浊音阴性;肠鸣音正常,未闻及气过水声及金属音.实验室检查,血常规,白细胞11.2×109/L,中性粒细胞0.75%,淋巴细胞0.18%,血红蛋白132 g/L,血小板139×109/L;肿瘤标记物,甲胎蛋白5.3 μg/L,糖类蛋白33.89 kU/L,癌胚抗原2.01μg/L,铁蛋白124.6μg/L;肝肾功能未见明显异常.腹部强化CT,右侧腹壁皮下及肌层局限性软组织增厚、腹膜局限性增厚、临近肠管管壁增厚,肠间隙欠清晰.     

脐血造血干细胞库建立及其临床应用

目的 建立脐血造血干细胞库,用于治疗白血病、淋巴瘤、再生障碍性贫血等疾病。方法 采集新生儿脐血,用6％HES离心法分离脐血有核细胞以缩小脐血体积,样本以10％DMSO保存,检测有核细胞数、CD_(34)~+、CFU-GM及HLA,并作病原学捡测。结果 收集590份脐血,合格230份(合格率39％),平均脐血体积(89±20)ml,平均有核细胞数(1.48+0.36)×10~9,分离后有核细胞数(1.25±0.28)×10~9,有核细胞回收率(91+7)％,脐血CD_(34)~+细胞的百分率为(0.37±0.26)％,复苏后CFU-GM回收率为84％,平均每份脐血含CFU-GM(0.9±0.4)×10~6个集落,14％的样本CMV抗体阳性。73人查询,HLA 4个抗原以上相合率为95.7％。至2001年7月,提供3份脐血用于非亲缘脐血移植,1份用于亲缘脐血移植,3例植入,1例排斥。结论 建立脐血库有良好的应用前景。