老年肘管综合征患者39例临床分析

老年肘管综合征患者常常伴发一些造成周围神经损害或肘关节滑膜损伤而继发畸形的内科疾病,如糖尿病、结核、类风湿滑膜炎等,而肘管综合征伴发这些疾病的老年患者的诊治及预后影响的研究报道较少.     

应用FITC系统建立非均衡竞争睾酮(T)化学发光法

目的 建立可广泛应用于睾酮(T)检测的方法.方法 制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人T多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记T-类似物.以抗FITC抗体包被发光板,FITC-T类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,固相抗原与血清中T竞争结合抗T抗体-HRP,建立化学发光法(CLIA)血清T检测系统(FITC系统),进行方法 学评价,并与直接用T-牛血清清蛋白包被系统(非FITC系统)和罗氏公司Elecsys2010系统进行比较.结果 FITC系统检测线性范围为0.05~20 ng/mL,灵敏度为0.05 ng/mL;批内、批间变异系数均小于5%,优于非FITC系统;与Elecsys2010系统检测结果 的相关系数为0.973 2,测定结果 差异无统计学意义(P>0.05).结论 成功建立基于FITC系统的非均衡竞争T检测CLIA系统,精密度、灵敏度等指标均符合临床要求,可用于临床标本检测.     

应用FITC系统建立非均衡竞争游离甲状腺素化学发光法

[目的]制备抗人甲状腺素多克隆抗体并应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)系统建立非均衡竞争FT4化学发光法.[方法]以T4-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰兔,制备抗人T4多克隆抗体,亲和层析法吸附掉与3-碘-L-甲状腺原氨酸(3-iodo-L-tyrosine)、3,5-二碘-L-甲状腺原氨酸(3,5-diiodo-L-tyrosine)、D-三碘甲状腺原氨酸(D-T3)、L-三碘甲状腺原氨酸(L-T3)、反三碘甲状腺原氨酸(rT3)有交叉反应多抗,纯化特异性的抗人T4多克隆抗体并用FITC标记T4类似物,用抗FITC抗体包被微孔板.反应时,将FT4校准品或样品、FITC-T4类似物、T4抗体-HRP依次加入包被有抗FTTC抗体的化学发光板中,FITC -T4类似物与FT4校准品或样品,非均衡竞争结合T4抗体-HRP,从而在微孔板上形成免疫反应复合物T4类似物-T4抗体-HRP,通过酶促化学发光反应,就可以显示出与样品FT4浓度负相关的相对光单位(relative light unit,RLU),建立FT4化学发光检测方法.[结果]抗体经酶联免疫吸附实验证明对T4具有高度特异性,与3-iodo-L-tyrosine、3,5-diiodo-L-tyrosine、L-T3、D-T3、rT3无交叉反应.该方法建立的试剂盒标准曲线的线性相关系数不小于0.9900;分析灵敏度为0.9 pmol/L;线性检测范围0.9～130 pmol/L;精密度测试批内变异系数CV＜ 10％;与进口发光免疫分析系统做线性相关比较,线性回归系数为1.0852,相关系数为0.9673,临床符合率良好;本方法建立的试剂盒经加速稳定性试验37℃放置7d与2～8℃放置7d无异.[结论]综上所述,应用FITC系统建立的非均衡竞争FT4化学发光免疫分析灵敏度高、特异性好适于临床诊断应用.     

应用FITC系统建立非均衡竞争三碘甲腺原氨酸化学发光法

目的 制备抗人三碘甲腺原氨酸(T3)多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测总三碘甲腺原氨酸(TT3)的方法.方法 以T3-牛血清清蛋白(BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化特异性的抗人T3多克隆抗体并连接辣根过氧化物酶(HRP).用FITC标记T3类似物,采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,固相抗原与T3校准品或样本中的T3非均衡竞争结合T3-HRP抗体,建立标准曲线,血清中TT3通过标准曲线计算浓度.由此建立TT3化学发光检测方法进行方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(BGG)包被(非FITC系统)的检测系统进行比较.将该方法应用于临床100份血清标本的检测,定量结果与德国Roche 2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elecsys 2010)结果进行比较.结果 抗体对T3具有高度特异性,线性相关系数r>0.99,线性范围为0.1～8 ng/mL,分析灵敏度为0.1 ng/mL,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测.对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys 2010定量试剂盒的结果有很好的相关性,相关系数为0.961 9,临床符合率良好.结论 该方法精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,适用于临床标本的检测.     

应用FITC系统建立非均衡竞争游离雌三醇(E3)化学发光法

目的 建立可以广泛应用于游离雌三醇(E3)检测的方法.方法 制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记雌三醇类似物.以抗FITC抗体包被发光板,FITC-E3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,并与血清中的free E3竞争结合抗E3抗体-HRP,建立化学发光血清free E3检测系统(FITC系统),进行方法学评价,并与E3-牛血清白蛋白直接包被系统(非FITC系统)和西门子ADVIA CentaurXP系统进行比较.结果 FITC系统检测线性范围为0.1～40 ng/mL,灵敏度为0.1 ng/mL;批内变异系数小于5%优于非FITC系统;与西门子ADVIA CentaurXP系统检测结果有良好的相关性(r=0.965 7).结论 应用FITC系统建立的非均衡竞争free E3化学发光免疫分析系统灵敏度高、特异性强,可用于临床标本的检测.     

应用FITC系统建立非均衡竞争孕酮(P)化学发光法

目的 建立可以广泛应用于孕酮(P)检测的方法.方法 制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记孕酮类似物.以抗FITC抗体包被发光板,FITC-P类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,并与血清中的P竞争结合抗P抗体-HRP,建立化学发光血清P检测系统(FITC系统),进行方法学评价,并与P-牛血清白蛋白直接包被系统(非FITC系统)和罗氏Elecsys2010系统进行比较.结果 FITC系统检测线性范围为0.1～60 ng/mL,灵敏度为0.1 ng/mL;批内变异系数小于5%优于非FITC系统;与Elecsys2010系统检测结果有良好的相关性(r= 0.961 9).结论 应用FITC系统建立的非均衡竞争P 化学发光免疫分析系统灵敏度高、特异性强,可用于临床标本的检测.     

应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸（FT3）化学发光法

目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化并联接辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)。用FITC标记T3-类似物。采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,通过非均衡竞争法原理,固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP,通过标准曲线计算FT3浓度,建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(Bovine serum gamma globulin,BGG)包被(非FITC系统)的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测,定量结果与德国罗氏2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elec-sys 2010)定量结果进行比较。结果抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3、具有高度特异性。应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99,线性范围0.25～50 pg/ml,分析灵敏度为0.25 pg/ml,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性,相关系数r=0.962 2,两者的测定值无显著性差异。结论制备的抗人T3多克隆抗体特异性强,以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,达到临床测定的需求,可代替进口化学发光产品用于临床样本的检测。     

应用FITC系统建立非均衡竞争总甲状腺素(TT4)化学发光法

目的 建立可广泛应用于总甲状腺素(TT4)检测的方法.方法 制备辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗人甲状腺素(T4)多克隆抗体及异硫氰酸荧光素(FITC)标记T4类似物.以抗FITC抗体包被发光板,FITC-T4类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,血清标本经处理后使T4均呈游离状态,固相抗原与血清T4竞争结合抗T4抗体-HRP,建立化学发光法(CLIA)血清TT4检测系统(FITC系统),进行方法 学评价,并与T4-牛血清γ球蛋白直接包被系统(非FITC系统)和罗氏公司Elecsys2010系统进行比较.结果 FITC系统检测线性范围为0.1~320 ng/mL,灵敏度为0.1 ng/mL;批内变异系数小于5%,优于非FITC系统;与Elecsys2010系统检测结果 具有良好的相关性(r=0.916 9).结论 应用FITC系统建立的非均衡竞争TT4 CLIA分析系统灵敏度高、特异性,可用于临床标本的检测.