人核因子κBp65核定位信号缺失突变对A549细胞恶性表型的影响

目的鉴定人核因子κB(NF-κB)p65核定位信号(NLS)缺失突变质粒即pc DNA3.1(+)-NF-κBp65ΔNLS(简称NF-κBp65ΔNLS)的表达功能,以及其对低表达NF-κBp65的A549细胞株即A549/NF-κBp65 shRNA细胞增殖、迁移和粘附能力的影响。方法培养人A549/NF-κBp65 shRNA细胞株,分为对照组、转染pc DNA3.1(+)组、转染NF-κBp65ΔNLS组。应用间接免疫荧光、实时荧光定量-PCR和Western blot技术检测NF-κBp65的细胞内定位及mRNA、蛋白表达水平的变化;应用MTT、Transwell和细胞粘附实验分析转染NF-κBp65ΔNLS质粒对A549/NF-κBp65 shRNA细胞增殖、迁移、粘附能力的影响。结果成功构建人NF-κBp65ΔNLS真核表达质粒。转染NF-κBp65ΔNLS质粒的A549/NF-κBp65 shRNA细胞与对照组及转染pc DNA3.1(+)组比较,NF-κBp65 mRNA表达水平明显上调(10.63±0.84比1.04±0.21和1.23±0.22,P0.01),NF-κBp65蛋白表达水平明显升高(1.07±0.06比0.53±0.02和0.59±0.04,P0.01),且NF-κBp65蛋白主要位于细胞浆内,在肿瘤坏死因子α刺激后NF-κBp65蛋白并未明显进入细胞核。与对照组及转染pc DNA3.1(+)组比较,转染NF-κBp65ΔNLS质粒的A549/NF-κBp65 shRNA细胞的增殖、迁移和粘附能力均有不同程度增强。结论通过基因突变技术构建无NLS的NF-κBp65真核表达质粒,可明显增强A549/NF-κBp65shRNA细胞株内NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达水平,并使NF-κBp65蛋白定位于细胞浆内;同时,细胞浆内过表达NF-κBp65ΔNLS蛋白可明显增强A549/NF-κBp65 shRNA细胞的增殖、迁移和粘附能力,提示滞留于细胞浆内的NF-κBp65仍可通过影响NF-κB信号通路相关蛋白参与调节肺癌细胞的生物学行为。     

9例布鲁氏菌病并发感染性主动脉瘤患者临床诊治分析 临床指标及细胞因子水平变化特征

[摘要]?目的?分析布鲁氏菌病并发感染性主动脉瘤的临床特点,以提高临床医生对该疾病的认识及诊疗水平。方法?选取2002年1月1日—2022年6月1日北京安贞医院收治的9例布鲁氏菌病并发感染性主动脉瘤患者作为研究对象,收集其流行病学资料、临床表现、实验室检查结果、影像学资料、治疗及预后等情况。结果?32例血培养证实布鲁氏杆菌感染者中,9例并发主动脉瘤,发生率为28.13%。其中8例为男性,1例为女性,年龄为58～75岁。有明确牛、羊接触史者3例,有不洁羊奶饮用史者1例,有牧区旅游史者1例。所有患者均有发热,其中热型为典型波浪热者1例。患者主要症状为腰腹痛。误诊为腰椎结核者2例,误诊为腰椎管狭窄者3例。1例患者合并附睾炎。6例患者累及腹主动脉,1例累及升主动脉,2例累及主动脉弓。9例患者血清凝集试验均阳性。9例患者均接受利福平、多西环素和左氧氟沙星抗感染治疗,除1例失访外,其余8例总疗程均为3～6个月。7例手术治疗患者中,6例行主动脉替换或修补术,1例经6个月抗感染治疗后行支架植入手术,以上患者术后均随访5个月～7年（中位时间4年）,1例于术后5年死于脑血管疾病意外,其余6例均存活。2例未接受手术治疗患者中,1例出院后失访,1例随访3年存活至今。结论?布鲁氏菌病的主动脉受累较少见,且易危及生命,由于对该病认识不足,易导致漏诊、误诊。本病治疗的基石仍然是抗感染治疗联合开放性手术。血管内支架等介入手术治疗的作用尚未确定,须要考虑患者的病情和长期并发症的风险。     

大剂量沐舒坦防治呼吸窘迫综合征的研究进展

沐舒坦 (化学名为盐酸溴环己胺醇 )是临床上常用的化痰药。一些研究发现 ,大剂量沐舒坦还具有促进表面活性物质合成、抗炎、抗氧化等作用 ,因而可用于防治婴儿呼吸窘迫综合征 (NRDS)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。作者就大剂量沐舒坦的药理作用和在防治NRDS /ARDS中应用的研究进展进行综述     

铜绿假单胞菌的临床及耐药性分析

目的分析引起医院感染的铜绿假单胞菌(PAE)感染患者的临床特点及耐药性。方法回顾性分析我院成人住院患者培养阳性290株PAE患者的临床特点及耐药情况。结果 PAE占总G-菌株的13.56%。对多种抗菌药敏感率60%。ICU组及死亡组PAE对多种抗菌药物的敏感率及耐药率均有不同程度的下降和升高(P0.05)。结论 PAE仍是引起医院内感染的常见致病菌之一。既往有基础疾病的老年患者特别是存在手术史者较易感染,预后尚可。我院PAE对阿米卡星、哌拉西林舒巴坦、美罗培南等抗菌药的敏感率较高。ICU内PAE易出现耐药菌株,且多耐药及泛耐药菌株预后不良,应严格监控。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的流行病学及治疗策略研究进展

金黄色葡萄球菌是临床上常见的致病性较强的细菌,是引起医院感染和社区获得性感染常见的致病菌之一。随着广谱抗生素的广泛使用,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率越来越高。由于该菌对环境有较强的适应力,容易在医院内传播流行,已成为医院常见的革兰阳性菌之一,甚至在一些医院引起了暴发流行,这种来源于医院内的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌被称为医院获得性MRSA(HA-MRSA)。另外,近年来在无医院或医疗机构接触史的健康人群中发生MRSA感染的现象有所增多,这种MRSA被称为社区获得性MRSA(CA-MRSA)。MRSA具有耐多药的特性,仅对万古霉素等少数抗生素敏感。但是随着万古霉素的使用增加,最近有关对万古霉素中介或者耐药的MRSA的报道逐渐增多。因此,目前临床对于MRSA的治疗显得尤为棘手,引起了学者及临床工作者的高度重视。     

布鲁菌心内膜炎1例

<正>布鲁菌心内膜炎是一种罕见病,临床上易于误诊误治,治疗上也比较棘手,不仅需要内科强力抗感染治疗,往往还需要心外科手术。现将首都医科大学附属北京安贞医院近期收治的1例布鲁菌心内膜炎报告如下,以期提高对本病的认识。     

卡泊芬净治疗心脏术后侵袭性真菌病20例临床分析

目的:探讨卡泊芬净治疗心脏术后并发侵袭性真菌感染(IFI)的疗效与安全性。方法:回顾分析我院呼吸科、心外科和急诊重症监护室(ICU),接受过卡泊芬净治疗的心脏术后合并IFI患者临床资料。结果:2005年5月至2010年12月,共有20例接受了卡泊芬净治疗。男性12例,女性8例,中位年龄65岁(23～82)岁。确诊10例,皆为念珠菌血症(白念珠菌4例,近平滑念珠菌3例,光滑念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌各1例);临床诊断肺IFI 5例(念珠菌3例,曲霉2例);拟诊肺IFI 5例,病原真菌不明。冠状动脉搭桥(CABG)术8例,瓣膜手术8例,胸主动脉瘤手术2例,先天性心脏病(先心病)和马方综合征手术各1例。卡泊芬净的使用时间中位数为18(1～55)d。1例于用药当天死于心脏骤停疗效无法判断,19例可评估患者中,痊愈10例(10/19,52.6%),显效4例(4/19,21.1%),总有效率为73.7%,进步3例,无效2例。死亡6例(6/20,病死率30.0%)。治疗过程中未发现与卡泊芬净有关的不良反应。结论:卡泊芬净是治疗心脏术后并发IFI的有效安全药物,值得进一步临床验证。     

无创通气治疗呼吸衰竭的研究进展

无创通气(noninvasive ventilation,NIV)具有使用方便、并发症少等优点,临床应用日趋广泛。NIV不仅可用于治疗慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘、急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征、心源性肺水肿等引起的呼吸衰竭,还可为外科手术和拒绝插管有创通气的患者提供通气支持以及协助有创通气患者早期拔管脱机等。本文综述了近年来NIV的临床应用进展。     

经气管插管壁内导管吹气联合压力控制通气治疗急性呼吸窘迫综合征

目的观察经气管插管(ETT)壁内导管引导气管内吹气(TGI)联合压力控制通气(PCV)对实施允许性高碳酸血症(PHC)的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型的疗效,并探讨其作用机制。方法16只新西兰兔气道内滴入内毒素诱发ARDS模型后,随机分为:①TGI组,实施PHC后经TGI专用ETT引导持续TGI气流(流量0·5L/min)治疗4h;②常规机械通气(CMV)组。每30min记录动脉血气(pH、PaCO2、PaO2)、吸气压力(PIP)、潮气量(VT)、生理死腔(VD/VT)、动态胸肺顺应性(Cdyn)。调节PIP,以最小VT维持正常PaCO2。实验结束后测定肺髓过氧化物酶(MPO)、白细胞介素-8(IL-8)、肺组织含气容积密度(VV)、支气管肺泡灌洗液中总蛋白(TP)、肺表面活性物质总磷脂(TPL)、大小聚集体比值(SA/LA)和最小表面张力(γmin)。结果TGI组吹气后PaCO2和VD/VT分别较吹气前下降46%和53%(P均<0·01);PIP、VT和VD/VT分别较同期CMV组下降32%、38%和30%(P均<0·01)。TGI组PaO2、Cdyn、MPO、IL-8、VV、TPL/TP、SA/LA和γmin均明显优于CMV组(P<0·05或P<0·01)。结论经TGI专用ETT壁内导管吹气联合PCV可显著降低实施PHC的ARDS模型VD/VT,缓解CO2潴留,降低机械通气时PIP和VT,对ARDS肺脏具有保护作用。     

肺表面活性物质治疗急性呼吸窘迫综合征的实验研究

目的：观察外源性肺表面活性物质（ＰＳ）对实验性急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）的疗效。方法：１８只新西兰白兔油酸诱发ＡＲＤＳ后，９只在机械通气基础上经气道滴入猪ＰＳ（１００ｍｇ／ｋｇ，为ＰＳ组），另外９只给于单纯机械通气作为对照组，均观察４小时。于动物实验的基础状态、治疗前及治疗后１小时、２小时、４小时测定肺功能残气量（ＦＲＣ）、动脉血气和肺泡动脉血氧分压差〔Ｐ（Ａ－ａ）Ｏ２〕。实验结束时观察肺病理形态并测定肺泡容积密度（ＶＶ）。结果：治疗后，对照组ＦＲＣ和动脉血氧分压（ＰａＯ２）／氧浓度（ＦｉＯ２）比值（ＯＩ）呈下降趋势，而ＰＳ组ＦＲＣ和ＯＩ明显高于治疗前和同时间点的对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），Ｐ（Ａ－ａ）Ｏ２明显低于治疗前和同时间点的对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。病理形态观察见对照组广泛性肺不张、肺泡和间质水肿、出血和炎性细胞浸润，ＰＳ组上述改变较轻，ＶＶ增加（Ｐ＜０．０１）。结论：外源性肺表面活性物质对兔油酸型ＡＲＤＳ模型有一定的治疗效果