宜兴市胃癌手术患者临床特征分析1022例

目的:探讨江苏省宜兴市地区胃癌病例临床特征的变化趋势,为防治胃癌提供依据.方法:宜兴市人民医院1999-2006经病理证实的胃癌手术患者1022例,分析逐年收治病例的临床病理特征及变化趋势,按手术时间先后分成两组:1999-2002组(A组)和2003-2006组(B组).比较两组病例性别、年龄、肿瘤大小、发生部位、分化程度、临床分期和术后辅助化疗情况的差异结果:两组患者发病部位均以胃体、贲门和胃窦处为常见.与A组相比,B组胃癌发生于胃体处患者比例明显下降(X2=21.59,P＜0.05),而发生于胃角的比例升高(X2=33.16,P＜0.05).两组胃癌患者肿瘤分化程度都以低分化及中分化为主,B组低分化比例较A组明显下降(X2=46.11,P＜0.05),而中分化胃癌比例明显升高(X2=37.68,P＜0.05).两组病例的肿瘤直径和pTNM分期构成比方面均无显著差异.结论:宜兴市胃癌发病人数呈逐年上升趋势,而其肿瘤细胞的分化呈逐步升高的趋势.     

JWA抑制人肝癌细胞的黏附和迁移侵袭潜能

探讨JWA蛋白在人肝癌细胞黏附和迁移侵袭过程中的作用?方法:应用小干扰RNA下调低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97L中JWA蛋白表达水平,MTT法检测MHCC97L增殖;应用细胞小室检测MHCC97L在JWA不同蛋白水平时的迁移及侵袭潜能变化;黏附试验检测MHCC97L细胞黏附能力变化?结果:研究发现人肝癌细胞株MHCC97L中的JWA表达水平下降后,肝癌细胞迁移及侵袭能力明显增强,细胞对细胞外基质纤维连接蛋白的黏附力增加?结论:RNA干扰JWA引起肝癌细胞的JWA蛋白表达水平下降,导致肝癌细胞的黏附?迁移及侵袭能力增强,结果提示JWA可能抑制人肝癌细胞侵袭和转移?     

沉默BRG1基因对人胶质瘤细胞增殖的影响及其机制北大核心CSCD

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默胶质瘤细胞BRG1基因表达对其增殖的影响及其机制。方法化学合成BRG1 siRNA,脂质体介导转染胶质瘤U251和U87细胞。CCK-8细胞增殖实验检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期变化,Western blot检测BRG1、cyclin家族、CDK抑制剂蛋白表达水平。结果转染BRG1 siRNA可以有效减少胶质瘤U251和U87细胞BRG1表达,细胞增殖下降,G1期细胞增加。BRG1沉默后cyclin D1和cyclin B1表达降低,CDK抑制剂p21和p27没有明显变化。结论沉默胶质瘤细胞BRG1表达影响细胞周期蛋白使细胞停滞在G1期,最终抑制胶质瘤细胞增殖。     

KIF4A在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的：探讨人结直肠癌组织中染色体驱动蛋白KIF4A的表达及其临床意义。方法：收集110例手术切除的结直肠癌及相应癌旁5 cm以上结直肠黏膜组织标本,采用免疫组织化学方法检测其中KIF4A的表达情况,并分析KIF4A的表达水平与结直肠癌患者临床病理特征及其预后之间的关系。结果：结直肠癌组织中KIF4A的表达显著高于癌旁5 cm以上结直肠黏膜组织（P < 0.001）;KIF4A的表达水平与结直肠癌患者的分化程度（P=0.023）、淋巴结转移（P=0.020）、远处转移（P=0.032）、TNM分期（P < 0.001）和血清癌胚抗原（CEA）水平（P=0.014）有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小等无关（P > 0.05）。在随访的110例结直肠癌患者中,Kaplan?Meier生存曲线显示,KIF4A高表达组的5年生存率明显低于KIF4A低表达组（P < 0.05）。单因素生存分析显示,KIF4A表达程度、肿瘤分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期及血清CEA水平与结直肠癌患者术后生存时间相关。多因素COX比例风险回归模型进一步分析显示,KIF4A表达水平、TNM分期、淋巴结转移和远处转移为结直肠癌患者预后的独立危险因素。结论：KIF4A在结直肠癌组织中高表达,并且其高表达与结直肠的侵袭转移密切相关,KIF4A对于术后结直肠癌患者的预后评估具有参考价值。     

siRNA对胃癌细胞增殖抑制及其机制的探讨

目的:探讨siRNA对胃癌BGC823和MGC803细胞中Cullin1 (Cul1)基因表达、细胞增殖的影响及其分子作用机制.方法:体外化学合成Cul1 siRNA序列,在siLentFect Lipid Reagent介导下转染2种胃癌细胞.蛋白质印迹法检测Cul1、Cyclins和CDK抑制剂蛋白表达,CCK8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期.结果:转染Cul1 siR-NA后胃癌BGC823和MGC803细胞中Cul1蛋白表达分别下调39％和84％,Cyclin D1下调59％和62％,Cyclin E下调47％和54％,而p27蛋白表达上调52％和23％,但p21蛋白表达无明显变化.Cul1干涉后24h2种胃癌细胞的增殖能力下降(P＜0.01),48和72 h下降更明显,P＜0.01.Cul1干涉后3和6 hG1期细胞比例较对照组下降缓慢(P＜0.01),而Sub-G1期Cul1干涉组与对照组差异无统计学意义.结论:Cul1 siRNA可有效的干涉胃癌BGC823和MGC803细胞中Cul1基因的表达,Cul1干涉后可能通过影响Cyclins和CDK抑制剂蛋白表达从而使细胞周期停滞在G1期,最终能明显抑制胃癌细胞的增殖.     

RUNX3参与抑制人前列腺癌迁移和血管发生

目的研究RUNX3基因对前列腺癌的发生与迁移的影响,并探讨其分子作用机制。方法运用肿瘤组织芯片（tissue microarray,TMA）技术评估RUNX3在前列腺癌发生过程中的作用;分别用RUNX3的真核表达载体pFlag—RUNX3和对照载体pFlag—control转染人前列腺癌细胞系PC3和DU145细胞;细胞迁移实验、细胞侵袭实验和微血管形成实验分别检测RUNX3基因高表达对2种前列腺癌细胞迁移、侵袭和促血管生成能力的影响;利用RT—PCR和Western blot检测RUNX3基因表达后对2种前列腺癌细胞中基质金属蛋白酶抑制因子-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2）和基质金属蛋白酶-2（metalloproteinase-2,MMP-2）mRNA和蛋白表达的影响;明胶酶谱实验和ELISA实验检测RUNX3基因表达后对2种前列腺癌细胞分泌活性MMP-2和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的影响。结果相较于癌旁组织,RUNX3在前列腺癌组织中异常低表达,且与肿瘤分级有关。过表达RUNX3会上调TIMP-2、抑制MMP-2的表达与激活,从而抑制前列腺肿瘤细胞的迁移与侵袭。在前列腺细胞中抑制RUNX3表达会破坏TIMP-2和MMP-2之间的平衡,沉默TIMP-2会抑制MMP-2的表达。恢复RUNX3表达会降低VEGF的分泌,从而抑制内皮细胞生长和血管生成。结论RUNX3通过TIMP-2和VEGF通路对前列腺癌产生抑制作用。     

RUNX3基因对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 研究RUNX3基因对乳腺癌细胞迁移及侵袭的影响,并探讨其分子作用机制.方法 分别用RUNX3的真核表达载体pFlag-RUNX3和对照载体pFlag-control转染乳腺癌MDA-MB-231、BT-549细胞,CCK-8细胞增殖实验检测RUNX3基因高表达后对2种乳腺癌细胞增殖的影响;细胞迁移和侵袭实验检测RUNX3基因高表达对2种乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;人类肿瘤转移PCR芯片研究RUNX3基因高表达后乳腺癌细胞中转移相关基因的表达水平; RT-PCR和Western blot方法检测RUNX3基因表达后对2种乳腺癌细胞中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA和蛋白表达的影响;明胶酶谱实验检测RUNX3基因表达后对2种乳腺癌细胞分泌活性MMP-2的影响.结果 在2种乳腺癌细胞中过表达RUNX3能够抑制细胞的迁移和侵袭能力.在84个肿瘤转移相关基因中MMP-2受RUNX3的影响最显著.结论 RUNX3通过MMP-2通路调节乳腺癌细胞的迁移与侵袭.     

BRG1对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制探讨

目的探讨沉默BRG1基因对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法体外化学合成BRG1小干扰RNA（siRNA）和Control siRNA（si—Ctr1）,脂质体介导转染乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞,Transwell迁移实验和侵袭实验观察沉默BRG1基因对2种乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响,明胶酶谱实验检测基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）变化,Westernblot检测基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2）及MMP-2蛋白表达。结果转染BRG1 siRNA可以有效减少乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞BRG1的表达,细胞迁移和侵袭能力下降。BRG1沉默后TIMP-2表达升高,MMP-2表达下降且酶活性降低。结论BRG1沉默后通过上调TIMP-2抑制MMP-2的表达,破坏TIMP-2／MMP-2平衡,最终抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭能力。     

RNA干扰对胃癌细胞Cullin1基因表达及细胞黏附的抑制作用

目的 探讨小干扰RNA（siRNA）对胃癌BGC823和MGC803细胞中Cullin1（Cul1）基因表达及细胞黏附力的影响.方法 体外化学合成Cul1 siRNA（si-Cul1）序列,同时合成Control siRNA（si-Ctrl）作为对照,在siLentFect Lipid Reagent介导下转染胃癌BGC823和MGC803细胞,Western blot检测Cul1蛋白及Src和FAK蛋白表达水平,用fibronectin包被96孔板行细胞黏附分析.结果 Cul1 干涉后胃癌BGC823和MGC803细胞株中Cul1、Src和FAK蛋白的表达均下降,同时胃癌细胞黏附于fibronectin包被板的能力降低.结论 Cul1 siRNA可以有效干涉胃癌BGC823和MGC803细胞中Cul1基因的表达,Cul1干涉后可能通过下调Src和FAK的表达水平进而降低胃癌细胞的黏附能力.