造血干细胞移植治疗白血病和淋巴瘤

目的：探讨造血干细胞移植治疗白血病和淋巴瘤的疗效、移植过程中的并发症及其预防和移植后的植活证据及微小残余病灶检测等问题。方法：２例行同胞间异基因骨髓移植（Ａｌｌｏ－ＢＭＴ）、５例行自体外周血干细胞移植（ＡＰＢＳＣＴ）。采用ＣｓＡ＋ＭＴＸ预防ＧＶＨＤ;ＰＧＥ１＋潘生丁预防ＨＶＯＤ;以ＡＰＯＢ、ＳＭ７和Ｄ１Ｓ８０三个位点多态性分析作为植活证据;以ｂｃｒ／ａｂｌ、ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因或ＩｇＨ基因重排     

氨磷汀对氢醌诱导骨髓细胞凋亡的影响

苯的代谢产物氢醌是苯的骨髓毒性作用的主要物质,其作用与细胞凋亡有关[1 ] 。而氨磷汀作为广谱细胞保护剂选择性地保护正常细胞免受放化疗的毒害作用已广泛应用于临床[2 ] 。我们在体外观察了氨磷汀对氢醌诱导的骨髓单个核细胞凋亡的影响,以探讨氨磷汀对苯骨髓毒性的保护作用。材料和方法1　药物及主要试剂　1 ,4 氢醌购自上海凌峰化学试剂有限公司,灭菌双蒸水配制成原溶液。阿米福汀(注射用氨磷汀)购自湖南银河生化工程有限公司,生理盐水配制成原溶液。按不同倍数稀释成所需浓度。膜联蛋白(Annexin)Ⅴ FITC试剂盒购自CaltagLabratoies…     

维甲酸综合征的呼吸系统表现

全反式维甲酸(ATRA)是目前治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的首选药物之一，维甲酸综合征是其治疗时发生的一组以白细胞增高为主要表现的临床综合征，其呼吸系统表现酷似肺部严重感染及急性呼吸窘迫综合征(ARDS)呼吸系统的表现作重点描述，以期提高对该病的认识。     

氢醌诱导造血细胞凋亡的体外研究

目的:研究体外培养条件下氢醌对骨髓和脐血单个核细胞凋亡的影响,探讨苯对造血细胞毒性作用的机制。方法:分离单个核细胞。加入不同浓度氢醌,采用流式细胞术AnnexinV-FITC加碘化丙啶(PI)双染定量检测不同时间细胞凋亡率和坏死率的变化。结果:氢醌能诱导骨髓单个核细胞凋亡,并存在量效和时效关系,氢醌诱导细胞凋亡的最佳浓度为50μmol/L,细胞凋亡的高峰时间为10h。氢醌能诱导脐血单个核细胞凋亡,与药物浓度和和作用时间有关,以75μmol/L作用8h较为显著。结论:苯代谢产物诱导的造血细胞凋亡和坏死可能是苯中毒导致的造血功能障碍的主要机制之一。     

N-乙酰半胱氨酸对苯再生障碍性贫血小鼠氧化指标的影响观察

目的:初步探讨苯在小鼠体内引起损伤的可能机制以及N-乙酰半胱氨酸(NAC)的保护作用。方法:CD1小鼠50只,随机分成3组,A组10只,为玉米油对照组,单纯皮下注射玉米油4ml/kg,每周3次,共25次;B组20只,每周3次于小鼠背侧皮下注射苯2ml/kg(苯用等量玉米油稀释,均匀混合);C组20只,在皮下注射苯的基础上同时口服NAC,按400mg·kg-1·d-1给予。分别处理各组小鼠并检测相关指标。结果:①B、C组与A组比较外周血WBC、Hb、Ret等指标显著降低;②C组与B组比较,除PLT无显著性差异外,WBC、Hb、Ret均有明显改善,均P<0.05,提示NAC对苯的血液学毒性有一定的预防作用;③与A组比较,B、C组各氧化指标均显著增高,其中B组与A组比较活性氧、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)均P<0.01,总抗氧化物(T-AOC)P<0.05,GSH含量无明显变化,巯基(-SH)下降P<0.01;C组与A组相比活性氧P<0.05、MDA、SOD、CAT均P<0.01,T-AOCP<0.05,还原型谷胱甘肽(GSH)含量升高,P<0.01,-SH含量无显著变化;④C组与B组相比各氧化指标均显著降低,活性氧、MDA、SOD、CAT均P<0.01、T-AOCP<0.05。结论:①苯诱发小鼠造血损伤的机制中有氧化损伤作用的参与;②NAC在小鼠体内一定程度上减轻了苯的血液学毒性,其中NAC的抗氧化作用是一个重要因素。     

氢醌对人骨髓单个核细胞拓扑异构酶Ⅱα表达的影响

目的 研究苯代谢物氢醌(hydroquinone,HQ)对人骨髓单个核细胞中拓扑异构酶(TOPO)Ⅱα表达的影响,探讨TOPOⅡα在HQ所致造血毒性中的作用及调控机制.方法 50μmol/LHQ处理的正常人骨髓单个核细胞为实验组,设立对照组(等体积灭菌蒸馏水培养),应用TOPOⅡ检测试剂盒检测TOPOⅡ的活力,免疫印迹法(Western blotting)检测TOPOⅡα含量的变化,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TOPOⅡα mRNA表达水平的改变,染色质免疫沉淀分析法(ChIp)检测TOPOⅡα含量的变化.结果 (1)正常人骨髓单个核细胞50 μmol/LHQ处理10 h后,TOPOⅡ的活力下降,TOPOⅡα含量以及TOPOⅡαmRNA水平分别为0.017±0.029、0.610±0.128,较对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);(2)TOPOⅡα含量降低伴随着TOPOⅡα启动子组蛋白H4乙酰化水平的明显降低(分别为1.198±0.056、0.324±0.229),差异有统计学意义(P<0.01),不伴有组蛋白H3乙酰化水平的改变,分别为1.253±0.045、1.177±0.025;(3)HQ接触不同时间TOPOⅡαmRNA水平呈动态变化,且TOPOⅡα启动子水平的变化早于mRNA水平的变化.结论 HQ可抑制造血细胞TOPOⅡα的表达.组蛋白化学修饰水平的改变在苯代谢物所致的造血毒性中发挥一定的作用.     

Survivin在多发性骨髓瘤中的表达及其与VEGF的相关性

目的研究Survivin在多发性骨髓瘤（MM）中的表达及其与血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）之间的相关性。方法采用RT-PCR和Western blot法检测骨髓瘤细胞系RPMI8226及28例MM患者（其中初治16例、复发,难治12例）,6例正常人骨髓细胞中Survivin和VEGF mRNA、蛋白质表达水平。结果骨髓瘤细胞系RPMI8226高表达Survivin和VEGF。Survivin mRNA在正常人、初治和难治／复发MM患者骨髓细胞中阳性率分别为19．8％、77．3％和80．2％,表达水平（Survivin与内参比）分别为0．07±0．03、0．37±0．12和1．2±0．31,MM患者表达率和表达水平显著高于正常人（P〈0．01）,而难治／复发MM组表达水平高于初治组（P〈0．05）。在初治和难治／复发MM组Survivin蛋白阳性率分别为43．8％和61％（P〉0．05）,难治,复发MM组表达水平明显高于初治组。VEGF在MM中的表达变化与Survivin呈相同趋势。结论Survivin和VEGF参与了MM的发病且与疾病进展有关,两者间存在协同关系。     

Mito-FLAG方案治疗难治/复发急性髓细胞白血病的临床观察

目的:研究Mito-FLAG方案(米托蒽醌、氟达拉滨、阿糖胞苷和粒细胞集落刺激因子联合应用)治疗难治/复发急性髓细胞白血病的疗效和不良反应。方法:Mito10mg/dd1(1例15mg/d,d1;另有1例5mg/d,d1-5);Flu30mg·m-2·d-1静脉滴注30min,d1-5;Ara-C1.5g·m-2·d-1静脉滴注4h,d1-5;G-CSF300μg·kg-1·d-1从d0开始一直应用到白细胞恢复至20.0×109/L。治疗9例(11例次)难治/复发AML。结果:9例患者完全缓解率44.4%,其中7例难治AML的完全缓解率为57%,所有病例总有效率达66.7%,无效3例,其中早期死亡1例。毒副作用为骨髓抑制、消化道症状、轻度黄疸和静脉炎等。结论:Mito-FLAG方案治疗难治复发AML有较好的疗效,且毒副作用可以耐受,可用于治疗对其他化疗方案无效的难治/复发AML,并为患者赢得了进行造血干细胞移植的时机。     

重组anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ非复制型逆转录病毒的构建

目的:构建pLNCX/anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ的重组真核表达载体,转染PA 317细胞株,包装制备重组非复制型逆转录病毒.方法:采用DNA重组技术把pBULLET上的CD28-ζcDNA插入到已含anti-CD20 scFv/CD80的真核逆转录病毒载体pLNCX质粒上,转染PA 317细胞株,经G418筛选,收获上清液获非复制型逆转录病毒,将病毒感染NIH 3T3细胞株,用PCR、流式细胞术检测目的基因在NIH 3T3细胞中的表达情况,确定病毒滴度.结果:经酶切及测序鉴定均证实pLNCX/anti-CD20scFv/CD80/CD28/ζ的成功构建;采用PCR方法能够从逆转录病毒感染的NIH 3T3细胞中扩增出一条与目的基因大小一致的DNA片段;流式细胞术检测显示该目的基因能够在NIH 3T3细胞中表达目的蛋白.结论:成功构建高滴度表达anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ非复制型逆转录病毒,并能在NIH 3T3细胞中表达目的蛋白.     

雷利度胺单用或联合用药治疗多发性骨髓瘤

目的为了观察雷利度胺在我国多发性骨髓瘤患者中的疗效和不良反应。方法对10例多发性骨髓瘤患者采用单用雷利度胺或联合用药治疗。结果nCR1例,PR1例,MR1例,NC3例,PD4例,总有效率70.0(包括4例PD,曾经有效后进展)。中位治疗反应时间为5.1(1～16)周。不良反应:粒细胞减少3例,血小板减少1例,轻微乏力,头晕2例,过敏性皮疹1例,低钾血症1例,合并肺部感染2例,短暂性脑缺血发作1例。结论雷利度胺单用或联合用药疗效较佳,其不良反应较少,患者耐受良好,并且可以在门诊应用。