重组人血管生成素的生物学功能研究

为深入了解血管生成素的生物学作用，探讨其在免疫、造血、血管新生和神经方面可能的生物学功能，我们选择了多种细胞和组织进行实验分析ANG研究。结果表明：其对ECV304和COS7细胞具有促增殖作用，并可观察到明显的促ECV304细胞贴壁的作用；Ang具有明显地促KG—1a增殖的作用，其具体的分子机制有待于进一步的深入研究；Ang对造血干细胞形成集落没有作用，同时发现亦不存在与GM—CSF的协同作用；Ang缺乏直接对鸡胚背根神经节的作用，但可能对胶质细胞的生长有一定的影响。     

医学检验信息网络系统的建立与应用

本文介绍了医学检验信息网络系统的研究内容,主要包括医学检验仪器的数据采集和医学检验信息系统的开发,并且介绍了医学检验信息网络系统的应用体会.     

医学检验信息网络系统的建立与应用

本文介绍了医学检验信息网络系统的研究内容,主要包括医学检验仪器的数据采集和医学检验信息系统的开发,并且介绍了医学检验信息网络系统的应用体会。     

分化抑制因子Id2和Id3在肿瘤细胞中的表达

目的 研究分化抑制因子（Id）基因家族在不同肿瘤细胞及健康人外周单个核细胞（PBMC）中的表达情况，为探讨尉基因与肿瘤生长的关系提供实验依据。方法：提取血液病患者和健康人PBMC、人Burkitt’s B淋巴瘤细胞（Daudi）、人T淋巴细胞性白血病细胞（Jurkat）、人慢性髓性白血病细胞（K562）、人组织细胞性淋巴瘤细胞（U937）、人前列腺癌细胞（PC-3）、人胃癌细胞（SGC）、人肺癌细胞（SPC），人卵巢癌细胞（COC2）的细胞总RNA，根据Id2和Id3cDNA全长序列合成两对引物，运用RT-PCR方法，对以上细胞中Id2和Id3mRNA的表达进行半定量分析。结果：不同的尉基因在不同人肿瘤细胞中的表达具有一定差异性：Id2在健康人PBMC和各类肿瘤细胞中均呈普遍表达趋势；Id3在健康人淋巴细胞中未见表达或表达水平极弱，而在不同肿瘤细胞中的表达有差异．Id3在PC-3中的表达最高，K562中最低。不同的尉基因在同种细胞中的表达的差异性也较大，Id2mRNA的表达水平显著高于Id3mRNA的表达水平。Id2、Id3mRNA在血液病患者PBMC中均有不同程度的的表达。结论：不同的纪基因在不同的肿瘤细胞中有不同的表达水平，Id3的异常表达在肿瘤细胞增殖及肿瘤的发生中可能发挥一定的作用。     

蛋氨酸裂解酶的基因克隆及序列分析

目的：克隆蛋氨酸裂解酶（METase）中阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶（TVMGLl）基因，探讨重组METase（rMETase）对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法：从培养的阴道毛滴虫提取总RNA，以此为模板，利用RT-PCR获取TVMGL1基因，琼脂糖电泳分离纯化所得目的基因并克隆至T-Vector，ABI3730自动序列分析仪分析所得基因序列。结果：PCR产物经琼脂糖电泳，目的基因片段大小与预期大小相符；序列分析所得基因序列为1191bp，与国外报导的序列相符。结论：从培养的阴道毛滴虫中成功克隆出TVMGLVI基因，为METase抗肿瘤作用的研究奠定了基础。     

Midkine基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的 :构建妊娠中肾细胞因子 (Midkine ,MK)的原核表达载体并诱导其表达。方法 :利用RT PCR技术从人胎儿肾组织总RNA扩增MK成熟肽的DNA的编码序列 ,将扩增产物插入至温控表达载体pBV2 2 0中并转化E .coliDH 5α温度诱导表达。结果 :琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物的长度与目的片段相符。对重组质粒分析表明 ,插入片段的序列与GeneBank发表的人MK基因编码序列一致。SDS PAGE电泳显示 ,重组菌高效表达出一个相对分子质量约为 13× 10 3 的蛋白产物。结论 :人MK编码序列已被克隆至表达载体pBV2 2 0中并在大肠杆菌诱导表达。     

磷脂转运蛋白在毕赤酵母中的高效表达

为深入了解磷脂转运蛋白的结构和功能，从中国人胎肝组织总RNA成功克隆了磷脂转运蛋白成熟肽基因，所得磷脂转运蛋白基因通过同源重组整合至毕酵母细胞染色体的氧化酶AOX1基因中，甲醇诱导后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示诱导表达蛋白分子量约为75kDa，薄层扫描显示表达蛋白中酵母蛋白总量的28%，为大量制备重组磷脂转运蛋白奠定了基础。     

人Lipocalin型前列腺素D合成酶真核载体的构建及酵母表达菌株的建立

目的 :在毕赤酵母中表达人睾丸Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS) ,以利于生物学功能及临床应用研究。　方法 :用PCR的方法从质粒pGEX 2T htL PGDS上扩增出人睾丸L PGDS基因编码序列 ,构建该基因的酵母表达质粒 ;将表达质粒电转化毕赤酵母 ,甲醇诱导L PGDS的表达。　结果 :PCR扩增的L PGDS成熟肽基因编码序列克隆T载体后 ,经测序证明与所报道的人睾丸L PGDScDNA完全一致。对培养上清进行SDS PAGE分析显示 ,在相对分子质量为 2 70 0 0处有重组蛋白的表达 ,与理论值完全一致。　结论 :人Lipocalin型前列腺素D合成酶在毕赤酵母中获得了高效、分泌性表达     

血管形成素1基因转达染治疗兔缺血性心肌梗死的实验研究

目的利用兔心肌梗死模型，探讨心肌内直接注射血管形成素1（Ang1）重组腺病毒对缺血性心脏病的治疗作用。方法45只新西兰大白兔结扎冠状动脉（冠脉）制造心肌梗死模型，随机分为Ang1组、培养基（DMEM）组与半乳糖苷酶基因（LacZ）重组腺病毒组，心肌内分别直接注射Ang1重组腺病毒、DMEM和LacZ重组腺病毒。第7、14、28 d各组分别处死5只，以观测心肌梗死及血管新生情况，术前及处死前行超声心动图检查。结果结扎冠脉后7、14 d，Ang1组与LacZ组和DMEM组心肌梗死范围及新生毛细血管数差异均无显著性，术后28 d，Ang1组心肌梗死范围显著小于LacZ组和DMEM组〔分别为 (9.1±1.6)%对 (14.1±2.2)%和(13.8±3.0)%，P<0.01〕;而术后14、28 d新生毛细血管密度明显高于与LacZ组和DMEM组〔分别为(10.07±1.30)个/视野对 (5.52±1.09) 个/视野和(5.73±1.03) 个/视野，P <0.05及 (42.93±6.35) 个/视野对 (15.88±4.43) 个/视野和(13.17±1.29) 个/视野，P <0.01〕。心肌梗死发生28 d后各组的左室射血分数Ang1组改善幅度明显高于LacZ组和DMEM组〔分别为(65±6)%对 (40±5)%和(44±5)%，P<0.01〕。结论Ang1能促进兔实验性心肌梗死区新生血管形成，促进心肌梗死的修复，改善心脏功能.     

载脂蛋白B-100基因突变与脂蛋白代谢及动脉粥样硬化

载脂蛋白B-100(apoB-100)是低密度脂蛋白(LDL)的重要组分之一，对于维持LDL结构的完整及血清胆固醇水平的相对稳定起着重要的作用。apoB-100及其结构上的变化在高血脂及动脉粥样硬化方面所起到的作用和影响非常巨大。目前apoB-100的编码基因及蛋白质的部分结构已基本阐明，已发现了一些结构域和决定其主要生物功能的LDL受体结合部位中，能明显影响其结构与功能的基因突变点，即第3500氨基酸突变(R3500Q、R3500W)及第3531氨基酸突变(R3531C)。apoB-100结构上的变异均不同程度地减低apoB-100与LDL受体结合的能力，其中最为重要的变异是R3500Q，可直接导致个体高脂血症的发生。本文对apoB-100基因突变所造成其结构上的变异及这种变异与高脂血症、动脉粥样硬化的关系进行了综述。