斑点免疫金染色法检测恶性疟原虫循环抗原

应用胶体金探针建立了斑点免疫金染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳ）。以捕捉法Ｄｏｔ－ＩＧＳ检测３０份海南恶性疟病人全血，循环抗原阳性者２７份，阳性率为９０．０％；４０份其他寄生虫病血样全为阴性。结果表明，捕捉法Ｄｏｔ－ＩＧＳ在敏感性和特异性方面都优于间接法Ｄｏｔ－ＩＧＳ和斑点酶联免疫吸附测定，是检测疟疾循环抗原的理想方法。     

刚地弓形虫P30(SAG1)基因的克隆与表达

目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中。菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS PAGE和Westernblot进行鉴定。结果扩增的P30基因片段为750bp,重组质粒诱导表达产物分子质量单位为30ku,与理论值相符。Westernblot确认重组质粒表达蛋白与小鼠抗弓形虫单克隆抗体(P30McAb)发生特异性反应。结论成功构建重组体并获得弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。     

恶性疟原虫特异的质粒型DNA探针的制备

恶性疟原虫 DNA 与 pBR_(322)质粒 DNA 体外重组后,导入 E.coli HB_(101)建成基因文库,用疟原虫全基因组 DNA 从文库中筛出了5个杂交信号特强的克隆 pBF_1,pBF_2,pBF_3,pBF_4和 pBF_5。克隆 pBF_4 DNA与 P.c DNA,P.b DNA,及人白细胞 DNA 均无交叉反应,与 P.f DNA 杂交时,可检出的最低 DNA 量为10pg。     

刚地弓形虫ROP2-P30复合重组蛋白疫苗对BALB／c小鼠免疫保护性的研究

目的用刚地弓形虫ROP2-P30复合重组蛋白疫苗免疫BALB/c小鼠观察对机体的影响,为研制安全有效的弓形虫疫苗奠定基础。方法PCR方法从刚地弓形虫基因组中扩增出ROP2和P30片段,将这两个片段分别亚克隆至pET-30a原核表达载体中,表达出ROP2-P30复合重组蛋白。用蛋白疫苗免疫BALB/c小鼠,ELISA检测免疫小鼠后体液中抗体和细胞因子的变化,观察攻击试验小鼠的的死亡率。结果ROP2-P30复合重组蛋白疫苗免疫BALB/c小鼠诱导机体产生大量的IgM、IgG抗体和IFN-γ、IL-2及IL-4细胞因子。攻击试验表明,复合重组蛋白免疫组和对照组相比,小鼠的存活时间明显延长。结论ROP2-P30复合重组蛋白免疫BALB/c小鼠诱导其产生高水平的体液和细胞免疫应答,该复合重组蛋白是抗刚地弓形虫感染的候选疫苗之一。     

经内镜局部注药治疗食管贲门癌性狭窄26例近期疗效观察

经内镜局部注药治疗食管贲门癌性狭窄２６例近期疗效观察山东省寿光市人民医院（２６２７００）王德忱，郑道明，张兰玉，刘克义，籍成森，魏新全我院１９９０～１９９５年经胃镜局部注射无水乙醇和化疗药物姑息治疗食管贲门癌性狭窄２６例，临床效果满意，现报道如下。１...     

恶性疟原虫染色体基因文库的构建

恶性疟原虫FCC1/HN株DNA经Bam HI部分消化后,取17-22kb片段插入到载体EMBL_4DNA左右臂之间,经体外包装后,感染P_2溶源菌E.coli L_(95),建成基因文库,使原虫基因组中的每一段DNA序列均有99％的几率克隆到文库中。通过原位杂交,筛出了含有重复序列的特异克隆,证明该库稳定而有效。     

胃窦血管扩张症1例

1 病例报告 患者男,64岁,因上腹部不适,黑便20天入院。患者20天前无诱因出现上腹部不适,进食后为著,伴上腹饱胀、烧心、乏力,并出现黑便,成形,每日1次,每次量约200g。在院外自服“雷尼替丁”等药物治疗,效果不佳,遂来我院。患者既往“缺铁性贫血”病史10余年,自服“硫酸亚铁、维生素C、叶酸片、复合维生素B”治疗,效果尚好。查体：贫血貌,皮肤及睑结膜苍白,巩膜无黄染,肝掌（-）,蜘蛛痣（-）,腹平软,全腹无压痛、反跳痛,肝脾肋下未触及,移动性浊音阴性,     

疟疾患者对恶性疟血期抗原的抗体应答

本文用Western Blot方法,对经Triton X-100提取的恶性疟血期抗原与疟疾患者血清的反应结果进行了分析。发现,48份恶性疟血清与抗原均出现反应带,主要集中在大于125KD的高分子量区,而在低于92KD的区域,有22份出现明显不同的反应带。16份间日疟病人血清,有14份与恶性疟抗原出现交叉反应带,主要分布在分子量89、75、41和34KD的范围。正常人血清个别出现了反应条带。与IFAT的结果相符。     

应用DNA探针检测蚊体内丝虫幼虫的研究

本文用人工合成的寡核苷酸探针，经斑点杂交法检测蚊体内马来丝虫幼虫。可测到丝虫和微丝蚴２ｎｇ的ＤＮＡ量，不与其它动物丝虫标本发生交叉反应。将单个蚊直接压于硝酸纤维素膜上进行检测，感染蚊中含有１条感染期幼虫就可出现阳性反应。将一组蚊虫在裂解液中研磨集体检测时，在２０只蚊虫中有１只感染蚊即可检出。显示该探针可用于马来丝虫地区的蚊媒监测。