肿瘤转移相关新基因MAG-1和MAG-2的克隆

目的 从两株人肺巨细胞癌细胞株中分离并鉴定人肺癌转移相关基因，为探讨肿瘤转移的分子机制奠定基础。方法 以细胞系PLA-801的两个具有不同转移潜力的亚克隆为模型，利用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization，SSH)技术克隆差异片段，对得到的片段经基因芯片筛选后测序并与GenBank数据库进行同源性比较，然后用Northern杂交和RT-PCR对其中的两条序列进行验证，并进行详细的生物信息学分析。结果 获得了79条在高转移细胞中高表达而在低转移细胞中低表达的序列，在与这些序列同源的己知基因中包括两条功能未知的全长cDNA序列BC006236和Bc002420，分别命名为MAC-1和MAG-2。MAG-l定位于4q21，由4个外显子组成，MAG-2定位于2q35，由9个外显子组成，基因长度分别为8．5kb和5．2kb。二条序列均有开放阅读框架(ORF)，编码产物以α螺旋为主并含有部分片层结构和无规卷曲。结论 MAG-l和MAG-2在高低转移性肺巨细胞癌细胞株中的表达具有显著差异，二者的表达与高转移潜能具有相关性，提示MAG-l和MAG-2可能参与肿瘤转移过程。     

靶向性溶瘤腺病毒对肝癌细胞的特异性杀伤研究

目前颇为看好的一类恶性肿瘤基因治疗方案是溶瘤腺病毒介导的癌细胞裂解疗法。针对肝细胞癌(HCC)的特异性溶瘤腺病毒(带甲胎蛋白启动子)多表现出对AFP阳性HCC细胞的选择性裂解。尽管占总数30％～40％的AFP阴性HCC细胞内仍有痕量的AFP启动子活性，但这些HCC特异性溶瘤腺病毒对其均无杀伤作用。Ido等用血管内皮生长因子上游的缺氧应答元件(HRE)与甲胎蛋白核心启动子AF0．3构成的杂合启动子HREAF指导了自杀基因。其在     

应用寡聚核苷酸芯片检测白血病与其同胞供者的白血病基因表达差异

为了应用寡聚核苷酸基因表达谱芯片研究9对白血病患者／同胞供受者对之间的基因表达谱差异以识别主要的疾病相关基因，将163条白血病／肿瘤发病相关基因组群列入芯片设计，合成寡核苷酸探针，用点样仪点片制成基因芯片。提取病初白血病患者及其供者的骨髓／外周血标本或其相对应的健康同胞供者经G-CSF动员后并经CS-3000细胞分离机采集的浓集的9份外周血造血干细胞的总RNA；分别逆转录并进行寡核苷酸探针杂交。结果表明：与其相应的正常供者配对比较，发现4例ALL患者中存在6条显著差异表达基因，其中上调表达基因5条(RIZ，STK-1，T—cell leukemia／lymphoma 1A，Cbp／p300，Opl8)，下调表达1条(hematopoietic proteoglycan core protein)；5例AML-M4和AML-M，患者中亦存在7条显著差异表达基因，其中上调表达6条(STAT5B，ligand p62 for the Lck SH2，CST3，LTC4S，myeloid leukemia factor 2，epb72)，下调表达1条(CCR5)。结论：选择有高度遗传关联的兄弟姐妹供受者对作为差异研究比照对象，利用寡聚核苷酸基因芯片技术进行疾病基因的筛查，筛查出了13条主要异常基因；进一步确认了上述基因在白血病分子发病机制中的关键性作用。     

用长距PCR法构建恶性疟原虫cDNA表达文库

目的 构建恶性疟原虫cDNA表达库。方法用Trizol试剂盒提取总RNA，以经修饰的SMART寡聚核昔酸引物－CDSⅢ引物直接用总RNA选择性地反转录成单链cDNA，再用长距PCR(LD)方法选择性地扩增出双链cDNA，经蛋白酶K消化和酶切后，用玻璃奶试剂盒回收200bp以上DNA片断，经与载体λTeiplEX2连接和蛋白抽提物体外包装，构建成cDNA库并对库进行了初步的鉴定。结果 构建了高滴度，高重组率的恶性疟原虫cDNA表达库。结论 所构建的疟原虫cDNA库适合进一步筛选抗疟原虫药物结合蛋白基因。     

山莨菪碱逆转抗氯喹伯氏疟原虫抗药性的作用

用钙拮抗剂山莨碱对感染抗氯奎伯氏疟原虫小鼠进行辅助治疗,高、中、低三个剂量均可明显抑制原虫生长,使小鼠存活时间延长,但剂量为５ｍｇ／ｋｇ．ｄ或４０ｍｇ／ｋｇ．ｄ时辅助治疗作用明显低于剂量为２０ｍｇ／ｋｇ．ｄ。山莨碱逆转伯氏疟原虫氯喹抗药性的作用存在一个最适剂量。     

驻昆某部水型伤寒暴发流行调查

1998-06应驻昆某部卫生部门请求,对该部营区内近期连续发生数10名不明热病人的疫情进行了流行病学调查。经听取疫情报告、病例访问、实地调查、采样检测、预防措施干预,现初步认为此系一次因饮用水源污染而致的伤寒暴发流行。1 材料与方法1.1 发病经过及病例特征 1998-05-24驻昆某部营区内发现首例不明发热病人,至06-22,共发生42例不明热病例。病例散布于院内13个单位,共用同一水源,皆收治于本系统医院。临床表现主要为持续发热(38～40℃)、头痛、全身乏力、食欲不振,半数病例伴有腹痛腹泻。查体多有相对缓脉,未见肝脾肿大     

氯喹的抗疟作用方式及其抗药性的产生机制

氯喹 (CQ)在 30年代合成后即作为安全、有效而价廉的一线抗疟药物被迅速广泛使用 ,直至 5 0年代末 6 0年代初在亚洲和南美证实了有抗性产生 ,非洲在 70年代末亦报道了恶性疟原虫 (P. falciparum)对氯喹的抗性 (CQR)。然而 ,氯喹作为抗疟药的作用机制研究了数十年 ,但仍有许多未阐明之处 ,而这一现状又为 CQR产生机制的阐明带来困难。本综述对氯喹的抗疟机制及 CQR的产生机制进行了讨论。 1　氯喹的抗疟作用方式1.1　疟原虫对氯喹的浓集　氯喹是一种弱碱 ,去质子态时能通过膜自由扩散 ,一旦穿过酸性食物泡膜就被双质子化而不能再通过膜…     

超声与造影剂促VEGF siRNA抑制鼻咽癌的实验研究

目的 以超声辐照与超声造影剂(BRl4与Levovist)微泡为研究对象,通过体外和体内实验对其促进siRNA转染的方法学进行研究.方法 将合成的2'.脱氧血管内皮(细胞)生长因子-siRNA(VEGF 2'-deoxysiRNA,VdsR)进行鼻咽癌细胞与荷瘤裸鼠动物实验.首先进行超声照射下的VdsR定点释放实验,然后以不同超声造影剂作载体,比较VdsR抑制肿瘤生长作用.结果 在体外实验中VdsR完全抑制鼻咽癌细胞表达VEGF.在动物试验中单纯超声照射显著增强VdsR导致的肿瘤抑制作用,而对随机序列siRNA没有影响.当加用BRl4微泡时则进一步增强VdsR导致的抑瘤作用,然而Levovist微泡则无显著影响.结论 超声照射和微泡造影剂BRl4可以显著增强siRNA转染的作用,具有分子靶向治疗的应用潜力.     

恶性疟原虫氯喹抗性机制的研究新进展

参照恶性肿瘤多药抗性(MDR)研究模式而发现的恶性疟原虫的pfmdr1基因不能完全解释其氯喹抗性,但通过氯喹敏感株HB3与氯喹抗性株Dd2杂交而发现的和氯喹抗性有关的cg2基因结合起来,或许能对恶性疟原虫的氯喹抗性作出较为满意的解释。恶性疟原虫的氯喹敏感株可被氯喹诱导发生细胞凋亡样改变而抗性株却不能,又为恶性疟原虫的氯喹抗性机制研究提供了新思路。