杠柳毒苷体外致心律失常风险评价

目的：评价传统中草药香加皮的主要活性成分杠柳毒苷致心律失常的风险。方法：采用离体组织（豚鼠乳突肌和兔浦肯野纤维）,给予浓度为0、0.3、1.0、3.0 μmol/L杠柳毒苷,检测其对动作电位的影响。指标包括：静息电位（resting membrane potential,RMP）、动作电位幅度（action potential amplitude,APA）、最大除极速度（maximal depolarization rate of phase 0,dv/dtmax）、复极30%、50%和90%动作电位时程（action potential duration at 30%,50% and 90% repolarization,APD30、APD50、APD90）。结果：与0 μmol/L组比较,0.3和1.0 μmol/L 杠柳毒苷可缩短豚鼠乳突肌的APD30和APD50;0.3、1.0、3.0 μmol/L杠柳毒苷降低兔浦肯野纤维的dv/dtmax;3.0 μmol/L杠柳毒苷减少兔浦肯野纤维的APA;1.0、3.0 μmol/L杠柳毒苷缩短兔浦肯野纤维的APD30。差异均有统计学意义。结论：杠柳毒苷有潜在诱导心律失常的风险。     

Access 2免疫化学发光仪检测动物血清心肌钙蛋白I的分析性能确证

目的 对美国贝克曼库尔特有限公司Access2免疫化学发光仪的主要分析性能进行验证。方法 对该仪器检测项目血清心肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I, cTnI)进行性能验证。利用变异系数分别对质控及大鼠、犬和食蟹猴血清心肌钙蛋白I的精密度进行评估, 并根据质控精密度数据对质控的靶值范围进行计算。利用相对偏差及靶值范围对准确度进行评价;利用携带污染率对携带污染情况进行评价。利用线性方程对TropI的线性范围进行评价, 同时对Access 2免疫化学发光仪检测动物血清cTnI的功能灵敏度进行了评价。结果 Access2免疫化学发光仪检测cTnI低、中、高3个水平质控的批内RSD均<8%, 批间RSD均<63.75%, 大鼠、犬和食蟹猴血清cTnI批内RSD均<8%。Bio-Rad 3水平质控的靶值范围分别为:0.363 8～0.473 5、1.898 6～2.819 3、7.950 3～9.367 6 ng/mL。Access2免疫化学发光仪检测cTnI的RSD<16.32%, 且低、中、高3水平质控均在各自的靶值±30%范围内。携带污染率<10%, 线性验证高值动物血清按一定比例稀释后将所得理论值与实测值进行回归分析, a值介于0.95～1.05, R> 0.975, 线性范围为0.016 0～82.843 3 ng/mL, 功能灵敏度为0.007 6 ng/mL。结论 Access2免疫化学发光仪检测cTnI的精密度、准确度、携带污染率及线性范围均在可接受范围内, 且本研究获得了动物血清cTnI检测的线性范围及功能灵敏度。因此, Access2免疫化学发光仪可用于临床前不同动物种属cTnI的检测。     

Access2免疫化学发光仪检测动物血清心肌钙蛋白I的分析性能确证

目的对美国贝克曼库尔特有限公司Access2免疫化学发光仪的主要分析性能进行验证。方法对该仪器检测项目血清心肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I,c Tn I)进行性能验证。利用变异系数分别对质控及大鼠、犬和食蟹猴血清心肌钙蛋白I的精密度进行评估,并根据质控精密度数据对质控的靶值范围进行计算。利用相对偏差及靶值范围对准确度进行评价;利用携带污染率对携带污染情况进行评价。利用线性方程对Trop I的线性范围进行评价,同时对Access 2免疫化学发光仪检测动物血清c Tn I的功能灵敏度进行了评价。结果 Access2免疫化学发光仪检测c Tn I低、中、高3个水平质控的批内RSD均<8%,批间RSD均<63.75%,大鼠、犬和食蟹猴血清c Tn I批内RSD均<8%。Bio-Rad 3水平质控的靶值范围分别为:0.363 8~0.473 5、1.898 6~2.819 3、7.950 3~9.367 6 ng/m L。Access2免疫化学发光仪检测c Tn I的RSD<16.32%,且低、中、高3水平质控均在各自的靶值±30%范围内。携带污染率<10%,线性验证高值动物血清按一定比例稀释后将所得理论值与实测值进行回归分析,a值介于0.95~1.05,R>0.975,线性范围为0.016 0~82.843 3 ng/m L,功能灵敏度为0.007 6 ng/m L。结论 Access2免疫化学发光仪检测c Tn I的精密度、准确度、携带污染率及线性范围均在可接受范围内,且本研究获得了动物血清c Tn I检测的线性范围及功能灵敏度。因此,Access2免疫化学发光仪可用于临床前不同动物种属c Tn I的检测。     

虚拟现实技术对脑卒中患者手功能康复效果的meta分析

目的:循证评价虚拟现实技术促进脑卒中患者偏瘫手功能康复的有效性。方法:检索国内外有关虚拟现实手功能训练与常规手训练对比治疗脑卒中患者偏瘫手运动障碍的临床随机对照试验。两位研究者独自完成筛选文献、提取资料、评价偏倚风险后,运用Rev Man软件进行meta分析。结果:最终纳入12篇临床随机对照试验。结果显示,试验组与对照组Fugl-Meyer运动功能评定量表腕/手评分具有显著性差异[WMD=2.41(95%CI=0.21, 4.61)],改良Barthel指数具有显著性差异[WMD=8.12(95%CI=3.42, 12.81)],握力(kg)无显著性差异[WMD=1.10(95%CI=-1.73, 3.93)],JHFT手功能测试完成任务时间无显著性差异[WMD=9.17(95%CI=-21.34, 39.69)]。结论:虚拟现实手功能训练能有效提高脑卒中患者偏瘫手运动功能及日常生活活动能力,并比常规手功能训练更有效。但二者在改善患者手部肌力方面差异不明显。受纳入文献质量及样本量限制,仍需开展更高质量的临床随机对照试验进行研究。     

非接触式共培养体外血脑屏障模型的跨膜电阻及通透性

目的建立大鼠脑毛细血管内皮细胞(BCEC)与星形胶质细胞共培养血脑屏障模型并评价其功能。方法采用SD大鼠原代分离培养获得BCEC和星形胶质细胞。经细胞形态学观察、免疫组化检测相关抗原后建立非接触式共培养血脑屏障模型,测定共培养模型所形成的跨细胞电阻及荧光素钠的通透性。采用LC-MS检测6个化合物透过血脑屏障模型的通透性,并与文献报道的体内数据进行比较。结果培养的BCEC多数为短梭形外观,免疫组化检测可见细胞高表达因子Ⅷ;星形胶质细胞呈现具有细胞突起的典型形态,免疫组化检测可见细胞高表达胶质纤维酸性蛋白。共培养的体外血脑屏障模型跨BCEC单层的电阻值为(373±41)Ω·cm2,荧光素钠跨BCEC单层的通透性为(0.34±0.14)×10-3cm·min-1,符合体外血脑屏障模型要求。对所选6个化合物体内外透过BBB模型渗透系数的比较,表明具有一定的相关性(R2=0.7679,P<0.05)。结论建立的体外BBB模型在跨内皮电阻和通透性方面具备了在体BBB的基本特性,可以用于模拟体内环境,进行药物早期筛选方面的研究。     

基因芯片技术研究威替米星及庆大霉素对HK-2细胞毒作用的机制

目的:研究威替米星和庆大霉素对体外培养的人肾小管上皮细胞系(HK-2)毒性作用的分子机制。方法:利用基因芯片技术检测3.2 mg.mL-1威替米星和庆大霉素作用于HK-2细胞48 h后基因表达的变化。结果:威替米星诱导HK-2细胞87个基因发生显著的上调,10个基因发生明显的下调。庆大霉素则引起62个基因表达显著上调,18个基因明显下调。差异表达的基因的功能涉及细胞生长增殖调控、凋亡、细胞周期、应激反应、转运及代谢酶等方面。结论:威替米星和庆大霉素改变细胞凋亡、应激反应及转运等相关基因表达可能参与其细胞毒性作用过程。     

纳米和微米二氧化钛急性经口毒性的比较

目的 探讨小鼠经口灌胃纳米二氧化钛后的急性毒性反应.方法 以5 g/kg剂量分别用纳米二氧化钛和微米二氧化钛单次经口灌胃染毒小鼠,观察14 d后处死,比较纳米二氧化钛和微米二氧化钛对小鼠体重、摄食量、血清生化指标及脏器系数的影响.结果 纳米二氧化钛对小鼠体重、脏器系数没有明显影响;实验期间,小鼠的摄食量逐渐增加;纳米二氧化钛染毒雌性组天冬氨酸转氨酶(AST)活力明显低于微米二氧化钛组,差异有统计学意义(P＜0.01),且肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)与微米二氧化钛组、对照组相比,差异亦有统计学意义(P＜0.05).微米二氧化钛雌性组肌酸激酶(CK)活力明显高于对照组;纳米二氧化钛雄性组CK、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)活力明显高于微米二氧化钛组,微米二氧化钛雄性组LDH、α-HBDH活力明显低于对照组,纳米二氧化钛雄性组CK活力明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 纳米二氧化钛染毒未见明显的急性毒性反应,但对血液生化指标可能有一定的影响,且与微米二氧化钛的影响不同.     

心肌损伤生物标志物在毒理学实验中的应用进展

心肌损伤生物标志物的检测在心脏疾病临床诊断上被广泛应用,但是在新药的非临床安全评价方面,心肌损伤标志物的应用相对滞后。目前中国、美国、经济合作发展组织(OECD)的新药安全评价指导原则推荐的检测心脏功能的指标为谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)。但是上述指标敏感性差(如AST)以及存在同工酶(如LDH和CK),所以不能特异灵敏地反映心脏的功能。目前国际上高度推崇采用敏感效应生物标志物来监测心脏的靶器官毒性。近年来肌红蛋白(Mb)、脑型钠尿肽(BNP)、心肌肌钙蛋白(cTn)对心肌损伤的检测展现了良好的应用价值,本文将对上述3项国内外研究最热点的心肌损伤生物标志物进行阐述。     

(1R,2R) -SIPI5358和SIPI5358对未分化PC12细胞延迟整流钾电流的抑制作用

利用全细胞膜片钳技术研究新化合物(1R,2R)-SIPI5358和SIPI5358对未分化PC12细胞延迟整流钾电流(Ik)的影响.结果表明,(1R,2R)-SIPI5358和SIPI5358可抑制未分化PC12细胞的Ik,且抑制作用具有浓度和电压依赖性,IC50分别为(0.64±0.17)和(12.05±3.31)μmol/L.l μmol/L的(1R,2R)-SIPI5358可使未分化PC12细胞的Ⅰk稳态激活曲线和失活曲线向超极化方向移动4和20 mV.20 μmol/L的SIP15358可使未分化PC12细胞的Ik稳态激活曲线向去极化方向移动7mV;使失活曲线向超极化方向移动21 mV.(1R,2R)-SIPI5358和SIP15358对Ⅰx的影响可能与其神经毒性有关.     

微型中空纤维生物反应器肝细胞培养技术及其在药物肝毒性研究中的应用

传统的细胞培养方法中,肝细胞在体外不能实现高活性高密度的生长,因而无法模拟体内的三维立体生长环境,从而制约了药物肝毒性的体外评价;利用微型中空纤维凝胶包埋技术可以在体外固定肝细胞而模拟体内的立体环境。本文综述了微型中空纤维凝胶包埋技术的发展及其在体外药物肝毒性方面的应用。