大鼠慢性肾衰竭模型的建立及体会

目的观察应用大鼠制备慢性肾衰竭模型的效果。方法采用5/6肾切除方法制备慢性肾衰竭模型,分别于术后3周和8周后观察肾功能以及肾脏病理变化。结果造模成功率均达83%以上。手术组3周后出现肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)升高,8周后血清钙降低,血清磷、肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平明显升高,与对照组比较均有统计学意义;手术组镜下出现典型肾小球、肾小管-间质损伤的表现,系膜/肾小球面积比值、肾小管-间质损伤指数与对照组比较有统计学意义。结论应用5/6肾切除可制备稳定的慢性肾衰竭动物模型。     

酪氨酸蛋白激酶在β受体激动增加eNOS活性信号通路中的作用

体外培养人脐静脉内皮细胞;采用同位素两步色谱法检测eNOS活性,观察P11(特异性阻断剂Ty_phostin23(T23,1×10-4mol/L)及其无活性衍生物Typhostinl(T1,1×10-4 mol/L)与人脐静脉内皮细胞孵育10min,再与异丙肾上腺素(ISO,1×10-6mol/L)孵育30 min后eNOS活性变化.结果ISO与人脐静脉内皮细胞孵育30 min后eNOS活性明显增加(30.7±3.9)%,P＜0.001;Typhostin23阻断PTK后,ISO诱导的eNOS活性增加受到明显抑制,P＜0.001,而Typhostinl不影响ISO激活eNOS的程度(28.9±3.75)%,P0.05.证实酪氨酸蛋白激酶参与了ISO激活eNOS活性的过程.     

老年冠心病合并OSAHS患者nCPAP治疗前后血清hs-CRP及P-选择素水平变化

将45例老年冠心病合并中重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者分为两组,两组均予内科常规治疗,观察组加行经鼻持续气道正压通气(nCPAP)治疗.检测两组治疗前及治疗30 d后血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)和P-选择素水平.结果 观察组治疗后血清hs-CRP和P-选择素较治疗前及对照组显著下降(P均＜0.001),对照组无明显变化(P＞0.05).提示nCPAP治疗可降低老年冠心病合并中重度OSAHS患者血清hs-CRP及P-选择素水平;对改善冠心病病情有益.     

辛伐他汀对老年冠心病内皮素、一氧化氮及可溶性血管细胞黏附分子-1的影响

目的　探讨辛伐他汀对老年冠心病患者血清内皮素 (ET)、一氧化氮 (NO)及可溶性血管细胞黏附分子_1(sVCAM_1)水平的影响。方法　 6 4例老年冠心病患者随机分为安慰剂组和辛伐他汀组 (10mg/d ,8周 ) ,分别对两组患者测定用药前与用药 8周后血清ET、NO、sVCAM_1含量及总胆固醇 (TC)水平。结果　①辛伐他汀组服药 8周后血清ET、sVCAM 1、TC含量明显低于治疗前 (P <0 0 1) ,NO含量明显高于治疗前 (P <0 0 5 ) ;安慰剂组服药前后ET、NO、sVCAM 1及TC水平变化无统计学意义 (P >0 0 5 )②辛伐他汀组患者血清sVCAM 1水平的降低与血浆TC含量的降低无明显相关性。结论　辛伐他汀不仅降低老年冠心病患者血浆TC含量 ,且降低血清中ET、sVCAM 1水平 ,但升高NO水平     

糖基化终产物对人脐静脉内皮细胞黏附分子表达和黏附功能的影响及其机制

目的探讨糖基化终产物（AGEs）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）血管细胞黏附分子1（VCAM-1）表达和黏附功能的影响及其机制。方法以D-葡萄糖和牛血清白蛋白在37℃条件下制备AGEs。胶原酶法分离HUVECs并加以培养。用流式细胞术测定HUVECs受AGEs干预后VCAM-1表达水平。按Esposito’s法进行HUVECs外周血单核细胞（PBMCs）黏附试验，Chen氏法计算HUVECs—PBMCs黏附率。用[γ-32P]ATP液闪计数技术测定受AGEs干预后HUVECs PKC活性的变化。结果AGEs可明显诱导HUVECs VCAM-1表达，呈剂量、时效依赖关系。HU—VECs—PBMCs黏附率的变化与VCAM-1的表达水平平行。蛋白激酶C（PKC）抑制剂可明显降低AGEs所致的VCAM-1表达增加及HUVECs—PBMCs黏附率增加。HUVECs受AGEs干预后其PKC活性明显升高。结论AGEs能使人血管内皮细胞VCAM-1表达增加和黏附功能增强，其机制是部分通过增加细胞内PKC的活性来实现。     

sVCAM-1与2型糖尿病血管并发症关系的临床探讨

目的　探讨血清中可溶性血管细胞黏附分子 1(sVCAM 1)与 2型糖尿病 (T2DM)血管并发症的关系。　 方法 　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 86例T2DM患者和 40例健康对照者血清中sVCAM 1的水平。　 结果　所有T2DM患者血清中sVCAM 1水平显著高于健康对照组 (P <0 0 1) ;T2DM患者微血管病变组sVCAM 1水平明显高于无血管病变组 (P <0 0 5 ) ;T2DM患者大血管病变组sVCAM 1水平明显高于微血管病变组 (P <0 0 5 )。　 结论　sVCAM 1参与了T2DM血管并发症的发生发展。     

老年高血压病合并OSAHS患者nCPAP治疗前后血小板活性及P选择素水平的变化

目的观察经鼻持续气道正压通气(nCPAP)治疗对老年高血压病合并中重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血小板活性及P选择素的影响。方法入选老年高血压病合并中重度OSAHS患者45例,按患者意愿及对nCPAP耐受情况,分为nCPAP治疗组及对照组,检测治疗前及治疗30d后血小板活性和P-选择素水平。结果nCPAP治疗30d后血清血小板活性和P-选择素较治疗前显著下降(P<0·001),对照组无明显变化(P>0·05)。结论nCPAP治疗可降低老年高血压病合并中重度OSAHS患者血小板活性及P-选择素水平。     

腺苷酸环化酶及蛋白激酶A在a受体激动增加eNOS活性信号通路中的作用

目的 阐明a受体激动增加内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性信号通路中腺苷酸环化酶(AC)及蛋白激酶A(PKA)的作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞;运用同位素两步色谱法([3H]-L-精氨酸转化法)检测eNOS活性.本研究设置空白对照组、AC组和PKA组,每组因素下再分ISO及BSS两个干预因素组,观察AC特异性阻断剂SQ-2256(5×10-5 mol/L)及PKA特异性阻断剂H-89(1×10-7 mol/L)分别与人脐静脉内皮细胞孵育10 min,再与异丙肾上腺素(ISO)孵育30 min后eNOS活性变化.结果 ISO明显增加eNOS活性(30 7±3 9)%,P<0 01;分别阻断AC、PKA,ISO诱导的eNOS活性增加均受到抑制(12 1±3 53)%、(4 73±2 19)%,P<0 01.结论 ISO激活eNOS活性的信号通路上,AC和PKA均有参与.     

老年冠心病合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者的血小板活性变化

根据睡眠呼吸暂停指数，将78例老年冠心病患者分为冠心病组及合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）组，另选30例健康同龄人作为对照组，测定各组血浆血小板聚集率（PAG）和P-选择素水平，了解其血小板活性变化。结果合并OSAHS 34例（43．6％）；与冠心病组及对照组比较，合并OSAHS组患者的PAG和P-选择素均明显升高（P〈0．01）。提示老年冠心病患者合并OSAHS的发生率较高，且该类患者血小板活性增加。     

β受体激动增加人脐静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶活性的细胞内机制

背景:β-肾上腺素能受体激动可增加内皮型一氧化氮合酶活性的细胞信号转导通路,对于揭示β-肾上腺素能系统调控血管张力的生理学机制有重要价值,既往实验显示异丙肾上:腺素激活内皮型一氧化氦合酶与内皮型一氧化氮合酶蛋白磷酸化有关.目的:探讨β-肾上腺素能受体激动增加人脐静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶活性信号转导通路中可能涉及的蛋白激酶.设计:对比观察.单位:郑州大学第一附属医院老年病科.材料:实验于2006-09/2007-06在河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室完成.实验材料为郑州大学第一附属医院妇产科住院的健康顺产或剖宫产患者自愿捐献的新生儿无血肿、夹痕的脐带.所有患者对实验均知情同意.实验方案经医院伦理委员会批准.主要试剂:β-肾上腺素能受体激动剂异丙肾上腺素、磷脂酰肌醇3激酶抑制剂(Wortrnannin)、蛋白激酶A抑制剂(H-89)、3H.L-arginine(美国SIGMA公司).方法:设置空白对照组、H-89组、Wortmannin组及H-89 Wortmannin组,每组因素下再分异丙肾上腺素及空白对照两个干预因素组,每小组三复管.观察H-89和Womnannin分别与人脐静脉内皮细胞孵育 10 min,再与异丙肾上腺素孵育30 min后内皮型一氧化氮合酶活性变化.同位素二步色谱法测定3H-L-citrulline的产量反映内皮型一氧化氮合酶活性,人脐静脉内皮细胞上3H-L-citrulline的产量相对空白对照组以百分比形式表达.主要观察指标:各组内皮型一氧化氮合酶活性变化.结果:①内皮型一氧化氮合酶基础活性为每微克蛋白(3 085.62±272.72)mBq,与空白对照组比较,异丙肾上腺素可明显增加内皮型一氧化氮合酶活性(30.72±3.91)%(P<0.001),单纯H-89及Wortmannin不改变内皮型一氧化氮合酶基础活性(0.44±1.00)%,(0.36±1.47)%(P>0.05).②预先加入H-89及Wortmannin后再加入异丙肾上腺素,可见异丙肾上腺素增加内皮型一氧化氮合酶活性的作用受到明显抑制(4.73±2.19)%,(17.35±3.72)%(P<0.001).③联合阻断蛋白激酶A和磷脂酰肌醇3激酶对异丙肾上腺素增加内皮犁一氧化氮合酶活性的抑制作用(4.92±0.99)%,与单纯阻断蛋白激酶A的作用类似,无累加效应(P>0.05).结论:β-肾上腺素能受体激动剂异丙肾上腺素能激活内皮型一氧化氮合酶活性的信号通路,在此过程中蛋白激酶A及磷脂酰肌醇3激酶均有参与.