Access 2免疫化学发光仪检测动物血清心肌钙蛋白I的分析性能确证

目的 对美国贝克曼库尔特有限公司Access2免疫化学发光仪的主要分析性能进行验证。方法 对该仪器检测项目血清心肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I, cTnI)进行性能验证。利用变异系数分别对质控及大鼠、犬和食蟹猴血清心肌钙蛋白I的精密度进行评估, 并根据质控精密度数据对质控的靶值范围进行计算。利用相对偏差及靶值范围对准确度进行评价;利用携带污染率对携带污染情况进行评价。利用线性方程对TropI的线性范围进行评价, 同时对Access 2免疫化学发光仪检测动物血清cTnI的功能灵敏度进行了评价。结果 Access2免疫化学发光仪检测cTnI低、中、高3个水平质控的批内RSD均<8%, 批间RSD均<63.75%, 大鼠、犬和食蟹猴血清cTnI批内RSD均<8%。Bio-Rad 3水平质控的靶值范围分别为:0.363 8～0.473 5、1.898 6～2.819 3、7.950 3～9.367 6 ng/mL。Access2免疫化学发光仪检测cTnI的RSD<16.32%, 且低、中、高3水平质控均在各自的靶值±30%范围内。携带污染率<10%, 线性验证高值动物血清按一定比例稀释后将所得理论值与实测值进行回归分析, a值介于0.95～1.05, R> 0.975, 线性范围为0.016 0～82.843 3 ng/mL, 功能灵敏度为0.007 6 ng/mL。结论 Access2免疫化学发光仪检测cTnI的精密度、准确度、携带污染率及线性范围均在可接受范围内, 且本研究获得了动物血清cTnI检测的线性范围及功能灵敏度。因此, Access2免疫化学发光仪可用于临床前不同动物种属cTnI的检测。     

Access2免疫化学发光仪检测动物血清心肌钙蛋白I的分析性能确证

目的对美国贝克曼库尔特有限公司Access2免疫化学发光仪的主要分析性能进行验证。方法对该仪器检测项目血清心肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I,c Tn I)进行性能验证。利用变异系数分别对质控及大鼠、犬和食蟹猴血清心肌钙蛋白I的精密度进行评估,并根据质控精密度数据对质控的靶值范围进行计算。利用相对偏差及靶值范围对准确度进行评价;利用携带污染率对携带污染情况进行评价。利用线性方程对Trop I的线性范围进行评价,同时对Access 2免疫化学发光仪检测动物血清c Tn I的功能灵敏度进行了评价。结果 Access2免疫化学发光仪检测c Tn I低、中、高3个水平质控的批内RSD均<8%,批间RSD均<63.75%,大鼠、犬和食蟹猴血清c Tn I批内RSD均<8%。Bio-Rad 3水平质控的靶值范围分别为:0.363 8~0.473 5、1.898 6~2.819 3、7.950 3~9.367 6 ng/m L。Access2免疫化学发光仪检测c Tn I的RSD<16.32%,且低、中、高3水平质控均在各自的靶值±30%范围内。携带污染率<10%,线性验证高值动物血清按一定比例稀释后将所得理论值与实测值进行回归分析,a值介于0.95~1.05,R>0.975,线性范围为0.016 0~82.843 3 ng/m L,功能灵敏度为0.007 6 ng/m L。结论 Access2免疫化学发光仪检测c Tn I的精密度、准确度、携带污染率及线性范围均在可接受范围内,且本研究获得了动物血清c Tn I检测的线性范围及功能灵敏度。因此,Access2免疫化学发光仪可用于临床前不同动物种属c Tn I的检测。     

非接触式共培养体外血脑屏障模型的跨膜电阻及通透性

目的建立大鼠脑毛细血管内皮细胞(BCEC)与星形胶质细胞共培养血脑屏障模型并评价其功能。方法采用SD大鼠原代分离培养获得BCEC和星形胶质细胞。经细胞形态学观察、免疫组化检测相关抗原后建立非接触式共培养血脑屏障模型,测定共培养模型所形成的跨细胞电阻及荧光素钠的通透性。采用LC-MS检测6个化合物透过血脑屏障模型的通透性,并与文献报道的体内数据进行比较。结果培养的BCEC多数为短梭形外观,免疫组化检测可见细胞高表达因子Ⅷ;星形胶质细胞呈现具有细胞突起的典型形态,免疫组化检测可见细胞高表达胶质纤维酸性蛋白。共培养的体外血脑屏障模型跨BCEC单层的电阻值为(373±41)Ω·cm2,荧光素钠跨BCEC单层的通透性为(0.34±0.14)×10-3cm·min-1,符合体外血脑屏障模型要求。对所选6个化合物体内外透过BBB模型渗透系数的比较,表明具有一定的相关性(R2=0.7679,P<0.05)。结论建立的体外BBB模型在跨内皮电阻和通透性方面具备了在体BBB的基本特性,可以用于模拟体内环境,进行药物早期筛选方面的研究。     

杠柳毒苷体外致心律失常风险评价

目的：评价传统中草药香加皮的主要活性成分杠柳毒苷致心律失常的风险。方法：采用离体组织（豚鼠乳突肌和兔浦肯野纤维）,给予浓度为0、0.3、1.0、3.0 μmol/L杠柳毒苷,检测其对动作电位的影响。指标包括：静息电位（resting membrane potential,RMP）、动作电位幅度（action potential amplitude,APA）、最大除极速度（maximal depolarization rate of phase 0,dv/dtmax）、复极30%、50%和90%动作电位时程（action potential duration at 30%,50% and 90% repolarization,APD30、APD50、APD90）。结果：与0 μmol/L组比较,0.3和1.0 μmol/L 杠柳毒苷可缩短豚鼠乳突肌的APD30和APD50;0.3、1.0、3.0 μmol/L杠柳毒苷降低兔浦肯野纤维的dv/dtmax;3.0 μmol/L杠柳毒苷减少兔浦肯野纤维的APA;1.0、3.0 μmol/L杠柳毒苷缩短兔浦肯野纤维的APD30。差异均有统计学意义。结论：杠柳毒苷有潜在诱导心律失常的风险。     

心肌损伤生物标志物在毒理学实验中的应用进展

心肌损伤生物标志物的检测在心脏疾病临床诊断上被广泛应用,但是在新药的非临床安全评价方面,心肌损伤标志物的应用相对滞后。目前中国、美国、经济合作发展组织(OECD)的新药安全评价指导原则推荐的检测心脏功能的指标为谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)。但是上述指标敏感性差(如AST)以及存在同工酶(如LDH和CK),所以不能特异灵敏地反映心脏的功能。目前国际上高度推崇采用敏感效应生物标志物来监测心脏的靶器官毒性。近年来肌红蛋白(Mb)、脑型钠尿肽(BNP)、心肌肌钙蛋白(cTn)对心肌损伤的检测展现了良好的应用价值,本文将对上述3项国内外研究最热点的心肌损伤生物标志物进行阐述。     

虚拟现实技术对脑卒中患者手功能康复效果的meta分析

目的:循证评价虚拟现实技术促进脑卒中患者偏瘫手功能康复的有效性。方法:检索国内外有关虚拟现实手功能训练与常规手训练对比治疗脑卒中患者偏瘫手运动障碍的临床随机对照试验。两位研究者独自完成筛选文献、提取资料、评价偏倚风险后,运用Rev Man软件进行meta分析。结果:最终纳入12篇临床随机对照试验。结果显示,试验组与对照组Fugl-Meyer运动功能评定量表腕/手评分具有显著性差异[WMD=2.41(95%CI=0.21, 4.61)],改良Barthel指数具有显著性差异[WMD=8.12(95%CI=3.42, 12.81)],握力(kg)无显著性差异[WMD=1.10(95%CI=-1.73, 3.93)],JHFT手功能测试完成任务时间无显著性差异[WMD=9.17(95%CI=-21.34, 39.69)]。结论:虚拟现实手功能训练能有效提高脑卒中患者偏瘫手运动功能及日常生活活动能力,并比常规手功能训练更有效。但二者在改善患者手部肌力方面差异不明显。受纳入文献质量及样本量限制,仍需开展更高质量的临床随机对照试验进行研究。     

卒中监护病房对急性脑卒中合并获得性肺炎的临床研究

目的探讨卒中监护病房卒中患者肺部感染的发生率及对肺部感染的疗效观察。方法选取在卒中单元监护病房收治的急性脑卒中患者68例,计算住院期间肺部感染发生率;并以同期在普通病房住院的急性脑卒中合并肺部感染者62例作为对照,观察卒中监护病房对急性脑卒中合并肺部感染发生率的影响及对急性脑卒中不良结局和死亡率的影响及2组的肺部感染发生率、近期预后。结果卒中单元监护病房中重度急性脑卒中肺部感染发生率23.8%(68/285),普通病房中重度急性脑卒中肺部感染发生率32.3%(62/192),卒中监护病房肺部感染率较普通病房有明显下降,且不良结局和死亡率也有明显下降(P<0.05)。结论卒中监护病房能明显减少急性脑卒中肺部感染的发生率、不良结局和死亡率。     

纳米和微米二氧化钛急性经口毒性的比较

目的 探讨小鼠经口灌胃纳米二氧化钛后的急性毒性反应.方法 以5 g/kg剂量分别用纳米二氧化钛和微米二氧化钛单次经口灌胃染毒小鼠,观察14 d后处死,比较纳米二氧化钛和微米二氧化钛对小鼠体重、摄食量、血清生化指标及脏器系数的影响.结果 纳米二氧化钛对小鼠体重、脏器系数没有明显影响;实验期间,小鼠的摄食量逐渐增加;纳米二氧化钛染毒雌性组天冬氨酸转氨酶(AST)活力明显低于微米二氧化钛组,差异有统计学意义(P＜0.01),且肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)与微米二氧化钛组、对照组相比,差异亦有统计学意义(P＜0.05).微米二氧化钛雌性组肌酸激酶(CK)活力明显高于对照组;纳米二氧化钛雄性组CK、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)活力明显高于微米二氧化钛组,微米二氧化钛雄性组LDH、α-HBDH活力明显低于对照组,纳米二氧化钛雄性组CK活力明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 纳米二氧化钛染毒未见明显的急性毒性反应,但对血液生化指标可能有一定的影响,且与微米二氧化钛的影响不同.     

基因芯片技术研究威替米星及庆大霉素对HK-2细胞毒作用的机制

目的:研究威替米星和庆大霉素对体外培养的人肾小管上皮细胞系(HK-2)毒性作用的分子机制。方法:利用基因芯片技术检测3.2 mg.mL-1威替米星和庆大霉素作用于HK-2细胞48 h后基因表达的变化。结果:威替米星诱导HK-2细胞87个基因发生显著的上调,10个基因发生明显的下调。庆大霉素则引起62个基因表达显著上调,18个基因明显下调。差异表达的基因的功能涉及细胞生长增殖调控、凋亡、细胞周期、应激反应、转运及代谢酶等方面。结论:威替米星和庆大霉素改变细胞凋亡、应激反应及转运等相关基因表达可能参与其细胞毒性作用过程。     

斑马鱼胚胎发育毒性评价方法的建立

目的以致胚胎毒性阳性药物全反式维甲酸（ATRA）及丙戊酸钠进行斑马鱼胚胎发育毒性试验,建立有效的斑马鱼胚胎发育毒性评价方法。方法采用水浴染毒法,将受精后2h（2hpf）的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度梯度的阳性约物。分别在24、48、72和144hpf观察并记录畸形及死亡的胚胎数目。统计阳性药物的EC50和LG50,计算致畸指数（TI=LC50／EG50）。结果两种阳性药物所致斑马鱼胚胎发育早期（24～48hpf）与发育后期（72～144hpf）的畸形表现不同。在72hpf,两种阳性药物对胚胎孵化率均有明显抑制作甩144hpf可见ATRA（≥1．6×10^-3mg／L）和丙戊酸钠（≥1．25×10^2mg／L）严晕致畸作用,T1分别为10.35和5．72。两种阳性药物胚胎敛畸率及死亡率均呈明显的浓度依赖关系,且与已有动物试验及体外试验结果相符。结论以两种阳性药物建立有效的斑马鱼胚胎发育毒性评价方法,可进行进一步的验证。