表达反义单核细胞趋化蛋白-1的重组逆转录病毒对家兔动脉平滑肌单核细胞趋化蛋白-1基因表达的影响

为研究反义单核细胞真挚化蛋白－１转基因表达对单核细胞进入动脉壁的作用,首先,构建了表达反义单核细胞趋化蛋白－１基因的逆转录病道理毒重组体,并观察它在培养的细胞中的表达。将家多单核细胞趋化蛋白－１ｃＤＮＡ反向插入到ｐＬＮＣＸ,构成ＬＮＣＸ－ａｎｔｉ－ＭＣＰ－１重组病毒质粒。再将重组质粒转染Ψ－２细胞,继以Ψ－２细胞产生的病毒上清感染ＰＡ３１７细胞,取得Ｇ４１８ＰＡ３１７抗细胞克隆。上述细胞经扩增培养     

反义大鼠凝血酶受体基因的构建及其对主动脉血管平滑肌细胞增生的影响

凝血酶激活凝血酶受体引起的一系列细胞事件和内源性PDGF-A,bFGF的产生可能是血管病变发生发展过程中平滑肌细胞增生的重要因素。为进一步阐明血管损伤后平滑肌细胞增生的机理及探索有效治疗途径,针对凝血酶受体基因中一段包括转录起始点,翻译起始点,凝血酶结合和切割位点的序列作为靶序列,构建了凝血酶受体反义RNA重组表达载体pLXSN／ATR,并将其导入凝血酶刺激的动脉平滑肌细胞。结果表明重组基因转染能抑制凝血酶对大鼠平滑肌细胞DNA合成的刺激作用。提示序列特异的凝血酶受体反义重组基因的表达可以抑制凝血酶受体介导的血管平滑肌细胞增生。     

高脂血症家兔体内不同部位巨噬细胞载脂蛋白E mRNA表达的研究

高脂血症家兔体内不同部位巨噬细胞载脂蛋白ＥｍＲＮＡ表达的研究王宗立，许漫，段宏伟，张颖，赵三妹，夏人仪，佘铭鹏（中国医学科学院基础医学研究所病理研究室，北京１００００５）高脂血症时除单核细胞进入动脉内膜吞噬脂质外，全身各部位的巨噬细胞均可发生脂质沉积...     

表达反义单核细胞趋化蛋白-1的重组逆转录病毒对家兔动脉平滑肌单核细胞趋化蛋白-1基因表达的影响

为研究反义单核细胞趋化蛋白－１ 转基因表达对单核细胞进入动脉壁的作用,首先构建了表达反义单核细胞趋化蛋白－ １ 基因的逆转录病毒重组体,并观察它在培养的细胞中的表达。将家兔单核细胞趋化蛋白－ １ ｃＤＮＡ 反向插入到ｐＬＮＣＸ,构成ＬＮＣＸ－ａｎｔｉ－ ＭＣＰ－１ 重组病毒质粒。再将重组质粒转染φ－２ 细胞,继以φ－ ２ 细胞产生的病毒上清感染ＰＡ３１７细胞,取得Ｇ４１８ＰＡ３１７ 抗细胞克隆。上述细胞经扩增培养,收集病毒上清并感染ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞后进行检测。结果发现,病毒的滴度为５．６×１０７ ＣＦＵＬ,感染的ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞中有重组病毒的整合。重组病毒感染培养的家兔动脉平滑肌细胞后,用聚合酶链反应检测发现,感染的平滑肌细胞基因组ＤＮＡ中有重组病毒整合;ＲＮＡｓｌｏｔ 杂交结果显示,感染的平滑肌细胞中有反义单核细胞趋化蛋白－１ 的表达,与未感染的平滑肌细胞相比,感染的平滑肌细胞中单核细胞趋化蛋白－ １ ｍＲＮＡ 的表达明显受到抑制。结果提示,反义单核细胞趋化蛋白－ １ 逆转录病毒表达载体在培养的动脉平滑肌中能表达反义基因并抑制靶基因的表达,为进一步开展体内实验研究奠定了基础     

载脂蛋白A－Ⅳ和实验性高脂血症时平滑肌细胞内的胆固醇转运

通过建立高胆固醇血症兔模型，观察载脂蛋白（ａｐｏ）Ａ－Ⅳ和ａｐｏＡ－Ⅳ／卵磷脂（ＰＣ）脂质体等对高胆固醇血症兔主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）内胆固醇的清除及对血清卵磷脂胆固醇酰基转移酶（ＬＣＡＴ）的激活作用。结果显示，ａｐｏＡ－Ⅳ／ＰＣ脂质体清除ＳＭＣ内胆固醇及激活ＬＣＡＴ的能力与ａｐｏＡ－Ⅰ／ＰＣ脂质体、高密度脂蛋白（ＨＤＬ）相似。提示，ａｐｏＡ－Ⅳ与ａｐｏＡ－Ⅰ一样，在胆固醇逆向转运过程中起重要作用；ａｐｏＡ－Ⅳ与ＰＣ人工合成的脂质体有可能代替天然ＨＤＬ而发挥防治动脉粥样硬化的作用。     

A study of apolipoprotein A-IV genetic polymorphism, serum lipids and lipoproteins in Beijing habitants.

ＡｓｔｕｄｙｏｆａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＡ┐ＩＶｇｅｎｅｔｉｃｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ｓｅｒｕｍｌｉｐｉｄｓａｎｄｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎＢｅｉｊｉｎｇｈａｂｉｔａｎｔｓＷａｎｇＺｈｏｎｇｙａｎ王中燕，ＳｈｅＭｉｎｇｐｅｎｇ佘铭鹏，ＸｕＭａ...     

载脂蛋白/卵磷脂脂质体对培养的平滑肌细胞内胆固醇的清除作用

目的：探讨载脂蛋白ＡＩ／卵磷脂脂质体和载脂蛋白ＡＩＶ／卵磷脂脂质体在胆固醇逆向转运过程中的作用和意义。方法：应用脱氧胆酸透析方法，制备载脂蛋白ＡＩ／卵磷脂脂质体和载脂蛋白ＡＩＶ／卵磷脂脂质体，观察它们对培养的胎儿主动脉平滑肌细胞内３Ｈ－胆固醇的清除能力。结果：载脂蛋白ＡＩ／卵磷脂脂质体或载脂蛋白ＡＩＶ／卵磷脂脂质体的胆固醇清除率与高密度脂蛋白相似，且明显大于单独的载脂蛋白ＡＩ或载脂蛋白ＡＩＶ（Ｐ＜０．００１）；当两种脂质体以不同比例混合时，其清除率随混合物中载脂蛋白ＡＩ／卵磷脂脂质体含量的增加而增大。结论：寻找适当比例混合的载脂蛋白ＡＩ／卵磷脂脂质体和载脂蛋白ＡＩＶ／卵磷脂脂质体有望明显增强单一脂质体对平滑肌细胞内胆固醇的清除作用。     

北京和广州高脂血症及正常人群中血脂及载脂蛋白的比较

根据近２０年的流行病学调查结果提示，通过比较北京和广州人群的血脂成分，来了解两地区人群血脂组成的差异，为两地区心血管疾病不同发病率的原因寻找线索。自北京和广州现场采集高脂血症及对照人群的血清样本，以酶法或免疫透射比浊法测定，总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）、ＨＤＬ２Ｃ、ＨＤＬ３Ｃ、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬＣ）、载脂蛋白ＡＩ、ＡⅥ及Ｂ，并分组进行统计学显著性测验。结果发现两地区的高脂血症患者都以高甘油三酯血症为主，高脂血症组的ＨＤＬＣ水平显著低于对照组，尤以ＨＤＬＣ亚类水平低。高脂血症组载脂蛋白Ｂ和ＡⅥ高于对照组，而载脂蛋白ＡＩ无差异。北京与广州两现场     

反义MCP-1转染兔平滑肌细胞及对其生长的影响

构建逆转录病毒载体反义单核细胞趋化蛋白1（LUCX-Anti-MCP－1）表达质粒,利用阳离子脂质体（Lipofectamine）将反义MCP－1导入体外培养的平滑肌细胞,通过PCR、Northern杂交检测外源基因的转染及其mRNA表达情况。应用3H胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）掺入法了解反义MCP－1基因对细胞生长的影响．结果显示：Lipofectamine可以成功的将反义MCP－1基因导入体外培养的主动脉平滑肌细胞中,并实现外源基因的转录表达。且反义MCP－1基因对体外培养的平滑肌细胞生长没有影响。