杂交瘤细胞系复苏方法的探讨

淋巴细胞杂交瘤技术开展以来,人们获得越来越多的分泌不同特性单克隆抗体的杂交瘤细胞系,一般冻存于液氮罐中,当在复苏时,常常遭遇失败,直接影响后续工作。究其原因,如冻存细胞数量少,生长状态不良、细胞污染或补充液氮不及时等;此外,复苏时培养基条件的改变(换用另一批号小牛血清)及复苏方法不得当等也是原因。本     

女性年龄与体外受精胚胎移植结果的关系

目的　探讨女性年龄与体外受精 胚胎移植结果的关系。方法　分析IVF ET 10 6个起始周期、90个移植周期的临床资料 ,按女性年龄≤ 30岁 ,31～ 34岁 ,≥ 35岁分Ⅰ ,Ⅱ ,Ⅲ组 ,比较取消率、Gn用量、卵泡数、回收卵子数、受精数、卵裂数、优质胚胎数、受精率、卵裂率、优质胚胎率及临床妊娠率的差别。结果　 3组的取消率分别为 12 .5 0 % ,2 .78% ,33 .33 % ,三组间相比差异显著 (P <0 .0 5 ) ;Gn用量分别为 (2 8.71± 5 .45 )支、(33 .46± 7.5 1)支、(34.0 5± 5 .78)支 ,3组相比 ,Ⅰ组与Ⅱ ,Ⅲ组差异显著 (P <0 .0 5 ) ,Ⅱ组与Ⅲ组之间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;各组间卵泡数、周期取卵数、受精数、卵裂数、优质胚胎数无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;3组受精率分别为 74.49% ,6 8.0 7% ,6 7.82 % ,各组间相比 ,Ⅰ组与Ⅱ ,Ⅲ组差异显著 (P <0 .0 5 ) ,Ⅱ组与Ⅲ组间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;而卵裂率、优质胚胎率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;3组的每移植周期妊娠率分别是 45 .71% ,2 5 .71% ,15 .0 0 % ,各组间相比差异显著 (P <0 .0 5 )。结论　女性年龄是影响IVF ET成功的重要因素     

血清与卵泡液中血管内皮生长因子在控制性超排卵周期中的变化

目的 本研究通过观察控制性超排卵患者的血清及卵泡液中血管内皮生长因子的变化,探讨血管内皮生长因子与卵泡发育的关系。方法 50个行体外受精-胚胎移植治疗周期的患者为研究对象。分别于月经周期第2天、取卵日抽取静脉血20例,收集取卵日卵泡直径≥18mm或≤16mm卵泡的卵泡液各25例,用酶联免疫吸附试验方法测定VEGF的浓度。结果 取卵日血清VEGF水平(116.9±17.1)mg/L较月经第2天的(92.0±17.2)ng/L明显增高(P<0.001);取卵日卵泡直径≥18mm卵泡液中VEGF水平(1630.6±144.8)ug/L较卵泡直径≤16mm(1475.9±155.5)ng/L高(P<0.05);20例取卵日卵泡液水平(1492.8±184.9)ng/L显著高于同期血清的(116.9±17.1)ng/L(P<0.001)。结论 控制性超排卵周期中血清及卵泡液中VEGF水平均升高,可能参与卵泡发育、卵母细胞成熟。     

宫腔内人工授精266周期疗效分析

目的　总结 2 6 6周期宫腔内人工授精 (IUI)的临床效果。方法　回顾分析我院 1999年 6月— 2 0 0 2年 4月 2 0 3对不孕症夫妇实施IUI治疗的 2 6 6个周期。根据不孕的原因分为不明原因组、免疫性不孕组、男性因素组、卵巢因素组及输卵管因素组。根据IUI方案分成自然周期 (NC)组、克罗米芬 (CC)组、尿促性腺素 +绒促性腺素 (HMG +HCG)组、CC +HMG+HCG组。比较各组间临床妊娠率。结果　每周期临床妊娠率为 10 .2 %。每例临床妊娠率为 13.3%。原发不孕组临床妊娠率明显高于继发不孕组 (17.6 %对 4 .5 % )。输卵管因素性不孕组临床妊娠率明显低于其他不孕组。不同IUI方案间的临床妊娠率无统计学差别。CC组的黄素化卵泡未破裂综合征 (LUF)发生率较NC组和HMG +HCG组明显增高。IUI治疗 2周期临床妊娠率明显高于治疗 1周期和 3周期及以上者。结论　宫腔内人工授精是治疗非输卵管因素不孕的一种有效方法 ,治疗时限以 3周期为宜     

肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的研制与鉴定

本文报道,从肾综合征出血热病毒(HFRSV)感染乳鼠鼠脑中提取高滴度的血凝素(HAN),以该血凝素免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合。融合率为60％和78％,阳性孔率为15％和44％。IFA筛选后共获得56株分泌抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系。对其中1A_3,2A_(11),1B_3,3D_8,2F_7,1G_4,1G_9,3G_1,3G_(11),2H_1十株细胞系用有限稀释法进行了3～4次克隆化,阳性克隆率达到100％。杂交瘤细胞系经连续传代培养巳6个多月,仍能稳定地分泌单克隆抗体。冻存的细胞系经复苏后仍能稳定地分泌McAb。应用血凝抑制(Hl)试验证明其中9株为特异性分泌抗HFRSVHHAN McAb 的杂交瘤细胞系,1株(2A_(11))是抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系,其中(1:81920)和3G_1(1:40960)具有高滴度的血凝抑制活性。应用微量细胞培养中和试验(NT)证明其中6抗1A_8,1B_3,3D_8,1G_4,3G_1,3G_(11))具有中和活性.尤其3D_8(1:5120)和3G_1(>1:10240)有较高的中和效价。IFA测定了10株杂交瘤细胞的McAb与HFRSV陈株抗原片反应的抗体效价,其中培养上清为1:40～1:320,杂交瘤腹水为1:1万～1:8万。10种单克隆抗体与JEV、HSV-I和正常Vero-E_6细胞抗原片均无交叉反应。但均能与不同疫区、不同宿主分离的HFRSV陈株81-14A,A9和R_(22)抗原片反应,说明HFRSV血凝素McAb具     

体外受精与胚胎移植治疗不孕症290个周期临床分析

目的 :分析体外受精与胚胎移植 (IVF ET)治疗不孕症 2 90个周期的效果。方法 :采用GnRHa/FSH/hCG和GnRHa/FSH/hMG/hCG两种超促排卵方案 ,对 2 5 2对不孕夫妇共进行了 2 90个周期常规IVF、冻融胚胎或卵胞浆内单精子显微注射 (ICSI)及胚胎移植 (ET)治疗。结果 :合计 2 90个周期共获临床妊娠 10 5例 ,周期妊娠率为36 .2 %。流产 9例 ,异位妊娠 11例 ,已分娩 6 5例 ,获新生儿 91个 ,另 2 0例继续妊娠。按女性年龄 <30岁、30～ 34岁、35～ 39岁、≥ 4 0岁分为 4个年龄组 ,4组的周期妊娠率依次为 4 7.0 %、34.1%、2 5 .5 %、0 ,有统计学差异 (P <0 .0 5 )。结论 :不孕夫妇用常规IVF、冻融胚胎移植或ICSI后均能获得较好的妊娠效果。女方年龄与临床妊娠成功率密切相关     

420例女性生殖系统感染者支原体培养及药敏分析

解脲支原体（ＵＵ）与人型支原体（ＭＨ）是人类生殖系常见且有致病作用的支原体。为了解支原体感染及临床耐药情况，我们用支原体ＩST系列试剂对４２０例疑为生殖系感染的宫颈分泌物标本进行了支原体培养、鉴定和药敏测定。现将结果报告如下。１ 资料与方法1．ｌ 标本来源 我院妇科门诊疑为生殖系感染病人４２０例，年龄１９～５３岁，病程数天至半年。妇科门诊健康体检者８２例，年龄２２～５２岁，无性乱史和性病史，作为临床正常对照组。标本均自女性宫颈口 １～１．5ｃｍ处用无菌棉拭子取材。１．２ 方法 培养试剂盒由法国ＢiｏＭｅｒ…     

恶性肿瘤患者T细胞亚群和免疫球蛋白检测分析

目的 分析恶性肿瘤患者细胞和体液免疫指标的变化及意义。方法利用APAAP法和终点免疫比浊法测定86例恶性肿瘤患者外周血中T淋巴细胞亚群水平及血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量，并与30例健康人进行比较。结果恶性肿瘤患者CD3和CD4阳性细胞明显低于正常对照，CD8阳性细胞显著增高，致使CD4／CD8比值显著降低。恶性肿瘤患者大多数组别血清中IgG、IgA、IgM的含量与正常对照组比较无明显差别，其余部分组别的含量高于正常对照。结论恶性肿瘤患者存在明显的细胞免疫功能低下，机体处于免疫抑制状态。大部分恶性肿瘤患者体液免疫功能无明显变化，部分表现为体液免疫功能亢进。     

无/低血清条件下杂交瘤细胞系生长和McAb产生的研究

将3G1/3F8细胞培养于血清浓度为20％、10％、17.5％、5％、2％、1％、0％的RPMI-1640中测定细胞生长曲线和McAb产生曲线。观察血清浓度对细胞生长和McAb产生的影响。用6种无血清培养基对3G1/3F8细胞做适应性培养,活细胞数为对照组的9.5％～55％;McAb产量为81.8％～106.8％。经驯化培养3G1/3F8细胞能够在血清含量1％、5％的培养液生长传代,冻存复苏,活细胞数达到对照组的71.2％～98.2％;McAb产量为104％和108％。对不同血清浓度下接种密度对细胞生长和McAb产量的作用做了实验观察。     

体外受精-胚胎移植后异位妊娠11例临床分析

目的　探讨体外受精 -胚胎移植后异位妊娠的发生原因、诊断及治疗方法。方法　对体外受精 -胚胎移植后妊娠 10 4例临床资料进行回顾性分析。结果　 10 4例中宫内妊娠 93例 ,异位妊娠 11例 ,异位妊娠率为 10 6 %(11/10 4 )。因输卵管性不孕行IVF的异位妊娠发生率为 13 9%(10 /72 ) ,远远高于因其它原因不孕致异位妊娠发生率的 3 1%(1/32 ) (P<0 .0 5 )。宫外孕组ET时插管困难者发生率为 36 4 %(4 /11) ,而宫腔内妊娠ET时插管困难发生率为 16 1%(15 /93) ,两者之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　 1 异位妊娠的发生与输卵管病变有关 ;2 孕早期血hCG及阴道超声检查有助于异位妊娠诊断及治疗