可溶性TRAIL重组蛋白治疗CIA实验研究

用sTRAIL重组蛋白治疗CIA模型 ,探讨sTRAIL用于自身免疫病治疗的可能性。将鸡肋骨II型胶原蛋白注射大鼠 ,建立了RA的动物模型———胶原诱导性关节炎 ,自制的可溶性TRAIL蛋白治疗CIA ,观察治疗后关节炎指数与血清中炎性细胞因子的变化。结果是sTRAIL 30 0ng/只 (0 1ml/次 )局部应用于关节炎部位 ,皮下注射 1周以后 ,sTRAIL应用的大鼠症状较对照组指数评分稍有下降 ;患病大鼠较正常大鼠IFN γ和TNF α表达量增加 ,而经过sTRAIL治疗后两者表达量都有显著下降 (P <0 0 5 )。提示sTRAIL局部应用后可缓解关节炎的局部炎症 ,可能是通过抑制激活的淋巴细胞 ,减少炎症细胞因子的分泌量和对炎症细胞的趋化而起作用     

类风湿性关节炎患者关节滑膜液浸润的T细胞表达特性

目的 :为研究类风湿性关节炎 (RA)患者关节滑膜液浸润的淋巴细胞介导自身免疫病的特性 ,分析了 2 2例RA患者滑膜液中淋巴细胞的免疫表型、对II型胶原的反应频率及IL 10、IL 12的分泌格局。方法 :用流式细胞术分别测定滑膜液和外周血淋巴细胞表型 ,并采用国际标准半有限稀释法分析了关节滑膜液中浸润的淋巴细胞对II型胶原 (CII)的反应频率 ,同时用ELISA方法检测了滑膜液与外周血中IL 10与IL 12含量。结果 :滑膜液中的T淋巴细胞的表型分别为CD4 (39 6 %±10 5 % )和CD8细胞 (36 4 %± 16 4 % ) ,CD4 CD8细胞比值显著低于外周血 ,且同时表达CD16和CD5 6的活化NK细胞占15 5 %± 11 1%。T细胞受体谱取用表明仍以αβTCR为主 (6 9 6 %± 15 7% )。有意义的是 :滑膜液中的T细胞对CII的反应频率为 15 2× 10 - 6 ,远远高于外周血 (4 0× 10 - 6 )。IL 12含量为 (4 19 9± 89 2 )pg ml,IL 10含量为 (187 7± 34 5 )pg ml,与外周血中这 2种细胞因子的含量〔分别为IL 12 :(6 5 32± 34 2 )pg ml和IL 10 :(85± 12 7)pg ml〕比较 ,具有显著的统计学差异。结论 :上述实验结果表明这种具有表达特性的浸润T细胞介导了RA患者关节滑膜组织的免疫损伤。     

ANALYSIS OF APOPTOSIS BY DNA END LABELING METHOD (TDT) IN LEUKEMIA CELL LINES HL-60 AND U937

Apoptosisisakindofcelldeathrecognizablebyaseriesofspecializedchangesinmorphological,biochemicalandmolecularbiologicalforms.Apoptosisisanactiveprocessofcelldestruction,characterizedbycellshrinkage,chromatinaggregationwitheXtensivegenomicfragmentation,crescentbodyformingbychromosomepyknosisalongthenuclearmargin.Intheapoptosis,endouncleaseasedependentCa2 andMg2 isactivated,thisenzymemakechromosomedegradedatthelinkersectionstofragmentsequivalenttosingleandmultiplenucleosomes.Thelatterarerevealeda…     

两种人乳头瘤病毒分型检测方法的比较

目的 通过比较PCR联合地高辛标记探针杂交法与实时荧光定量PCR法检测宫颈液标本中人乳头瘤病毒(HPV)感染的一致性,评价PCR联合地高辛标记探针杂交法的临床应用价值. 方法 将4型HPV(16、51、54和56)探针3′端加尾地高辛标记,检测标记探针的灵敏度和特异性.收集63例第二代杂交捕获(HC-Ⅱ)阳性和18例HC-Ⅱ阴性的宫颈液标本,采用HPV通用引物MY11/09对所有标本L1区基因序列进行PCR扩增,利用地高辛标记探针杂交法对PCR产物进行检测分型;同时利用实时荧光定量PCR对这81例标本进行检测,将两者的检测结果进行比较. 结果 地高辛标记探针杂交法检测出HC-Ⅱ阳性标本中HPV-16型40例,HPV-51型2例,HPV-56型2例,分别占HC-Ⅱ阳性标本的63.5%、3.2%和3.2%,HC-Ⅱ阴性标本中检测出HPV-16型1例;实时荧光定量PCR法检测出HC-Ⅱ阳性标本中HPV-16型39例,HPV-51型2例,HPV-56型2例,占HC-Ⅱ阳性标本的61.9%、3.2%和3.2%,HC-Ⅱ阴性标本中检测出HPV-16型1例;重复性检测显示两种方法检测4型HPV感染的变异系数(CV)为0～1.45%和0～1.50%,检测标本中4型感染的符合率为97.5% ～100%. 结论 PCR联合地高辛标记探针杂交法具有较好的灵敏度和特异性, 可能对于临床HPV分型检测有应用价值.     

白细胞介素-17调控类风湿关节炎滑膜细胞整合素分子表达与增殖作用研究

整合素(integrin)是由α、β 2个亚基构成的异二聚体,在脊椎动物中整合素受体家族包括至少17个α亚基和9个β亚基,共同组成超过25种不同的整合素[1-2].在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的滑膜细胞表面,以αv,α9,β1为主[3].     

宫颈涂片应用Giemsa染色对可疑沙眼衣原体包涵体的检测

<正> 鉴于我国目前对非淋菌性尿道炎主要病原体沙眼衣原体尚缺乏准确、快速、简便、价廉的检测手段,作者在上海某中心医院计划生育门诊,以未婚先孕要求终止妊娠的青年女性为对象,对沙眼衣原体感染进行检测。现将结果报告如下。     

人sCD40L基因的克隆及表达

目的 克隆人sCD40L基因片段，并在原核细胞中表达。方法 用RT－PCR技术，从激活的人外周血淋巴细胞总RNA中，扩增CD40L胞外区cDNA，并克隆至载体pGEM-T。测序验证后，转至载体PQE31中，并在大肠杆菌M15中进行表达，最后通过亲和层析柱得到纯化蛋白。结果 纯化所得的产物经Western blot证实，确为人sCD40L蛋白。结论 应用基因重组法构建了人sCD40L基因片段，并在原核细胞内成功地进行了表达，为今后进一步研究CD40L与凋亡、疾病的发病机制及临床治疗奠定了基础。     

复方猪苓多糖对小鼠免疫功能的调节

目的 比较猪苓多糖单、方剂对机体的免疫调节作用,验证中药制剂增强机体免疫功能和拮抗肿瘤的正向调节作用。方法 本实验旨在观察猪苓多糖单、方剂对环磷酰胺免疫抑制效应的调节作用。通过检测小鼠淋巴细胞转化功能、ＮＫ细胞杀伤活性、Ｔ细胞亚群和ＩｇＧ水平等指标来比较。结果 复方猪苓多糖具有：（１）提高免疫功能低下小鼠Ｔ,Ｂ淋巴细胞转化能力;（２）增强免疫功能低下小鼠ＮＫ细胞杀伤肿瘤细胞的能力;（３）上调免疫功     

丹参对去除神经生长因子引起的PC12细胞凋亡的影响

以往的研究认为神经细胞是不易发生细胞凋亡的细胞。近年的研究表明机体发育的整个阶段都伴随神经细胞的凋亡,在病理情况下神经细胞凋亡参与多种神经系统疾病的发生和发展。因此神经细胞凋亡的诱导或抑制一直是关注的热点之一。目前对药物影响细胞凋亡的研究尚不多见,本研究观察了丹参对去除神经生长因子(NGF)引起的 PC12细胞凋亡的影响,为临床进一步开展研究提供实验依据。材料与方法     

IL—10的表达和调控在角质形成细胞诱导免疫抑制中的作用

目的 探讨白细胞介素10（IL－10）的表达和调控,在角质形成细胞诱导免疫抑制作用中的意义。方法 从体外建立的混合表皮淋巴细胞培养体系（MELC）中,分离贴壁的角质形成细胞,并分析IL－10的表达来源。我们将抗1IL－10单抗引入培养体系中,观察其对角质形成细胞所诱导的免疫抑制的影响。结果 在混合培养体系中,IL－10主要来源于角质形成细胞。抗IL－10单抗可有效地阻断角质形成细胞所诱导的免疫换制效应。结论 IL－10的表达在角质形成细胞所诱导的免疫抑制效应中可能起重要作用。