大肠杆菌O157：H7多克隆抗体纯化

目的 制备大肠杆菌O157:H7多克隆抗体,比较3种纯化方法对抗体性能的影响,为食品检验、临床和血清学检验O157:H7奠定基础.方法 应用传统方法制备大肠杆菌O157:H7多克隆抗体,利用盐析法、亲和层析法和抗原吸附法对其进行纯化,采用SDS-PAGE、Bradford法、ELISA等实验技术检测纯化后抗体的纯度、比效价、交叉反应性,从而比较3种纯化方法的纯化效果.结果 获得效价1:131072的大肠杆菌O157:H7抗血清.亲和层析法所得纯化产物纯度较高,抗体解链为分子量约55 kDa和25 kDa的蛋白,抗原吸附法所得产物纯度次之,盐析法所得产物的纯度较差,有多条杂蛋白条带.抗原吸附法所得纯化产物比效价较高为349.3,并且与其他5株细菌的交叉反应情况相对反应较小.结论 亲和层析法和抗原吸附法纯化抗体均有一定的优越性,抗原吸法得到的抗体使用性能较好.     

硒酸精氨酸对D-半乳糖诱导的衰老小鼠肝损伤的保护作用

目的 探讨硒酸精氨酸对D-半乳糖(D-gal)衰老小鼠肝功能的影响.方法 40只昆明种小鼠随机分成4组:正常对照组、衰老模型组、低硒组和高硒组.通过后颈背部皮下注射D-gal建立亚急性衰老模型,以灌胃方式加入硒酸精氨酸,连续处理6 w后检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)活性和碱性磷酸酶(AKP)活性,并对肝脏切片做HE染色,光镜下观察肝组织病理学变化.结果 硒酸精氨酸能显著降低AST、ALT和AKP活性(P＜0.01),明显减轻D-gal对小鼠肝细胞的毒性.结论 硒酸精氨酸对D-gal所致衰老小鼠的肝功能具有明显的保护作用,这种保护效应可能与硒酸精氨酸提高抗氧化酶活性,增强抗氧化防御机制有关.     

基于网络药理学及分子对接方法分析川贝母治疗肺炎的分子机制

目的：运用网络药理学分析方法和分子对接分析方法,分析川贝母治疗肺炎的分子机制,为后续研究提供理论依据。方法：根据已发表的文献和数据库及ADEM参数筛选川贝母的有效成分,在Swiss Target Prediction,Similarity ensemble approach等数据库上查找川贝母所有有效成分的靶点,在DisgeNet、GeneCards等数据库中查找肺炎的治疗靶点,通过韦恩图求靶点的交集即为川贝母治疗肺炎的治疗靶点,通过String数据库构建治疗靶点PPI网络图,运用Cytoscape3.8.0自带应用程序CytoNCA筛选出综合集中性前五的靶点即为川贝母治疗肺炎的核心靶点,在Metascape网站上进行靶点基因GO富集和KEGG通路富集,应用Cytoscape3.8.0构建有效成分和治疗肺炎靶点网络图,应用Discovery studio 2019中的Cdocker对选定有效成分和核心靶点进行分子对接。结果：共筛选出59种有效成分,包括生物碱类物质22种,有机酸类物质20种,核苷类物质8种,其他类物质9种,韦恩图筛选出100个川贝母治疗肺炎的靶点,经过集中性筛选选出川贝...     

硒酸精氨酸对衰老小鼠肝组织中脂肪酸组成的影响

<正>近代科学研究充分表明,硒可通过抑杀癌细胞、消除体内自由基、拮抗和降低许多元素和物质的毒性、增强机体免疫力、维持酶和某些维生素活性、参与激素的生理作用等生物学功能,从而有效防病抗衰[1]。有关研究表明,有机硒的安全性及吸收利用率明显好于无机硒[2]。     

硒酸软骨多糖对Hca-F荷瘤小鼠免疫功能的影响

植物多糖具有许多有益的治疗效果,如抗肿瘤、免疫调控、伤口愈合等.其机制被认为是通过调控天然免疫,特别是巨噬细胞的功能而达到的[1,2].但是对于动物来源的多糖,其研究相对较少.本实验室从猪软骨里提取了多糖,并进行了一系列的研究.     

软骨多糖及PDTC对肝癌细胞生长影响的初步研究

[目的]研究软骨多糖对人肝癌细胞BEL-7402形态、细胞周期及凋亡的变化；及加入核转录因子NF-κB抑制剂PDTC（吡咯烷二硫代氨基甲酸盐1后。软骨多糖对肝癌细胞的生长抑制及凋亡率影响的变化。[方法]采用HE染色和流式细胞术观察细胞形态和周期变化；利用MTT比色法和TUNEL试剂盒观察软骨多糖及PDTC对人肝癌细胞的抑制率及凋亡率的影响。采用免疫荧光染色方法观察Fas蛋白表达情况。[结果]软骨多糖作用后，HE染色发现细胞形态发生改变．并将细胞阻滞在S期，诱导细胞凋亡并升高Fas蛋白的表达，MTT结果显示，高浓度的PDTC（10μmol／L）在软骨多糖浓度较高时（10μg/mL、200μg/mL），抑制率与对照非常接近，在软骨多糖浓度较低时（50μg/mL）可以明显增强生长抑制率。TUNEL结果显示，与对照组相比，高浓度的PDTC在软骨多糖浓度较高时（100μg/mL、200μg/mL）实验组的细胞凋亡率均明显下降，而在软骨多糖浓度较低时（50μg/mL）变化不明显。[结论]软骨多糖能够诱导肝癌细胞凋亡，高浓度的PDTC在软骨多糖浓度较低时虽然对细胞增殖起明显的抑制作用．但诱导凋亡的作用不明显，高浓度的PDTC在软骨多糖浓度较高时可以拮抗软骨多糖对细胞的凋亡作用从而明显降低凋亡率。     

硒酸精氨酸对D-gal衰老小鼠细胞免疫功能的影响

目的：探讨硒酸精氨酸对D-gal衰老小鼠免疫功能的影响。方法：将试验小鼠分为正常组、模型组、低剂量给硒组（L-SeArg）和高剂量给硒组（H-SeArg），通过后颈背部皮下注射D-gal建立亚急性衰老模型，以灌胃方式加入硒酸精氨酸，观察硒酸精氨酸对脾指数、胸腺指数的影响，MTT法检测脾细胞增殖能力和NK细胞的杀伤活性、免疫荧光法观察CD40、CD40L的阳性表达率。结果：硒酸精氨酸能明显提高小鼠胸腺指数和脾指数，促进淋巴细胞转化，提高NK细胞的杀伤活性，增加CIM0、CD40L的阳性表达率。2个剂量给硒组中，低剂量硒酸精氨酸的影响最大，与模型组相比有统计学意义（P〈0．01）。结论：D-gal能导致小鼠细胞免疫功能下降，硒酸精氨酸能活化免疫细胞，提高小鼠机体的免疫力，延缓衰老。