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目的旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建ANXA2敲除的A549细胞,并探索ANXA2敲除对流感病毒复制的影响。方法本研究设计了3对靶向ANXA2基因外显子的特异性sgRNAs,分别将sgRNAs构建到LentiCRISPRv2载体上获得重组质粒,与辅助质粒共转染293T细胞包装成慢病毒后感染A549细胞,通过嘌呤霉素压力及有限稀释法筛选ANXA2基因敲除的单克隆细胞株,用靶基因测序及Western-blot验证ANXA2的敲除效果,并通过CCK-8试验比较ANXA2敲除细胞和野生型A549细胞的细胞活力。再分别用人流感病毒WSN(H1N1)和禽流感病毒SD98(H9N2)感染ANXA2敲除和野生型A549细胞,经TCID_(50)检测ANXA2敲除对流感病毒复制的影响。结果成功获得了ANXA2敲除的A549细胞系,且与野生型A549细胞相比,细胞活力无显著差异;ANXA2敲除后WSN(H1N1)和SD98(H9N2)流感病毒的病毒滴度均升高,其中ANXA2对SD98(H9N2)流感病毒的影响要大于WSN(H1N1)。结论本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了ANXA2敲除的A549细胞,并发现ANXA2敲除促进了流感病毒的复制,本研究为流感病毒复制和致病机制的研究奠定了基础。 相似文献
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H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)是危害家禽养殖的主要病原体之一,其不仅制约家禽养殖业的健康发展,而且表现出对人类较强的传染性和较高的致死率,严重威胁公共卫生安全。2013年我国首次报道人类感染H7N9 AIV事件,病毒溯源发现家禽体内存在H7N9 AIV,但无明显症状。2017年,H7N9 AIV出现变异株,表现出对家禽的高致病性,随后我国推出H5/H7二价苗,并在全国实施家禽强制免疫接种,有效控制了H7N9 AIV在我国家禽中的流行以及人类感染事件的发生,成为我国控制人兽共患传染病的成功案例。由于我国家禽养殖和AIV的复杂性,全面和持续的流行病学监测对于H7N9禽流感的防控仍然至关重要。本文针对2013年至今H7N9 AIV的流行特征、遗传变异特点及疫苗研究等内容作简要论述,以期为禽流感的预防和控制提供参考。 相似文献
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禽流感是一种主要感染禽类且部分具有感染哺乳动物能力的传染病。禽流感病毒亚型众多,流行广泛,给人类生产生活带来极大影响。随着低致病性禽流感感染人事件的增多,低致病性禽流感病毒逐渐引起公众的关注。H4禽流感病毒作为低致病性禽流感的优势亚型,毒株数量众多且分布地区广泛,但受到的关注以及研究较少,相关研究多为进化和分子生物学特征分析,公众对其认知有限。为了更好的了解H4亚型AIV的流行与进化,探讨其致病、跨种传播潜力,明确H4亚型AIV的潜在公共卫生风险。本文论述了H4亚型AIV的流行、宿主感染分布、病毒的进化与变异,围绕其变异潜力和致病力增强现状进行归纳分析,以期提高公众对LPAIV的认知,为H4亚型AIV综合防控提供科学依据。 相似文献
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<正>新型冠状病毒感染是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的一种侵害人体多系统的急性呼吸道传染病,部分患者会出现新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎),而且出现了与之相关的并发症,其中肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)已经被确定为感染后的严重并发症之一[1]。 相似文献
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