幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病患儿MMP-7基因多态性研究

目的 研究基质金属蛋白酶-7(MMP-7)基因启动子多态性与儿童幽门螺杆菌(H-pylori)相关性慢性胃炎、十二指肠溃疡的易感性和临床特征的关系.方法 提取100例慢性胃炎、32例十二指肠溃疡和102例健康对照组儿童的外周血或胃黏膜基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)和测序方法检测其MMP-7基因-181A/G多态性位点的基因型,分析该基因的基因型和等位基因频率在病例组和对照组人群中的分布及基因型分布与临床病理特征的关系,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组胃黏膜MMP-7 mRNA的表达.结果 MMP-7基因-181A/G多态性位点的基因型和等位基因频率在病例组和对照组人群中的分布差别无统计学意义,亦与H.pylori易感性无关.MMP-7基因-181A/G多态性不影响MMP-7 mRNA在胃黏膜中的表达,且与胃窦黏膜慢性炎症程度无相关性.结论 MMP-7基因-181A/G多态性与儿童慢性胃炎和十二指肠溃疡发生的易感性无关.     

基质金属蛋白酶-9基因多态性与儿童幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病的关系

目的：研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）基因启动子多态性与儿童幽门螺杆菌（Hp）相关性慢性胃炎、十二指肠溃疡的易感性和临床特征的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)和测序方法,对100例慢性胃炎及32例十二指肠溃疡儿童和102例健康对照组儿童的MMP-9 基因-1562C/T多态性进行检测。采用反转录 聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测胃黏膜MMP-9 mRNA的表达。结果：MMP-9基因-1562 C/T多态性位点的基因型和等位基因频率在病例组和对照组儿童中的分布无明显差别。在慢性胃炎组中,C/C基因型携带者发生Hp感染的风险是T等位基因（C/T+T/T）携带者的3.1倍。MMP-9 基因-1562C/T多态性不影响MMP-9 mRNA在胃黏膜中的表达水平。结论：MMP-9 基因-1562C/T多态性与儿童慢性胃炎和十二指肠溃疡的发生无相关性,该基因位点的C/C基因型携带者可能与Hp易感性相关。［中国当代儿科杂志,2010,12（4）：262-266］     

牛磺酸对内毒素血症幼鼠肠屏障功能障碍的保护作用

目的 探讨牛磺酸在内毒素血症所致肠黏膜损伤中的作用.方法 腹腔注射大肠杆菌脂多糖(5 mg/kg)以建立幼鼠内毒素血症动物模型.健康18日龄Wistar大鼠72只,随机分为内毒素血症组(LPS组)、牛磺酸干预组(TAU组)、正常对照组(NS组).LPS组和TAU组制模后分为2、6、12、24 h 4个亚组,每亚组8只.在4个时间点分别取肠黏膜标本制备石蜡切片和组织匀浆,光学显微镜及电子显微镜下观察小肠组织病理改变,免疫组织化学染色技术检测NF-κB活化水平,ELISA法检测肠组织匀浆TNF-α和IL-6.结果 LPS组病理结果示微绒毛萎缩、脱落,线粒体严重肿胀,呈空泡变性,染色质浓缩分布于核周边,核仁碎裂消失,凋亡细胞多见,细胞结构紊乱、异常;小肠组织NF-κB活化水平检测结果示各时间点的核阳性细胞比率均较NS组高,以2 h最明显;2 h时小肠匀浆TNF-α、IL-6含量明显高于NS组.TAU可以明显降低NF-κB活化和TNF-α、IL-6组的水平,肠道黏膜损伤较LPs组减轻.结论 TAU可通过减少肠道NF-κB活化,降低炎性因子TNF-α、IL-6水平,保护肠黏膜屏障功能.     

胃肠功能障碍与NF-κB的联系

胃肠功能障碍与炎性反应密切相关。核因子κB（NF-κB）是一种广泛存在于机体各种细胞中的核转录因子，参与多种炎性反应基因的转录和调控，在炎症免疫反应中发挥重要作用。因此，了解胃肠功能障碍与NF-κB的联系，有助于对胃肠功能障碍的临床防治。     

儿童Hp相关性胃十二指肠疾病基质金属蛋白酶-9基因表达的研究

目的 探讨儿童幽门螺杆菌(Hp)相关性胃十二指肠疾病中胃黏膜基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况.方法 对具有上消化道不适主诉症状的儿童(包括66例慢性胃炎及30例十二指肠溃疡患儿)经上消化内镜检查获取胃黏膜活检标本.根据Sydney胃炎标准对HE染色的活检组织进行胃窦黏膜慢性炎症程度评价.血清Hp-IgG抗体检测、聚合酶链反应(PCR)、尿素酶试验及组织学检查作为确定Hp感染状态的依据.所有病例采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法及免疫组化法检测胃黏膜MMP-9的表达.结果 胃黏膜MMP-9 mRNA阳性表达率及表达水平在不同的Hp感染状态中无明显差异,其表达水平与胃窦黏膜慢性炎症程度无关.免疫组化染色显示MMP-9主要在炎症细胞中表达.结论 Hp感染对儿童胃十二指肠疾病的胃黏膜MMP-9的表达无影响.     

内毒素血症幼鼠小肠黏膜组织学及血浆、肠组织二胺氧化酶、血浆D-乳酸的变化

目的 观察内毒素血症幼鼠小肠黏膜组织学及血浆、肠组织二胺氧化酶(DAO)、血浆D-乳酸的变化.方法 18日龄wistar大鼠48只,随机分为内毒素血症组(n=40),正常对照组(n=8),内毒素血症组根据注射脂多糖(LPS)后取标本时间分为1.5 h、6 h、24 h、72 h、7 d共5个亚组,各组于各时间点分别取血浆及小肠匀浆,测定血浆DAO活性及D-乳酸、小肠匀浆DAO值.结果 (1)内毒素血症组呈小肠黏膜损伤的组织学改变;(2)内毒素血症1.5 h、6 h、24 h、72 h亚组血浆DAO较正常对照组增高(P<0.05);而7 d亚组较正常对照组偏低;(3)内毒素血症各亚组小肠组织DAO低于正常对照组DAO;(4)内毒素血症组血浆D-乳酸较正常组增高(P<0.05);(5)血浆DAO与小肠组织DAO含量呈负相关(r=-0.392,P=0.006).结论 腹腔注射LPS可以引起小肠上皮细胞受损,紧密连接破坏,肠通透性增加,提示临床上可以通过测定血浆DAO及D-乳酸来及时了解肠道屏障功能.     

内毒素血症肝损伤幼年大鼠肝脏NF-κB的变化

目的：研究内毒素血症肝损伤幼年大鼠肝脏NF-κB的变化及与TNF-α、IL-6的关系。方法：18日龄Wistar大鼠40只随机分为正常对照组和内毒素血症组,内毒素血症组根据制模后取标本时间不同分2 h、6 h、12 h、24 h 4个亚组（n=8）。内毒素血症组腹腔注射LPS 5 mg/kg制备内毒素血症动物模型。观察各组肝细胞的病理改变,ELISA测定肝组织匀浆TNF-α、IL-6含量,赖氏法测血清丙氨酸转氨酶（ALT）浓度,免疫组化法检测肝组织NF-κB活化水平。结果：光镜下内毒素血症组肝组织损伤以6 h最明显,损伤等级评分在各个时间点均较正常对照组高（P<0.05）;内毒素血症组ALT水平6 h、12 h及24 h均较正常对照组增高（P<0.05）;内毒素血症组各个时间点肝细胞NF-κB p65蛋白表达的阳性细胞百分比均较正常对照组高（P<0.05）;肝组织TNF-α、IL-6检测显示内毒素血症组6 h、12 h高于正常对照组（P<0.05）。结论：内毒素血症可引起肝损伤,导致肝细胞的破坏和肝功能的改变;NF-κB的活化参与了内毒素血症肝损伤的发生,可能是通过介导炎症因子TNF-α和IL-6的合成使肝细胞发生炎性损伤。［中国当代儿科杂志,2010,12（10）：804-808］     

Citrin缺陷致肝内胆汁淤积症患儿的血串联质谱及尿气相色谱分析

目的 探讨Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)的诊断方法.方法 婴儿胆汁淤积、黄疸63例,其中确诊为NICCD 5例.对确诊患儿的临床表现、常规实验室检查结果、血串联质谱和尿气相色谱进行分析.结果 NICCD患儿临床表现为黄疸,不同程度的肝脾肿大,肝功能异常并伴有凝血功能异常、高氨血症、高甲胎蛋白、不同程度贫血.血串联质谱分析发现患儿瓜氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、酪氨酸水平升高,长链酰基肉碱C14、C16水平升高.尿气相色谱有机酸分析发现患儿苯乳酸-2、尿4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸和4-羟基苯乙酸水平升高.结论 NICCD早期临床表现及常规实验室检查结果无特异性,早期进行血串联质谱分析、尿气象色谱分析对明确NICCD的诊断具有重要意义.     

婴儿巨细胞病毒肝炎86例临床分析

本文分析了86例婴儿巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)肝炎患儿的临床特点,同时探讨该病患儿尿液中CMV-DNA拷贝数的高低与肝功能指标的关系.