组织-细胞共培养诱导神经干细胞定向分化的研究

目的 探讨大鼠上丘组织-神经干细胞(NSCs)共培养对细胞分化的影响.方法 采用无血清选择培养的方法获得上丘源NSCs,单细胞克隆传代培养并进行形态学观察.使用组织-细胞共培养系统将不同年龄大鼠上丘组织与NSCs共培养,观察NSCs分化过程.对分化细胞进行鉴定,并与NSCs的自然分化过程进行比较.结果 从胚鼠上丘中获得的细胞呈球形悬浮生长,可形成单细胞克隆,具有多向分化能力,经免疫荧光鉴定证实为NSCs.新生大鼠上丘组织与NSCs共培养可以促进NSCs的分化,并诱导分化出Thy1.1阳性的视网膜神经节细胞,阳性细胞比率为19.97%(273/1094).而神NSCs的自然分化或与成年大鼠上丘组织共培养后均未发现Thy1.1阳性细胞.结论 从胚胎大鼠上丘可以分离培养出NSCs,与新生大鼠的上丘组织共培养可以诱导NSCs分化为视网膜神经节细胞.     

扩大经蝶入路进入海绵窦内侧腔的应用显微解剖

目的为临床开展扩大经蝶入路进入海绵窦内侧腔手术提供解剖学依据。方法用50例成人头颅标本．在显微镜下对蝶窦外侧壁、蝶鞍、海绵窦及周围结构进行解剖学观察并测量。模拟扩大经蝶入路磨除海绵窦腹侧骨质，切开海绵窦内侧壁，显露海绵窦内侧腔。结果颈内动脉（ICA）明显隆起于蝶窦侧壁的占58％，蝶窦内隆起呈管型占3％。鞍底硬膜分为2层，海绵窦内侧壁的上部南垂体硬膜构成，无骨性结构支撑；下部由骨周硬膜构成，有蝶窦侧壁骨质支撑。两侧海绵窦内侧壁的距离为（14．8±2．7）mm。海绵窦内侧腔位于C4段ICA与垂体之间，腔内为丰富的静脉丛，最宽可达7mm，但常因ICA扭曲而闭塞。无颅神经穿越海绵窦内侧腔，ICA是扩大经蝶入路探查海绵窦遇到的第一个主要结构。结论扩大经蝶入路进入海绵窦内侧腔是安全可行的。     

两种不同入路手术治疗海绵窦区肿瘤

目的探讨海绵窦区肿瘤切除的手术入路,以提高手术全切率,降低残障率.方法对14例海绵窦内肿瘤行硬膜下入路切除5例,行硬膜外入路切除9例,比较两种入路的方法及疗效.结果行硬膜下入路者中全切除2例,大部切除3例;术后出现新的神经功能障碍4例.行硬膜外入路者中全切除5例,次全切除3例,大部切除1例;术后出现新的脑神经功能障碍3例,其中1例完全恢复.结论针对不同类型的肿瘤及生长特性,选择适当的手术入路和显微神经外科技术,可有效提高全切率,降低残障率.     

床突间隙显微外科解剖及概念的探讨

目的为经床突间隙(CS)进行海绵窦、鞍内、颈内动脉及眼动脉等病变的直接手术提供解剖依据,进一步澄清CS的概念.方法用22例成人头颅标本,在手术显微镜下从翼点和额下入路对前床突及周围结构进行直接解剖、观察和测量.结果CS是磨除前床突后留下的一楔形空间,其顶边宽(2.39±0.18)mm(0.64～4.10 mm),底边宽(5.34±0.16)mm(2 .66～7.00 mm),上内侧边长(7.67±0.33)mm(4.02～14.32 mm),下内侧边长(11.21±0.4 9)mm(4.24～17.06 mm),下侧边长(10.00±0.32)mm(5.6～14.26 mm),底高(7.87±0.35) mm(5.12～16.38 mm),尖端空间完全被颈内动脉(ICA)床突段所占据.ICA的远硬膜环和近硬膜环都不完整,动脉壁外常有海绵窦静脉丛,术中剥离ICA床突段可引起静脉丛出血.结论ICA床突段血管壁外有海绵窦静脉丛,它是海绵窦内结构,所以手术松解ICA床突段最好只剥离其内侧缘的ICA 穴,并为术中暴露CS后的空间大小提供了客观指标.     

rIL—2、TNF—α、IFN—γ对抗CD3—抗胶质瘤双特异性抗体的协同细胞毒作用

目的：观察细胞因子rIL-2、TNF－α、IFN－γ对抗CD3－抗胶质瘤双特异性抗体（双抗）的协同作用,进一步提高双抗对人脑胶质瘤的治疗作用。方法：以人脑胶质瘤细胞株SHG－44为靶细胞,健康人或胶质瘤患的外周血单个核细胞（PBMC）为效应细胞,以18h ^3H-TdR掺入释放法测定细胞毒活性,采用单比实验和联合作用等对比分析方法,分析各细胞因子（rIL-2、TNF－α、IFN－γ)对双抗诱导的细胞毒性作用的影响。结果：rIL-2、TNF－α、IFN－γ均可协同提高双抗对人脑胶质瘤的细胞毒作用（P＜0．05）。来源于恶性胶质瘤患的效应细胞活性较正常人低,rIL-2与双抗可协同增强其活性。结论：细胞因子rIL-2、TNF－α、IFN－γ可协同提高双抗对效应细胞的活化,充分激活效应细胞,增强抗肿瘤免疫能力。     

基因芯片在恶性胶质瘤研究中的应用

胶质瘤是一种恶性程度极高、侵袭性极强的肿瘤,临床治疗极为困难。目前肿瘤的基因治疗仍存在较多的理论和技术问题,主要原因在于未能从分子水平阐明胶质瘤的发生、发展及转移过程中基因的表达调控机制,因而,筛选恶性胶质瘤差异表达基因及寻找肿瘤相关基因显得尤为必要。基因芯片是最新发展起来的可应用于高效、快速的大规模筛选肿瘤相关基因的技术,将对肿瘤的分子病理分型和临床治疗、预后判断起到推动和促进作用。本文对基因芯     

中央沟附近胶质瘤的手术治疗探讨

背景与目的：中央沟附近胶质瘤早期即可引起肢体功能障碍，严重影响患者的生活质量，本文旨在探讨如何提高中央沟附近胶质瘤的手术治疗效果，改善生活质量。方法：回顾性总结1995—2001年我科收治的中央沟附近84例胶质瘤的临床表现、诊断、手术方式的选择、治疗结果与预后。结果：84例胶质瘤中，肿瘤主体位于中央沟前36例，位于中央沟后30例，主体位于中央沟下方18例。临床上首发症状为癫痫的59例，以进行性一侧肢体无力或麻木15例，以头痛等颅内压增高症状为主要表现起病的10例。术后病理按WHO分级分类，提示星形细胞肿瘤58例，少突胶质细胞肿瘤20例，少突胶质细胞与星形细胞混合瘤6例。星形细胞肿瘤中星形细胞瘤6例，间变型星形细胞瘤29例，胶质母细胞瘤23例；少突胶质细胞肿瘤中少突胶质细胞瘤6例，间变型少突胶质细胞瘤14例。在显微镜下肿瘤全切除67例，次全切除17例。术后肢体功能障碍较术前减轻20例，不变22例，短期加重而后肢体功能恢复的有12例，加重30例，无手术死亡。结论：术前要充分了解肿瘤的解剖位置和周围结构的毗邻关系，采用显微外科技术在软脑膜下切除肿瘤，保护中央沟静脉解剖和功能的完整，是手术的关键。     

新生大鼠上丘脑组织培养研究

目的探讨新生大鼠上丘脑组织培养方法,并对其在培养过程中的变化进行观察.方法取出生4 d的SD乳鼠上丘脑组织,分别在鼠尾胶原玻片、多聚赖氨酸玻片和Biocoat培养小室上进行组织培养,使用相差显微镜动态观察组织块生长情况.48 h后观察组织块贴壁率,在培养5d时使用图像分析仪观察细胞迁移情况,测量最大迁移距离.使用乳酸脱氢酶试剂盒,测量组织培养液中乳酸脱氢酶活性的动态变化.常规HE染色形态学观察,并使用透射电镜观察组织块超微结构.结果与传统的培养载体相比,上丘脑组织在Biocoat培养小室上进行培养可以获得较高的组织贴壁率和细胞迁移距离.上丘脑组织在接种后3～15 d,其培养液中乳酸脱氢酶活性保持在较低水平.培养早期上丘脑组织块边缘出现细胞突起,胶质细胞迁移,随着培养时间延长,细胞出现凋亡,组织结构破坏.结论Biocoat培养小室是进行新生大鼠上丘脑组织培养的理想载体,接种3 d后组织生长趋于旺盛,而在2周后多数组织的生长逐渐衰退.     

呼气末正压通气对犬脑内血肿高颅压的影响

目的 观察不同水平呼气末正压通气(positive end-expiratory pressure,PEEP)对犬额叶脑内血肿颅内高压的影响.方法 18只犬随机分为正常颅压组(Ⅰ组,颅内压＜18 mmHg)、颅压中度增高组(Ⅱ组,颅内压25～40 mmHg)和颅压高度增高组(Ⅲ组,颅内压＞40 mmHg)3组(每组各6只),全麻,气管切开插管,应用肌松剂,机械通气,右额叶脑内注入自体血制成颅内高压模型,PEEP从0开始每次增加3 cmH2O,直到18 cmH2O,每个水平持续20 min,在对侧用光纤颅内压探头监测脑内颅内压(ICP)的变化,记录平均动脉压(MAP)和中心静脉压(CVP)并计算出脑灌注压(CPP).结果 随着PEEP的递增,Ⅰ组颅内压上升,脑灌注压下降;Ⅱ、Ⅲ组颅内压略有下降,但Ⅱ组MAP、CPP上升,而Ⅲ组MAP下降,CPP下降;3组CVP都随PEEP增加而升高,但Ⅲ组上升幅度明显大于另两组(P＜0.01).结论 应用PEEP通气时由于中心静脉压升高、脑静脉回流受阻和血流动力学改变,进而影响ICP和CPP.在正常颅内压状态下,PEEP使颅内压上升,在已有颅内高压存在时,PEEP对颅内压影响不明显,但在重度高颅压情况下,PEEP使CPP明显下降,提示在重度颅内高压需要应用PEEP通气时必须维持MAP,以保证足够的CPP.