大鼠IL-10基因真核表达质粒的构建及其在BRL细胞中的表达

目的:构建大鼠IL-10基因的真核表达载体,观察其在大鼠肝细胞系BRL中的表达,比较有无受体介导的脂质体的转染效率.方法:抽提外周血单个核细胞的总RNA,通过RT-巢式PCR方法获得大鼠IL-10的全长编码序列,定向克隆到真核表达载体pcDNA3.0,并进行限制性内切酶酶切及测序鉴定.将重组质粒分别通过脂质体TransfastTM与去唾液酸糖蛋白受体介导的脂质体PEIjet-gal转入大鼠肝细胞系BRL,通过RT-PCR方法检测IL-10 mRNA的表达,比较二者的转染效率,用ELISA法检测后者分泌型IL-10的表达.结果:经酶切及测序鉴定证实,重组质粒插入片段与大鼠IL-10的全长编码序列完全相符.发现受体介导的脂质体PEIjet-gal转染效率明显高于非受体介导的脂质体TransfastTM .通过受体介导的脂质体转染,BRL细胞获得高水平的IL-10表达.结论:成功地构建pcDNA3.0-IL-10重组质粒.受体介导的脂质体对肝细胞有较高的转染活性,可能成为IL-10基因治疗肝纤维化的有效转染载体.     

转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α在门静脉高压症发病中的意义

目的研究转化生长因子β1(TGFβ1)和肿瘤坏死因子α(TNFα)在门静脉高压症(门脉高压)发病中的作用。方法应用酶联免疫分析方法对50例门脉高压患者(其中20例伴腹水形成)、50例正常对照者进行TGFβ1和TNFα的检测。结果对照组血清TGFβ1和TNFα为12.32±3.29ng/ml,94.74±49.30pg/ml,门脉高压组分别为19.21±5.87ng/ml,140.85±53.47pg/ml(P<0.05);门脉高压伴腹水者为18.44±5.89ng/ml,167.34±38.62pg/ml,不伴腹水者为20.68±6.73ng/ml,101.54±28.24pg/ml,两者比较TGFβ1差异无显著性,而有腹水者TNFα高于无腹水者(P<0.05)。结论TGFβ1和TNFα水平升高在肝硬化门脉高压发病的病理生理机制中起作用。     

彩超诊断剖宫产术后腹壁疤痕子宫内膜异位症

目的探讨剖宫产术后腹壁疤痕子宫内膜异位症(简称腹壁内异症)的彩色多普勒超声表现。方法对8例经手术和病理证实的腹壁内异症的彩色多普勒超声结果进行回顾性分析。结果8例肿物均位于皮下脂肪层,直径为1.6～3.7cm;形态不规则,边缘不光滑,常呈毛刺状侵及腹直肌前筋膜;内部呈不均匀的低回声,可见一个或数个小的液性暗区;彩色多普勒显示肿物内部均可见点状和/或条状血流信号,为低速高阻的动脉血流。结论与临床资料相结合,彩色多普勒超声是诊断腹壁内异症的一种有价值的方法。     

胎心监护在孕妇产前应用的临床意义及护理体会

目的探讨胎心监护在孕妇产前应用的临床意义。方法对我科门诊孕妇进行常规胎心监护,共监护例数达1800例。结果胎心监护可以提高工作质量,降低了工作强度,既准确又节省人力。结论对孕产妇实施产前胎心监护,能够更加准确评估胎儿宫内情况,对预防新生儿窒息和胎儿窘迫具有重要作用。     

白细胞介素-10对肝星状细胞增殖及表达Fas/Fas配体的影响

研究拟通过观察外源性血小板衍生生长因子(PDGF)和白细胞介素-10(IL-10)干预后肝星状细胞(HSC)增殖及凋亡相关基因Fas/FasL表达的变化,进一步探讨PDGF致纤维化和IL-10抗肝纤维化的机制。     

肝病患者LN,PCⅢ,Ⅳ-C及PLD变化的意义

目的探讨慢性肝病患者血清LN，PCⅢ，Ⅳ－C及PLD变化的临床意义．方法慢性肝病患者99例，其中慢性HBV感染30例，肝硬变40例，肝癌29例及正常对照30例进行研究.血清LN，PCⅢ及Ⅳ－C含量用放射免疫测定，血清PLD采用生化比色法测定.结果肝硬变及肝癌患者血清LN，PCⅢ，Ⅳ－C，PLD均显著高于正常组及慢性HBV感染织（P均＜0．01），慢性HBV感染织PCⅢ也较正常组为高（P＜0．01），肝硬变患者血清PCⅢ，Ⅳ－C含量较肝癌组增高（P＜0.05）．肝硬变组各指标单项检测阳性率为PCⅢ＞LN＞Ⅳ－C＞PLD，联合检测以PCⅢ＋LN阳性率为高.肝硬变、肝癌与HBV感染单项指标检测结果存在部分重叠．结论LN，PC-Ⅲ，Ⅳ－C及PLD检测有助于肝硬变患者的临床诊断及慢性HBV感染的趋势判断；PCⅢ＋LN联合检测可提高肝硬变诊断的特异性．     

TIMP-1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的作用

目的　探讨TIMP 1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的意义及外源性IL 10抗肝纤维化作用的可能机制。方法　 60只SD雄性大鼠随机分为生理盐水对照组 (N组 ,8只 )、CCl4组 (C组 ,2 8只 )和IL 10干预组 (Ⅰ组 ,2 4只 ) ,建立下常对照、CCl4诱导肝纤维化模型及IL 10干预模型。造模第 7周和第 11周 ,采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉原位灌流消化 ,11%Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞 (HSC)。半定量RT PCR法检测各组HSC的TIMP 1mRNA表达水平 ;免疫细胞化学法检测培养贴壁后HSC的TIMP 1蛋白表达情况。结果　各组均检出TIMP 1的mRNA表达 ;造模第 7周 ,C组与I组的TIMP 1mRNA表达均高于N组 (P <0 .0 1) ,I组低于C组 (P <0 .0 1) ;造模第 11周 ,I组明显低于C组 (P <0 .0 1) ,C组TIMP 1的表达水平较第 7周进一步增加 (P <0 .0 1) ,而I组有所下降 (P <0 .0 5 )。免疫细胞化学法检测各组TIMP 1的蛋白表达变化与mRNA表达变化一致。结论　TIMP 1随着大鼠肝纤维化进展表达逐渐升高 ,IL 10通过抑制TIMP 1的表达 ,起抗纤维化作用     

改良式低位产钳术联合无保护会阴助产护理在初产妇中的应用效果

目的：探讨改良式低位产钳术联合无保护会阴助产护理在初产妇中的应用效果。方法选取本院2012年10月~2014年6月单胎初产妇214例,采用随机数字表法分为两组,每组107例。对照组采用改良式低位产钳术助产护理,观察组采用改良式低位产钳术联合无保护会阴助产护理,比较两组产妇的护理效果。结果观察组产妇第二产程、住院时间均明显短于对照组,产时出血量、产后出血量均明显少于对照组,新生儿Apgar评分明显高于对照组,并发症(会阴黏膜擦伤、Ⅰ度裂伤、Ⅱ度裂伤、尿潴留、感染)发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论改良式低位产钳术联合无保护会阴助产护理能提高分娩质量,可明显缩短产程时间和恢复时间,创伤小且并发症少,值得临床推广应用。